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稳定表达乙型流感病毒血凝素蛋白细胞的构建: 2017年; 获得稳定表达乙型流感病毒血凝素蛋白的HEK-293-HA细胞株。采用RT-PCR方法扩增乙型流感病毒的HA基因,将其克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)上,构建pcDNA3.1(+)-HA重组质粒。将已鉴定正确的pcDNA3.1(+)-HA质粒与辅助质粒PLV-EF1a-EGFP(2A)Puro通过脂质体介导法共转染HEK293细胞,经嘌呤霉素筛选后得到重组细胞株HEK293-HA,通过流式细胞术法(FCM)来检测细胞中HA的表达情况。所得到的重组细胞经扩大培养后再连续培养15代,采用间接免疫荧光法(IFA)和蛋白免疫印迹法(WB)来检测HA蛋白表达的稳定性。结果表明重组质粒pcDNA3.1(+)-HA经双酶切及测序鉴定正确;共获得3株高表达阳性细胞株。细胞扩大培养后连续传代培养15代后进行Western blot和IFA检测结果表明,重组细胞的HA蛋白得到稳定的表达。已成功获得了能稳定表达乙型流感病毒血凝素蛋白的HEK-293-HA细胞,可为乙型流感病毒HA蛋白的进一步研究提供良好的基础。; 黄文波刘振卫周荣李潇曾军李小锋苏晓波; 关键词：乙型流感病毒细胞株

稳定表达乙型流感病毒血凝素蛋白细胞的构建与鉴定: 目的：　　构建能够稳定表达B型流感病毒血凝素蛋白的细胞系，为乙型流感病毒的免疫学研究提供靶细胞以及为新型疫苗的研发奠定基础。　　方法：　　在MDCK细胞扩增Victoria系乙型流感病毒，提取乙流病毒RNA并以其为模板，...; 黄文波; 关键词：B型流感病毒血凝素蛋白 HEK293细胞嘌呤霉素免疫学活性; 文献传递

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黄文波