张萍
- 作品数：66 被引量：125H指数：7
- 供职机构：东北农业大学动物医学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域：农业科学文化科学经济管理轻工技术与工程更多>>
- 浅析二维码在实验动物学教学中的应用被引量：2
- 2019年
- 在信息技术发达的现代社会,随着校园网络的完善和智能手机的普及,二维码在高校教学中的应用已经成为趋势。笔者将二维码技术融合于实验动物教学中,探索了二维码技术在教学方法、考核评价体系以及实验、实践等教学环节中的应用。
- 董秀梅张萍魏萍
- 关键词：实验动物学教学二维码实践教学
- 马传染性贫血病毒基质蛋白p15单克隆抗体的制备
- 2009年
- 为制备抗马传染性贫病毒(EIAV)的单克隆抗体(MAb),本研究用纯化的重组EIAV基质蛋白作为免疫原免疫BALB/c小鼠,采用淋巴细胞杂交瘤技术,建立了抗EIAV基质蛋白p15抗体的杂交瘤细胞。应用重组p15和EIAV总蛋白为抗原建立的ELISA以及EIAV感染细胞的间接免疫荧光法,对杂交瘤细胞进行了有限稀释法筛选,获得了7株稳定分泌抗p15抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为:1F12、1E2、1E3、4B10、4H7、5E5、4G5。这些抗p15 MAb均能与感染驴胎皮肤细胞的EIAV和经SDS-PAGE分离的EIAV总蛋白中的相应蛋白结合。抗体效价叠加实验表明,这7株MAb中含有至少3种识别不同抗原决定簇的抗体。这些p15 MAb的获得有助于对EIAV和慢病毒的深入研究。
- 张萍于在江韩秀娥王雪峰朱远茂周建华魏萍
- 关键词：马传染性贫血病毒单克隆抗体
- 一种番茄节间长短早期鉴定的SCAR标记及鉴定方法
- 本发明属于植物分子标记技术领域，特别是涉及一种番茄节间长短早期鉴定的SCAR标记及鉴定方法。本发明公开了番茄节间长短早期鉴定的SCAR标记TTHH‑F0R0，其核苷酸序列如SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所...
- 杨欢欢姜景彬王特许向阳张萍李景富赵婷婷张贺
- 文献传递
- 影响大肠杆菌不耐热肠毒素2型毒性的氨基酸初步筛选
- 2022年
- 为探究影响产肠毒素大肠杆菌(ETEC)不耐热肠毒素2型(LT2)毒性的关键氨基酸及其突变重组蛋白的免疫原性,本研究扩增了LT2编码基因elt2,并采用重叠延伸PCR(SOE PCR)方法分别对其A亚基进行R5K、H42A、S59K、V95K、Y102K和E110K的单突变,将elt2及其6个突变基因分别双酶切后克隆于pET-30a中构建重组大肠杆菌pET-30a-elt2/BL21、pET-30a-R5K/BL21、pET-30a-H42A/BL21、pET-30a-S59K/BL21、pET-30a-V95K/BL21、pET-30a-Y102K/BL21、pET-30a-E110K/BL21,经IPTG诱导表达了重组LT2(rLT2)及其突变重组蛋白mrLT2-R5K、mrLT2-H42A、mrLT2-S59K、mrLT2-V95K、mrLT2-Y102K、mrLT2-E110K;利用细胞毒性试验和小鼠致病性试验比较了rLT2和突变重组蛋白对小鼠肾上腺皮质瘤(Y1)细胞的毒性作用及对小鼠的致病性,并将rLT2和mrLT2-V95K作为免疫原接种小鼠检测其对小鼠的免疫原性。结果显示,突变重组蛋白对Y1细胞的毒性作用均弱于rLT2,其中mrLT2-V95K对Y1细胞的毒性作用最弱为1.145×10^(1)TCID_(50)/0.1 mL;rLT2及该突变重组蛋白对小鼠均无致病性,表明小鼠也不适合用于LT2的致病性检测。mrLT2-V95K免疫BALB/c小鼠的血清特异性IgG抗体效价和对rLT2的中和抗体效价分别为1:102 400和1:32,与rLT2的免疫原性无显著差异。本研究首次证实LT2 A亚基的aa95对LT2细胞毒性作用的影响较明显,其突变重组蛋白具有良好的免疫原性,为大肠杆菌减毒疫苗研究提供了重要科学信息。
- 石博侯美佳孙思萌刘嘉利董秀梅杨巍杨巍师东方
- 关键词：产肠毒素大肠杆菌定点突变重组蛋白免疫原性
- 食淀粉乳杆菌联合芦丁干预PoRV感染后肠道紧密连接蛋白及其相关因子变化被引量：3
- 2023年
- 通过益生菌联合多酚共同对抗猪轮状病毒(Porcine rotavirus,PoRV)感染,利用食淀粉乳杆菌和芦丁干预PoRV感染清洁级中国昆明鼠乳鼠,分为正常对照组(Control组)、病毒组(RV组)、食淀粉乳杆菌预防组(SR组)、芦丁1 mg·kg^(-1)预防组(LR组)、芦丁20 mg·kg^(-1)预防组(HR组)、食淀粉乳杆菌联合1 mg·kg^(-1)芦丁预防组(SLR组),应用实时荧光定量PCR和免疫组化检测Occludin和Claudin-4 mRNA相对表达量及蛋白分布,ELISA定量检测RV、胰蛋白酶、PAR-2、TGF-β和MMP-9含量。结果表明,RV组病毒含量最高,RV组Occludin mRNA相对表达量显著低于其他组,Claudin-4 mRNA相对表达量显著高于其他预防组,Claudin-4蛋白在肠道组织中分布不均;其他组Claudin-4 mRNA相对表达量均降低,但蛋白分布无改变。RV组胰蛋白酶、PAR-2、TGF-β和MMP-9含量均高于其他组;SLR组TGF-β含量低于SR组,MMP-9含量低于SR组。说明食淀粉乳杆菌和芦丁通过增加Occludin蛋白表达,抑制Claudin-4蛋白过表达及异常分布,下调胰蛋白酶、PAR-2、TGF-β及MMP-9含量,改善感染PoRV后肠道内相关因子异常分泌,减弱肠道损伤。
- 魏萍耿天颖王琦张萍
- 关键词：猪轮状病毒芦丁紧密连接蛋白
- 黄芪多糖和枯草芽孢杆菌代谢产物在PK-15细胞上对TGEV的影响被引量：7
- 2017年
- 为了研究黄芪多糖和枯草芽孢杆菌代谢产物在PK-15细胞上对猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)的影响,在TGEV感染PK-15细胞时分别加入枯草芽孢杆菌代谢产物、黄芪多糖以及联合物,采用MTT法检测其病毒抑制率,荧光定量PCR法检测枯草芽孢杆菌代谢产物及黄芪多糖联合后对TGEV N及IFN-γmRNA表达量的影响。结果表明:枯草芽孢杆菌代谢产物具有抗TGEV作用,单独使用黄芪多糖同样能抑制TGEV感染PK-15细胞,联合处理后病毒抑制率显著上升。荧光定量PCR结果表明,经过联合物处理的PK-15细胞中的TGEV N基因表达量显著降低,3 h和6 h时PK-15细胞内的IFN-γmRNA表达量显著上升。
- 汪帅男王璐张萍魏萍
- 关键词：黄芪多糖猪传染性胃肠炎病毒
- 发挥技术市场作用,促进技术成果转化
- 2012年
- 技术市场作为技术创新成果交易和转化的一个平台，是我国市场经济中重要的要素市场。在20多年的发展期，促进了我国经济增长和推动国家创新体系的建设。技术市场具有激励技术创新、科技成果转化和技术资源配置三大功能，从而促进科技成果的商品化、产业化和国际化。开拓技术市场是我国科技体制改革的重大举措之一，国家鼓励科研单位面向经济建设，进入技术市场，充分利用本单位的科研成果，开展技术开发、技术服务、经济咨询、技术转让等技术交易活动。
- 张萍
- 关键词：科技成果转化国家创新体系市场经济
- 用于检测犬瘟热病毒血凝蛋白H抗体的致敏聚苯乙烯纳米微球及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种用于检测犬瘟热病毒血凝蛋白H抗体的致敏聚苯乙烯纳米微球及其制备方法和应用。所述的致敏聚苯乙烯纳米微球的表面偶联有犬瘟热病毒重组血凝蛋白H，所述的重组血凝蛋白H为犬瘟热病毒血凝蛋白H的截短蛋白，位于犬瘟热病...
- 师东方苏瑞红董秀梅唐毓张萍
- 文献传递
- 嗜酸乳杆菌S层蛋白抗NDV感染鸡肠上皮细胞作用初探
- 2015年
- 为了评价S层蛋白在嗜酸乳杆菌抗病毒作用中参与抗病毒的程度,本试验进行了嗜酸乳杆菌不同成分抗NDV感染IEC(Primary intestinal epithelial cells of chick embryo鸡胚肠上皮原代细胞)作用研究,设计3组试验:1预防试验、2治疗试验、3混合感作试验。结果显示,S层蛋白对病毒抑制性最强,菌体其次,脱S层蛋白菌体次之,代谢产物抑制病毒率最低。为了进一步研究S层蛋白与病毒之间的作用关系,用间接ELISA方法检测病毒与S层蛋白的粘附性,评价了牛血清白蛋白有无病毒抑制性,方法同S层蛋白的病毒抑制试验。试验结果显示,S层蛋白与白蛋白都能粘附NDV,但是只有S蛋白对病毒具有显著的抑制性,白蛋白抑制病毒性质并不明显。
- 张萍贾国东魏萍
- 关键词：抗病毒感染
- 马传染性贫血病毒囊膜基因gp90 V4区糖基化回复突变感染性克隆的构建
- 2009年
- 为了阐明我国马传染性贫血病毒(EIAV)弱毒疫苗致弱及免疫保护的分子机制,本研究分析了疫苗株及其亲本强毒株共34个囊膜基因序列。结果发现疫苗株在膜基因gp90V4区潜在的N-连接糖基化位点出现了稳定的碱基替换,使该位点消失。为研究囊膜糖基化的作用,以疫苗株全长感染性克隆pLGFD3-8为亲本,利用反向遗传技术对该突变位点进行了糖基化序列回复突变操作,构建了全基因感染性克隆pLGFDg9。将其转染驴胎皮肤细胞(FDD),通过用逆转录酶活性、间接免疫荧光和RT-PCR方法检测而确定其感染性。结果表明,在FDD细胞中盲传3代后,在细胞培养物中可检测到逆转录酶活性,RT-PCR和间接免疫荧光检测均呈阳性,电镜下见到典型的EIAV颗粒。
- 韩秀娥张萍王雪峰孔宪刚周建华相文华
- 关键词：马传染性贫血病毒定点突变感染性克隆
