张鹏
- 作品数：15 被引量：7H指数：2
- 供职机构：吉林大学畜牧兽医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 乳铁蛋白基因启动子元件调控效应分析被引量：1
- 2012年
- 本试验先后进行2轮载体构建及转染试验,对牛乳铁蛋白基因启动子元件调控效应进行了分析。首先进行第1轮载体构建及转染试验:采用PCR方法,利用4对引物从牛乳铁蛋白基因5′调控区-1 799向3′端依次缺失500bp进行调控序列扩增,将获得的扩增片段替换pEGFP-N1的CMV启动子,构建了4个重组载体,将重组载体转染牛乳腺上皮细胞(BMEC),经筛选获得稳定的单克隆细胞,测定并比较各组细胞的荧光强度。在以上试验基础上,为进一步精确确定牛乳铁蛋白基因启动子顺式调控元件序列,进行第2轮载体构建及转染试验,方法同第1轮。结果表明,牛乳铁蛋白基因上游调控序列-1 323～-1 372存在负调控元件,-1 372～-1 560存在正调控元件。
- 金晶许无恨李明谦张鹏马强房希碧官员张英于浩郝琳琳刘松财
- 关键词：乳铁蛋白稳定转染调控元件
- 温敏型缓释剂的合成及其对GHRP-6在小鼠体内缓释性能的研究
- 2012年
- 近年来温敏型缓释材料以其独特的温度敏感性受到国内外的关注国。这种缓释材料针对一些每天都需注射或一天需多次注射的多肽和蛋白类药物显示出其独特的优势,大大降低了病人的经济成本,同时也减少了持续给药的痛苦,具有广阔的应用前景。本实验采用开环聚合法自行合成PLGA-PEG-PLGA,在温度低于体温时。
- 官员房希碧马强李明谦张鹏郝林琳刘松财
- 关键词：温敏型缓释材料蛋白类药物缓释性能缓释剂生长激素释放肽
- 猪干扰素α1与胸腺肽α1融合蛋白原核表达系统的建立被引量：2
- 2012年
- 依据GenBank已发表的猪干扰素α1（poIFN-α1）成熟肽基因序列,胸腺肽α1（THY-α1）蛋白序列及Escherichia coliB密码子使用频率表,优化并人工合成poIFN-α1和THY-α1基因,利用SOE-PCR法在poIFN-α1和THY-α1之间设计1个13肽Linker。将融合基因克隆至pRSFDue-t 1表达载体,转化BL21（DE3）感受态,37℃培养至菌液OD600为0.6~0.8,IPTG（0.5 mmol/L）诱导,20℃培养12h,SDS-PAGE和Western blot鉴定。结果表明：目的蛋白为菌体内可溶性表达,经强阴离子交换层析和疏水层析纯化获得高纯度poIFNα1-THYα1融合蛋白。
- 张鹏李明谦郝林琳马强张英刘松财
- 关键词：胸腺肽Α1融合蛋白
- ICR小鼠胰岛内nestin阳性细胞的分离培养及特性鉴定
- 2013年
- 通过向ICR小鼠胆总管注射胶原酶Ⅴ的方法体外分离胰岛,并从中分离培养出nestin+细胞,之后通过低糖、低血清诱导其分化产生类胰岛样细胞团。结果显示,小鼠胰岛内存在nestin+细胞,将其分离纯化后在体外低糖(2.5mmol/L)和低血清(2%)条件下可诱导分化为胰岛样细胞团;表明nestin+细胞具有胰腺干/祖细胞的特性。
- 张胜张鹏张学明冯怀亮李子义
- 关键词：ICR小鼠祖细胞胰岛胰岛样细胞团
- 不同激活方法对小鼠卵母细胞孤雌发育及二倍体形成的影响
- 2011年
- 卵母细胞的孤雌激活是研究哺乳动物受精机制和发育机理的有效方法,也是细胞核移植、显微注射受精技术、孤雌胚胎干细胞等研究内容中的重要环节。本试验分别用乙醇、SrCl2、钙离子载体A23187对小鼠卵母细胞进行单独孤雌激活,并分别与6-DMAP联合运用,对小鼠卵母细胞进行联合孤雌激活。结果显示:(1)不同激活剂单独或联合激活,对卵母细胞的激活率有显著影响(P<0.05),SrCl2组的激活率最高(92%～94%);(2)相同激活剂对卵母细胞孤雌囊胚的发育率在单独激活组(SrCl2组,18%)和联合激活组(SrCl2+6-DMA组,53%)中存在显著差异(P<0.05);(3)相同激活剂对卵母细胞二倍体率在单独激活组(钙离子载体A23187组,21%)和联合激活组(钙离子载体A23187+6-DMA组,77%)中均存在显著差异(P<0.05)。结果表明:(1)SrCl2可以对小鼠卵母细胞进行有效的孤雌激活;(2)联合激活法可以显著提高孤雌卵母细胞的囊胚发育率;3、6-DMAP可以抑制第二极体排出,显著提高孤雌激活卵母细胞的二倍体率。
- 赵天闯张鹏陈玥高飞唐博李子义
- 关键词：孤雌激活二倍体小鼠
- 非亚硫酸氢盐处理的基因组甲基化分析方法
- 基因启动子区域CpG岛甲基化往往会引起细胞内基因表达的沉默,而CpG岛的去甲基化与基因表达的激活有关。目前检测基因启动区域甲基化和度主要使用亚硫酸氢盐处理的方法,但是亚硫酸氢盐处理往往会造成基因组的大量降解。LINE元件...
- 张鹏王中伟张胜马馨关继羽唐博李子义
- 关键词：甲基化BSP表观遗传
- 文献传递
- 非亚硫酸氢盐处理的基因组甲基化分析方法
- 张鹏王中伟张胜马馨关继羽唐博李子义
- 关键词：甲基化BSP表观遗传
- 红松松子壳多糖对HepG2细胞增殖的影响
- 2012年
- 红松松子壳中的酸性多糖具有抗病毒,提高机体免疫力等功效,是红松松子壳的主要活性成分。本实验旨在探讨红松松子壳多糖(Pinus koraiensis Pinon Shell Polysaccharides,PPSP)在体外对人肝癌细胞HepG2增殖的影响。
- 李明谦张鹏官员房希碧马强郝林琳刘松财
- 关键词：壳多糖人肝癌细胞细胞增殖酸性多糖抑制率离子交换层析
- 牛孤雌激活囊胚冷冻复苏后胚胎存活率和胚胎质量
- 2010年
- 使用2种不同的冷冻载体冷冻保存牛孤雌囊胚,并且使用差异染色的方法计数囊胚细胞数。结果显示,开放式毛细玻璃管(GMP)和冻精管(Straws)冷冻牛孤雌囊胚复苏后囊胚孵出率存在显著性差异(GMP法为70.29%,冻精管法为27.31%,P<0.05)。差异染色结果显示,牛囊胚冷冻复苏后囊胚细胞数目为91.37,而对照组(正常孤雌囊胚)囊胚细胞数目为93.70,两者差异不显著(P>0.05),并且前者内细胞团数(ICM)与滋养层细胞数(TE)比例为0.23,而后者为0.24,差异不显著(P>0.05)。结果表明,GMP法更适合冷冻保存牛孤雌囊胚,并且其冷冻复苏后囊胚的孵出率达到70.29%。同时使用GMP冷冻囊胚对囊胚细胞的损伤较小。
- 张鹏王中伟马馨高飞唐博张嘉保李子义
- 关键词：孤雌激活囊胚玻璃化冷冻
- 5-甲基胞嘧啶到5-羟甲基胞嘧啶的转变过程参与小鼠雄原核的DNA主动去甲基化被引量：2
- 2012年
- 利用5-甲基胞嘧啶(5-methylcytosine,5mC)和5-羟甲基胞嘧啶(5-hydroxymethylcytosine,5-hmC)特异性抗体对小鼠原核时期胚胎进行免疫荧光染色。同时使用荧光定量PCR方法检测Tet(Ten eleven translocation)基因在小鼠早期胚胎中的表达。免疫荧光染色结果显示早期原核阶段(PN1到PN3),雄原核中5mC的含量逐渐减少,而5hmC的含量逐渐增加。但是雌原核中5mC和5hmC的含量基本不变。在原核后期阶段(PN4到PN5)5hmC主要存在于雄原核中。荧光定量结果显示在小鼠MⅡ卵母细胞和植入前胚胎中Tet1和Tet2基因表达量较低,但是Tet3在卵母细胞和原核时期表达量较高,随着胚胎的发育其表达量逐渐降低。结果表明,在小鼠原核时期阶段5mC到5hmC的转变过程主要是由TET3蛋白催化的,并且此过程参与小鼠雄原核的DNA主动去甲基化。
- 张鹏王中伟张胜唐博周好乐李子义
- 关键词：TET小鼠
