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郭飞飞
作品数:
1
被引量:4
H指数:1
供职机构:
中国农业大学植物保护学院
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相关领域:
农业科学
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合作作者
刘梅
北京市农林科学院植物保护环境保...
李兴红
北京市农林科学院植物保护环境保...
黄金宝
北京市农林科学院植物保护环境保...
张玮
北京市农林科学院植物保护环境保...
燕继晔
北京市农林科学院植物保护环境保...
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中国农业大学
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作者
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燕继晔
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黄金宝
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李兴红
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刘梅
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郭飞飞
传媒
1篇
植物保护学报
年份
1篇
2017
共
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两种葡萄溃疡病菌双重PCR检测方法的建立与应用
被引量:4
2017年
为快速准确地鉴定出2种不同的葡萄溃疡病菌——葡萄座腔菌Botryosphaeria dothidea和小新壳梭孢Neofusicoccum parvum,根据Gen Bank中已报道的引起我国葡萄溃疡病的6个主要种的延伸因子-1序列及β-微管蛋白序列分别设计了葡萄座腔菌和小新壳梭孢的特异性引物B.d-F/B.d-R及N.p-F/N.p-R,建立了双重PCR检测方法,并对田间病样进行检测。结果表明,引物B.d-F/B.d-R和N.p-F/N.p-R可以分别在葡萄座腔菌和小新壳梭孢中扩增到324 bp和212 bp的特异性条带,检测灵敏度均为10 pg。双重PCR检测体系中Taq DNA聚合酶的最佳用量为0.05 U/μL,引物B.d-F/B.d-R和N.p-F/N.p-R的最佳终浓度均为0.2μmol/L,最适退火温度和退火时间分别为58℃和30 s。对田间葡萄病样的检测结果与室内病样常规病原菌分离结果一致。表明该双重PCR检测方法能够同时检测葡萄座腔菌和小新壳梭孢,有助于快速、灵敏地检测葡萄苗木的带菌情况。
张玮
李兴红
郭飞飞
刘梅
黄金宝
燕继晔
关键词:
葡萄
葡萄座腔菌
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