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抑制TLR4信号通路对小鼠肝原位种植瘤的影响被引量：1: 2018年; 目的 TLR4信号通路可能和肝癌发生发展相关,文中旨在构建小鼠肝癌原位种植模型,通过体内实验研究抑制肝癌H22细胞TLR4信号通路对小鼠肝种植瘤的影响。方法构建TLR4基因沉默siRNA慢病毒载体,并转染小鼠肝癌H22细胞。实验分为空白对照组、空载体组及干扰载体组,空白对照组H22细胞未做处理,空载体组为未转入TLR4基因沉默siRNA慢病毒载体的H22细胞,干扰载体组为转入TLR4基因沉默siRNA慢病毒载体的H22细胞。计算各组小鼠肝种植瘤的体积,Western blot和免疫组化检测TLR4、My D88、NF-κB、TRAM蛋白分子的表达。结果干扰载体组肝癌移植瘤体积[(568.3±90.3)mm3]较空白对照组及空载体组[(1 303.0±194.1)、(1 385.0±137.0)mm3]减小(P<0.05)。Western blot和免疫组化检测干扰载体组肝癌移植瘤TLR4、My D88、NF-κB、TRAM蛋白的表达比空白对照组和空载体组降低(P<0.05)。结论下调TLR4信号能抑制小鼠肝癌原位种植瘤生长。其机制可能通过My D88依赖性途径作用NF-κB信号及非My D88依赖性途径作用TRAM接头蛋白。; 赵方邹松杉胡明道陈鹏刘锋; 关键词：TLR4信号通路小鼠肝细胞癌

恒河猴MyD88基因沉默siRNA腺病毒载体的构建与鉴定: 2018年; 目的构建恒河猴MyD88基因沉默siRNA腺病毒载体,观察MyD88siRNA对树突状细胞中MyD88蛋白表达的影响。方法将合成的MyD88RNAi片段与质粒载体连接,转化进化学感受态的大肠杆菌,然后进行菌落PCR鉴定、阳性克隆测序及质粒的抽提;然后转染HEK293细胞,将获得的重组腺病毒进行两轮扩增后进行纯化;用终点稀释法测定腺病毒滴度;Western blot检测MyD88siRNA对树突状细胞中MyD88蛋白表达的作用。结果阳性克隆PCR鉴定与理论条带一致,测序鉴定通过,腺病毒载体转染树突状细胞,Western blot检测显示干扰组MyD88蛋白表达降低。结论成功构建恒河猴MyD88基因沉默siRNA腺病毒载体,MyD88siRNA对恒河猴树突状细胞中的MyD88蛋白表达具有抑制作用。; 赵方陈鹏焦剑胡明道黄明刘锋许晔凯; 关键词：恒河猴 MYD88 SIRNA 腺病毒载体

小鼠H22肝癌肺转移模型的建立及其意义被引量：4: 2017年; 目的:建立小鼠H22肝癌肺转移模型,为后续研究肝癌的侵袭转移机制奠定实验基础。方法:复苏H22肝癌细胞,在培养皿中进行传代培养并计数,当细胞达到预定数目时,收集处于对数期细胞,用生理盐水洗涤2次,调整细胞浓度为1.0×10~7/ml,取0.5ml细胞悬液在无菌环境下注射到小鼠腹腔进行体内传代培养,收集小鼠腹水瘤细胞,用生理盐水洗涤2次,细胞浓度调至2×10~7/ml,取50μl细胞悬液通过小鼠尾静脉注射到小鼠体内,14d后人道主义处死小鼠,解剖取出小鼠全肺组织,病理组织学方法鉴定肿瘤组织,全肺连续切片,显微镜下计数肿瘤转移灶数目。结果:全部小鼠肺组织均肿瘤转移灶形成,肉眼可见成肺组织表面微小转移灶,病理鉴定为肝癌肺转移灶,小鼠肺部肿瘤转移灶数平均为23个。结论:成功建立了小鼠H22肝癌肺转移模型,为研究肝癌转移机制提供了理想的动物模型。; 赵方胡明道陈鹏; 关键词：小鼠 H22细胞肝癌肺转移

儿童脾巨大囊性淋巴管瘤一例被引量：1: 2018年; 患者男,12岁,1个月前无明显诱因出现左上腹疼痛,呈隐痛,无发热、寒战,无恶心、呕吐,无头晕、乏力,无腹胀、腹泻、呕血、黑便。2个月前曾在当地医院体检发现脾囊性占位性病变。专科体检左侧肋缘可触及脾脏,肋缘下3横指。实验室检查未见明显异常;; 赵方陈鹏胡明道刘锋; 关键词：囊性淋巴管瘤 MRI 占位性病变囊性占位

小鼠肝癌原位移植模型的建立及其研究意义被引量：9: 2017年; 目的:建立小鼠的肝癌原位移植模型,为研究肝癌的侵袭转移机制奠定基础。方法:体外培养小鼠肝癌细胞株H22细胞并进行传代,调整细胞浓度为1×10~7/ml,接种到小鼠腹腔,进行腹腔传代培养,腹腔传代3次后,收集腹水瘤细胞,用生理盐水洗涤2遍,调整细胞浓度为2×10~7/ml,用50μl的微量注射器无菌开腹直视下向小鼠肝脏左叶注入50μl的H22细胞,术后常规饲养,14天后人道主义处死小鼠,解剖观察小鼠肝脏肿瘤形成情况,病理组织学方法鉴定肿瘤组织。结果:肉眼可见肿瘤结节形成良好,成瘤率高,病理鉴定为肝癌。结论:成功建立了小鼠的肝癌原位移植模型,为后续研究肝癌的免疫逃逸和侵袭转移提供了实验基础。; 赵方胡明道陈鹏; 关键词：小鼠 H22细胞

槲皮素对裸鼠肝癌切除术后肿瘤肺转移的影响被引量：2: 2018年; 目的:通过体内实验研究槲皮素能否抑制裸鼠肝癌切除术后的肿瘤肺转移。方法:建立模拟人肝癌切除术后肿瘤肺转移的裸鼠模型,实验组裸鼠槲皮素75 mg/(kg·d)灌胃,观察各组裸鼠肺转移情况。结果:槲皮素组较对照组肺转移数目减少[(3.25±1.61)个/只vs(6.23±1.44)个/只,P<0.05]。结论:槲皮素能够抑制裸鼠肝癌术后肿瘤的肺转移。; 陈鹏阳锡军赵方李春满刘锋阿永俊; 关键词：槲皮素肝癌肝切除术肺转移

抑制TLR4信号通路对小鼠肝脏原位种植瘤的影响: [目的]通过构建TLR4基因沉默SiRNA慢病毒载体,并转染小鼠肝癌H22细胞,传代培养H22细胞,构建小鼠肝癌原位种植瘤模型,观察小鼠肝脏种植瘤体积,应用western blotting和免疫组化检测TLR4蛋白分子,...; 赵方; 关键词：TLR4信号通路小鼠 H22肝癌细胞; 文献传递

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赵方