王艳梅
- 作品数：19 被引量：88H指数：5
- 供职机构：解放军第309医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 丙型肝炎病毒非结构蛋白3的体外表达与纯化
- 2012年
- 目的构建丙型肝炎病毒非结构蛋白3(HCV NS3)表达质粒并在大肠杆菌中表达其全长蛋白。方法克隆HCV NS3的核酸序列3420-5312位点,插入pQE-11质粒的BamH1限制性酶切位点,将此重组质粒转入大肠杆菌表达,用Westernblot方法筛选阳性克隆,将含有额外拷贝的argU、ileY和leuW的tRNA基因的pACYA质粒引入HCV NS3表达系统以提高HCV NS3蛋白的表达量。收集培养扩增的大肠杆菌菌体,用卵白溶菌酶裂解,收集含有HCV NS3重组蛋白的不溶性包涵体,将包涵体充分洗涤后,溶于含10mmol/L二硫苏糖醇的缓冲液中。释放的可溶性蛋白用SDS-PAGE电泳分离、洗脱,用离心过滤方法浓缩,乙醇沉淀,重复洗涤去除内毒素。结果用此方法克隆的HCVNS3全长基因片段表达的重组蛋白分子量为69kD。含有额外拷贝的argU、ileY和leuW的tRNA基因的pACYA质粒引入HCV NS3表达系统后,HCV NS3蛋白的产出率可提高10倍以上。此方法生产的NS3纯化蛋白质产量,每升培养物为40mg。内毒素含量低于20EU/mg NS3蛋白。结论 HCV NS3与HCV的免疫逃逸及感染的慢性化有密切关系,是HCV的抗病毒治疗和疫苗研究的重要靶点,全长HCV NS3蛋白的体外合成为HCV研究提供了一个有用的工具。
- 金博李楠吴凯张林王艳梅翟俊山朱超慧宋久刚
- 关键词：肝炎病毒属病毒非结构蛋白质类重组蛋白质类
- 复方血竭灌肠与庆大霉素联合地塞米松灌肠对放射性直肠炎的疗效比较被引量：4
- 2014年
- [目的]比较复方血竭与庆大霉素联合地塞米松灌肠对放射性直肠炎的疗效。[方法]采用完全随机、三盲方法将187例放射性肠炎患者分为治疗组与对照组;治疗组99例采用复方血竭灌肠液灌肠,对照组88例采用庆大霉素联合地塞米松灌肠,疗程均为20d;观察2组治疗后临床疗效及内镜评价疗效。[结果]治疗组临床总有效率为88.7%,内镜评价总有效率为88.6%;对照组临床总有效率为75.9%;内镜评价总有效率为72.4%。2组在临床、内镜评价上均差异有统计学意义(P<0.05)。[结论]用复方血竭和庆大霉素联合地塞米松灌肠方法治疗放射性直肠炎均有良好疗效,但复方血竭优于庆大霉素联合地塞米松。
- 翟俊山李楠王雪明吴凯张林王艳梅张磊
- 关键词：放射性直肠炎复方血竭庆大霉素地塞米松
- PEBP1基因对胃癌细胞生物学特性影响的体外实验研究被引量：2
- 2009年
- 目的探讨PEBP1基因对于胃癌细胞增殖状态、细胞周期、凋亡状态等生物学特性及成瘤、浸润转移能力等恶性表型的影响。方法将PEBP1基因插入载体pcDNA3.1构建PC-PEBP1真核表达载体。脂质体转染胃癌细胞系MKN45建立稳定转染细胞系(MKN-PEBP1),而后使用生长曲线法、平板克隆形成实验法、流式细胞仪、细胞迁徙实验法等分析稳定表达株相关生物学特性变化。同时设立pcDNA3.1空载体转染组(MKN-PC)和空白MKN45细胞组(MKN45)为对照。结果与MKN-PC组和MKN45组相比,转染MKN-PEBP1载体的稳定表达细胞株生长显著减慢,MKN-PC组和MKN45组之间无显著差异,平板克隆形成实验结果显示,MKN-PEBP1转染组平均克隆形成率显著低于MKN-PC组和MKN45组(P<0.05),细胞周期检测显示MKN-PEBP1组处于G0/G1期的细胞比例显著高于未处理的MKN45组细胞和MKN-PC组细胞(P<0.05),而处于G2-M期的细胞比例显著均低于其他两组(P<0.05),其他各期细胞比例均无显著差异。流式细胞仪法检测细胞凋亡结果显示各组细胞的凋亡比例均为2.0%左右,统计学检验无显著差异(P>0.05)。细胞迁徙实验结果提示MKN-PEBP1组穿膜率与MKN-PC组和MKN45组相比显著降低(P<0.05)。结论PEBP1基因可能具有抑制细胞生长增殖及分裂作用,同时可影响细胞周期,但对细胞凋亡的影响作用较小。PEBP1基因可能对胃癌细胞侵袭转移能力有一定抑制作用。该基因对抑制细胞恶性表型有一定意义。
- 张林李楠吴凯王艳梅朱超慧翟俊山
- 关键词：胃癌细胞周期转染
- 食管乳头状瘤内镜下套扎的疗效观察被引量：2
- 2014年
- [目的]观察内镜下套扎治疗食管乳头状瘤的临床效果。[方法]分析31例食管乳头状瘤患者的临床及内镜特点，并行内镜下套扎治疗，术后口服抑酸药物治疗，定期复查电子胃镜。[结果]31例患者内镜下套扎治疗均成功；其中术后1例出现胸骨后疼痛，1例表现为轻度吞咽困难，治疗3～5d后症状缓解。[结论]内镜下套扎治疗是一种安全有效的治疗食管乳头状瘤的方法，值得临床推广应用。
- 朱建华徐家敏王艳梅李楠
- 关键词：食管乳头状瘤内镜下套扎
- 血清降钙素原和C-反应蛋白在评价溃疡性结肠炎病情中的临床价值被引量：16
- 2014年
- [目的]探讨血清降钙素原(PCT)和C-反应蛋白(CRP)在评价溃疡性结肠炎病情中的临床价值。[方法]检测120例溃疡性结肠炎患者(病例组)和30例健康体检者(正常对照组)外周血PCT和CRP水平。[结果]病例组缓解期、活动期患者PCT水平分别为(1.56±0.36)μg/L、(6.57±2.96)μg/L,均明显高于正常对照组[(0.33±0.16)μg/L],P<0.01;病例组缓解期、活动期CRP水平分别为(6.78±3.85)mg/L、(23.46±12.53)mg/L,均明显高于正常对照组[(0.68±0.23)mg/L],P<0.01;活动期患者PCT、CRP水平缓解期患者(P<0.01)。病例组轻度、中度、重度病情患者PCT水平分别为(3.64±1.78)、(5.67±2.75)、(8.96±1.86)μg/L,CRP水平分别为(8.75±3.64)、(22.78±6.57)、(31.45±11.34)mg/L;中度、重度病情患者的PCT、CRP水平均明显高于轻度者(P<0.01),重度病情患者PCT、CRP水平均明显高于中度者(P<0.01)。[结论]血清PCT和CRP水平可能成为评价溃疡性结肠炎病情活动及严重程度的辅助指标。
- 李楠苏丽张萌李娜王欣王艳梅翟俊山朱建华
- 关键词：结肠炎溃疡性降钙素原C-反应蛋白
- 降低胃癌细胞硫氧还蛋白5基因表达影响增殖及浸润的研究
- 2014年
- 目的探讨降低硫氧还蛋白5(EndoPDI)基因表达对于胃癌细胞增殖状态、细胞周期、凋亡等生物学特性及浸润转移能力的影响。方法 EndoPDI基因特异的核糖核酸干扰(RNAi)载体通过脂质体介导法转染人胃癌细胞系细胞(MKN45),筛选获得稳定转染的细胞系,经过免疫细胞化学、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法及蛋白免疫印记(Western-blot)法证实。使用生长曲线法、平板克隆形成实验、细胞迁徙实验等方法分析稳定转染株相关生物学特性的变化,每种检测实验均设立RNAi载体转染细胞组、点突变对照组和空白MKN45细胞组。结果稳定转染的EndoPDI RNAi细胞系经过免疫细胞化学法、RT-PCR法及Western blot法证实,表达抑制率可达70%左右。与对照组细胞相比,EndoPDI RNAi组细胞株生长减慢,各时间点细胞计数显著低于对照组(P<0.05);流式细胞仪检测细胞周期显示,S期比例显著低于对照组,G0-G1期比例显著高于对照组(P<0.05)。平板克隆形成实验结果显示,EndoPDI RNA i组克隆形成率显著低于对照组(P<0.05);细胞迁徙实验结果提示,EndoPDI RNA i组穿膜率显著低于对照组(P>0.05)。结论 EndoPDI基因可能具有促进细胞生长增殖作用,降低EndoPDI表达可减少处于分裂周期细胞比例、提高凋亡比例,降低EndoPDI基因表达可能对胃癌细胞的恶性生物学行为有抑制作用。
- 张林侯艳红李楠王艳梅张琨鹏
- 关键词：胃癌RNA干扰
- APPL1在胃癌组织中的表达及意义被引量：2
- 2015年
- 目的 探讨APPL1在胃癌组织中的表达及意义.方法 选取经手术切除的47例胃癌及23例正常胃组织,采用免疫组织化学SP法和逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）法检测APPL1在胃癌及正常胃组织中的表达情况.结果 APPL1基因的蛋白在胃癌组织中的表达为59.6％ （28/47）,正常胃组织标本组为26.1％ （6/23）;其mRNA在胃癌中相对表达为0.821±0.141,正常胃组织中相对表达为0.731±0.112,两者比较差异均有统计学意义（P＜0.05）.结论 APPL1蛋白和mR-NA在胃癌组织中表达上调,与胃癌的发生及转移有关.
- 翟俊山李楠宋久刚王艳梅朱超慧吴凯
- 胃癌组织中APPL1和COX-2的表达及其与患者预后的关系被引量：3
- 2016年
- 目的探讨胃癌组织中APPL1和COX-2蛋白表达情况、二者相关情况及其与患者生存期的关系。方法应用免疫组织化学SP法检测83例经手术切除石蜡包埋存档胃癌组织中APPL1和COX-2蛋白的表达情况。结果胃癌组织中APPL1和COX-2表达阳性率分别为60.2%(50/83)、62.7%(52/83)。APPL1的表达与胃癌的浸润深度、淋巴结转移、TNM分期、组织学类型差异有统计学意义(P<0.05);COX-2的表达与胃癌的浸润深度、淋巴结转移、TNM分期差异有统计学意义(P<0.05),而与组织学类型差异无统计学意义(P>0.05)。它们与肿瘤患者年龄、性别差异均无统计学意义(P>0.05)。相关分析结果显示APPL1与COX-2表达呈正相关(P<0.05)。生存曲线研究结果显示APPL1和COX-2表达与患者术后生存时间显著相关(P<0.05)。结论 APPL1和COX-2表达程度与胃癌的浸润深度、淋巴结转移、TNM分期密切相关,影响患者的生存时间。
- 翟俊山李楠宋久刚王艳梅朱超慧吴凯
- 关键词：COX-2胃癌预后免疫组化
- 溃疡性结肠炎相关癌的回顾性探讨被引量：13
- 2014年
- 目的通过对565例溃疡性结肠炎患者进行癌变风险分析,为溃疡性结肠炎相关癌(UC-CRC)的早期筛查及预防提供依据。方法对收治的565例溃疡性结肠炎患者进行分组,其中15例UC-CRC组患者,随机抽取28例溃疡性结肠炎组患者,对两组临床相关资料进行回顾性分析。结果在565例溃疡性结肠炎患者中,UC-CRC组患者有15例,总体风险为3.77%。两组患者在年龄、病变内镜活检、疾病病程、血清CRP水平等方面差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。高危风险因素显示:疾病病程、病变范围、血清CRP水平、病理诊断为UC-CRC的高危因素。结论溃疡性结肠炎患者中有较高的UC-CRC癌变风险,溃疡性结肠炎的疾病病程、血清CRP水平、内镜活检为不典型增生及程度与UC-CRC的发生呈正相关。
- 沙立娜李楠王艳梅张林朱超慧吴智明辛丽敏苏丽
- 关键词：溃疡性结肠炎血清C反应蛋白
- 远端型溃疡性结肠炎临床特点及复方血竭灌肠疗效分析被引量：4
- 2012年
- 目的探讨远端型溃疡性结肠炎(DUC)的临床特点,评估复方血竭灌肠治疗效果。方法通过对比远端型溃疡性结肠炎、全结肠型溃疡性结肠炎及克罗恩病(CD)的临床、内镜及病理表现分析远端型溃疡性结肠炎的临床特点。128例远端型溃疡性结肠炎患者随机分为两组,在口服美沙拉嗪基础上,试验组采用复方血竭制剂灌肠治疗,对照组采用0.9%氯化钠注射液灌肠治疗探讨治疗效果。结果远端型溃疡性结肠炎主要以腹泻、里急后重、黏液血便为临床表现,病理主要表现为隐窝脓肿,与全结肠型溃疡性结肠炎比较无统计学差异(P>0.05),与克罗恩病有统计学差异(P<0.05)。治疗5周后试验组临床总有效率、镜下病变改善总有效率均显著高于对照组(P<0.05);腹痛、腹泻、里急后重症状改善与对照组无统计学差异(P>0.05),在改善黏液血便方面作用显著(P<0.05)。试验组不良反应明显低于对照组(P<0.05)。结论远端型溃疡性结肠炎临床表现具有一定的特征性,复方血竭制剂灌肠治疗安全有效。
- 张月凡李楠张林翟俊山吴凯王艳梅
- 关键词：结肠炎溃疡性
