罗清
- 作品数：11 被引量：5H指数：1
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- 高表达NAIF1对胃癌细胞系MKN45蛋白表达的影响
- 目的 NAIF1基因位于人第九号染色体。本实验室前期结果显示,在胃癌细胞系MNK45中高表达NAIF1基因会对该细胞系的凋亡过程和细胞运动能力产生明显影响。具体表现为高表达NAIF1基因能够诱导胃癌细胞系MKN45凋亡,...
- 杨梅赵玫罗清钟佳伶王佳谷愉愉黄常志
- 文献传递
- 利用pTet-Off系统研究NAIF1对食管癌细胞系EC9706生物学行为的影响
- 2011年
- 目的:利用pTet-off可诱导表达系统将NAIF1重组质粒导入食管癌EC9706中进行生物学行为影响研究。方法:构建pTRE2-NAIF1质粒,与PTK-Hyg质粒共转染入可诱导表达细胞系TF93(由EC9706构建而得),经筛选并鉴定获得稳定可诱导表达克隆。以此克隆采用MTT法检测细胞增殖、流式细胞术(FCM)检测细胞周期、Transwell小室法检测细胞迁移和检测细胞黏附能力的改变。结果:经筛选并鉴定获得了稳定的可诱导表达TF93-pTRE2-NAIF1克隆。NAIF1在体外可以抑制EC9706细胞增殖、导致G0/G1期细胞阻滞、抑制其迁移和黏附能力。结论:NAIF1能抑制食管癌细胞系EC9706的恶性生物学行为,为食管癌的基因治疗提供了可能的新靶点。
- 罗清钟佳玲赵玫马怡茗刘健王佳黄常志
- 关键词：食管癌EC9706
- PIP5KL1在肿瘤恶性行为中作用的初步研究
- 本研究通过构建PIP5KLI基因重组质粒，将其转染人宫颈癌hela细胞，研究了PIP5KLI基因对肿瘤恶性行为的影响。
- 时岚罗清赵玫余权戴亚云马怡茗袁兴华黄常志
- 关键词：宫颈癌HELA细胞基因重组质粒
- 文献传递
- 过表达FLJ22349促进人胚胎肾细胞HEK293及乳腺癌细胞MCF-7的生长
- 2008年
- 目的:人假想蛋白FLJ22349基因位于染色体22q13.2上,编码一个229个氨基酸的蛋白。表达谱分析发现多种肿瘤组织中有FLJ22349的表达,预测该基因可能与肿瘤的发生发展有密切关系。本研究旨在用生物信息学方法分析FLJ22349的结构和功能,并初步研究FLJ22349在HEK293及乳腺癌细胞中的作用。方法:运用各种生物信息学数据库初步分析FLJ22349的结构和功能。逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法分析FLJ22349基因在小鼠正常组织,人癌症细胞株及HEK293中的表达情况。将载有FLJ22349的基因的质粒转染入HEK293,MCF-7,MDA-MB231中,观察该基因的亚细胞定位。MTT检测细胞的生长变化。结果:FLJ22349基因在人类、猩猩、恒河猴、褐家鼠、小鼠和狗中有很高的同源性,但与其它已知的基因无同源性。小鼠正常组织中有FLJ22349表达;乳腺癌细胞株MDA-MB231,肝癌细胞株Bel-7402也有表达;主要定位于细胞核;转染FLJ22349的HEK293,MCF-7细胞株生长曲线显示促进细胞生长(P<0.05)。FLJ22349转染120h后,MTT实验观察到HEK293,MCF-7细胞的增殖率分别为299%,456%;而对照组分别为233%,272%。结论:FLJ22349基因过表达促进HEK293和MCF-7细胞的生长。
- 戴亚云赵玫余权方明镜时岚罗清袁兴华黄常志
- 关键词：HEK293细胞生长
- 抗PIP5KL1多克隆抗体的制备及鉴定被引量：1
- 2009年
- 目的:构建人4-磷酸-磷脂酰肌醇-5-激酶(phos-phatidylinositol-4-phosphate5-kinases-like1,PIP5KL1)质粒并在大肠杆菌中表达,纯化得到相对分子质量(Mr)为42000的融合蛋白,免疫新西兰大白兔制备兔抗PIP5KL1多克隆抗体。方法:采用PCR的方法获得编码人PIP5KL1的cDNA序列,将其克隆入pET-32a,构建pET32a-PIP5KL1表达载体。在大肠杆菌BL21(DE3)中IPTG诱导下表达6×His-融合蛋白,纯化后免疫新西兰兔,制备兔抗人PIP5KL1血清,以Westernblot和ELISA方法分析其特异性和效价。结果:PIP5KL1融合蛋白免疫新西兰兔成功获得多克隆抗体,West-ernblot结果显示制备的抗体具有较高的特异性,ELISA显示效价为1∶100000。结论:获得了纯化的PIP5KL1融合蛋白和anti-PIP5KL1多抗血清,为今后对新基因PIP5KL1功能研究打下了基础。
- 时岚赵玫时茜方明镜罗清戴亚云黄常志
- 关键词：抗体制备
- UCHL1在结肠癌中的生物学功能研究
- 目的 UCHL1（ubiquitin carboxyl-termial hydrolases L1）泛素羧基端水解酶L1,属于泛素羧基端水解酶家族,是一种半胱氨酸蛋白酶,与神经退行性疾病有着密切的关系。我们前期研究发现,...
- 钟佳伶赵玫马怡茗罗清刘健王佳黄常志
- 文献传递
- 人核诱导凋亡因子1(NAIF1)基因在胃癌及乳腺癌中的差异表达及功能研究
- 核诱导凋亡因子1(nuclear apoptosis—inducing factor1,NAIF1)是一个新发现的核诱导凋亡蛋白,之前的研究表明其在宫颈癌细胞系HeLa丑人胚肾细胞系HEK293中过表达时能诱导凋亡,但具...
- 罗清
- 关键词：胃癌乳腺癌细胞凋亡
- CCDC134在胃癌组织中低表达且其基因沉默促进GES-1细胞迁移
- 为研究CCDC134 (Coiled-coil domain containing 134)在胃癌中的功能,本实验室应用免疫组化方法检测了CCDC134在38例胃正常组织及77例胃癌组织中的表达水平.同时我们合成了针对C...
- 钟佳伶赵玫罗清马怡茗刘健王佳黄常志
- 关键词：胃癌免疫组化迁移
- 组织蛋白酶D对大肠癌侵袭与转移的影响
- 目的通过二维凝胶电泳筛选T3、T4期大肠癌,淋巴结转移组与非转移组差异表达蛋白,经过质谱鉴定出33个差异表达蛋白,组织蛋白酶D是其中差异比较明显的蛋白之一。本研究的目的在于探讨组织蛋白酶D对大肠癌侵袭与转移的影响。方法采...
- 王佳赵玫钟佳玲杨梅罗清黄常志
- 文献传递
- 结肠癌蛋白质双向电泳技术的建立
- 2010年
- 目的:建立结肠癌13cm和24cm非线性分离系统的2-D图谱,分析比较两者的分辨率。方法:提取结肠癌总蛋白,用pH3-10非线性干胶条对样品进行等电聚焦分离,并分别使用13cm和24cm电泳系统进行双向电泳,考马斯亮蓝G250染色,图像分析,比较对比两组2-D图谱,量化分析两种系统的分辨率差异。结果:在等点电3-10,分子量20-170kD范围内分别分离得到蛋白质斑点873个(13cm电泳系统)和1349个(24cm电泳系统)。对于24cm电泳系统,1mg蛋白质上样量的电泳图谱清晰,分辨率较好。结论:成功建立了高分辨率、简便易控的结肠癌蛋白质组双向电泳技术平台。
- 马怡茗赵玫时岚罗清钟佳伶刘健王佳黄常志
- 关键词：蛋白质组学双向电泳结肠癌
