刘勇
- 作品数：19 被引量：73H指数：5
- 供职机构：西安交通大学医学院神经科学研究中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省自然科学基金西安市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 新生大鼠神经干细胞的分离培养与观察
- ＜正＞ 近年来,神经科学研究的热点“神经干细胞”为神经系统的众多疾病带来了勃勃生机。本研究的目的是建立神经干细胞的分离、培养及分化鉴定技术。通过分离新生SD大鼠脑室下区的组织,经消化及机械吹打后,采用原代贴壁及传代悬浮的...
- 李敏杰刘勇吕海侠张蓬勃肖新莉李捷康前雁邓美英丁海燕
- 文献传递
- 脑缺血后的神经和血管发生被引量：4
- 2003年
- 成年脑内存在神经干细胞(NSC),脑缺血后室管膜、室下区和海马齿状回的NSC因微环境改变而被激活,并参与机体的损伤修复反应。同时,作为对缺血的另一种代偿反应,半暗带内的骨髓源性内皮细胞、脑血管内皮细胞增殖迁移,巨噬细胞浸润增加,并使新生血管形成。两个过程密切相关,共同完成缺血后的脑组织修复。
- 张蓬勃李捷刘勇
- 关键词：血管发生神经发生CNS血管内皮细胞
- 大鼠脑发育过程中神经干细胞分布的免疫组织化学研究被引量：14
- 2002年
- 目的 观察神经干细胞在大鼠不同发育时期不同脑区的分布。方法 应用免疫组织化学ABC法 ,对不同发育时期大鼠脑的嗅球、室管膜、室管膜下区、顶叶皮质、纹状体、海马齿状回进行nestin免疫组织化学染色及光镜观察。结果 nestin从胚胎 1 8d至出生后 7d在脑内表达较强 ,阳性细胞在所观察的部位较多 ,出生后 1月nestin阳性细胞数急剧下降 ,成年鼠和老年鼠仅在嗅球、室管膜、部分室管膜下区及海马齿状回分布有nestin阳性细胞。结论 嗅球、室管膜、室管膜下区及海马齿状回终生具有神经干细胞存在 。
- 肖新莉刘勇徐曦丁海燕
- 关键词：发育过程免疫组织化学神经巢蛋白
- 人视网膜祖细胞和脑神经干细胞的体外培养和诱导分化研究被引量：3
- 2006年
- 目的比较人视网膜祖细胞和脑神经干细胞的体外分化潜能。方法分离8～12周人胎儿神经视网膜和脑皮质、纹状体神经干细胞,进行无血清体外培养;采用光镜和免疫细胞化学或荧光免疫细胞化学染色方法,分别观察在无血清和10%胎牛血清培养条件下,两种来源的神经干细胞分化后的细胞特性。结果两种来源的神经干细胞,均能在体外有或无血清培养条件下增殖并分化。视网膜祖细胞不但表达视网膜祖细胞标志物 Pax-6,也可表达神经干细胞标志物-巢蛋白(Nestin)、成熟神经元标志物-微管相关蛋白2(Map2)、星形胶质细胞标志物-胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、节细胞标志物 Thy-1和视杆细胞标志物视紫红质(Rhodopsin);脑神经干细胞也能表达这些特异性细胞标志物。血清诱导分化时,视网膜祖细胞较难贴壁,贴壁细胞球伸出少而短的突起,单个细胞形态不清;而脑神经干细胞球易贴壁并伸出较长突起交织成网,大量细胞从细胞球中沿突起徙出,单个细胞形态清晰。结论人胎儿视网膜祖细胞和脑神经干细胞体外培养均具有向神经元、胶质细胞及视网膜终末细胞分化的能力;两种干细胞在进行血清诱导分化时,细胞的贴壁、迁移能力及分化后的细胞形态均存在差异。(中华眼科杂志,2006,42:901-907)
- 康前雁刘勇陈新林赵建军张蓬勃李捷罗禹钱亦华西安交通大学医学院人体解剖与组织胚胎学系宋土生
- 关键词：视网膜干细胞细胞分化细胞
- 激光捕获显微切割技术及其在脑研究中的应用被引量：4
- 2005年
- 激光捕获显微切割(lasercapturemicrodissection,LCM),是一项利用激光在显微镜下从组织切片中分离单一类型细胞群的技术。以LCM技术为基础,结合蛋白质、核酸等分子生物学研究方法进行基因诊断、表达谱或蛋白质组学的研究,从根本上解决了细胞异质性问题。本文就LCM技术在脑科学中的应用及所涉及到的脑组织固定、切片、染色、捕获等关键环节做一综述。
- 田英芳刘勇张蓬勃
- 关键词：激光捕获显微切割技术LCM组织切片解剖学
- 波形蛋白阳性细胞在人胚脑中的分布
- 2002年
- 吕海侠刘勇李敏杰肖新莉丁海燕
- 对大鼠局灶性脑缺血后神经功能障碍判断方法的改进被引量：6
- 2003年
- 目的 :对大鼠大脑中动脉阻塞术后苏醒时间与脑缺血病理损伤的关系进行研究 ,寻找更为准确地判定大脑中动脉阻塞后脑缺血损伤发生与否的方法 .方法 :线栓法制备大鼠局灶性脑缺血模型 ,记录大鼠苏醒时间 ,缺血后 2h进行神经功能缺失的评分 ,2 4h后行TTC染色鉴定脑梗死与否 ,选择具有脑梗死的大鼠进行分析 .结果 :与对照组相比 ,脑梗死大鼠的苏醒时间明显延长 (min ,1 0 8.7± 1 8.6vs 75 .3± 2 0 .7,P <0 .0 5 ) ;神经功能缺失判断脑缺血损伤的灵敏度为6 2 .5 % ,结合苏醒时间后判断脑缺血损伤的灵敏度为 87.5 % .结论
- 李捷张蓬勃刘勇
- 关键词：局灶性脑缺血苏醒时间神经功能障碍
- 神经干细胞的分离培养与鉴定被引量：7
- 2002年
- 目的 分离培养新生鼠神经干细胞并获得细胞克隆 ,同时建立良好的传代方法。方法 取新生大鼠大脑室管膜、脑室周围及海马细胞 ,经消化及机械吹打后接种于加有N2添加剂及生长因子的DMEM/F12 培养基 ,悬浮培养 ;用含血清而不含生长因子的培养基贴壁培养 ,促使分化 ;最后用免疫细胞化学方法进行染色鉴定。结果 分离培养的细胞多聚集生长 ,并形成细胞克隆 ,可以传代 ;细胞为圆形或椭圆形 ,经鉴定为nestin抗原阳性 ;分化后细胞分别表达神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞特异性抗原。结论 分离培养的细胞具有自我更新和多向分化能力 ,表达神经干细胞的特异性抗原nestin ,是神经系统的干细胞。
- 吕海侠刘勇李敏杰丁海燕
- 关键词：神经干细胞
- 川芎嗪对大鼠局部脑缺血后空间学习和记忆的影响被引量：11
- 2006年
- 目的探讨川芎嗪对大鼠局部脑缺血后空间学习记忆能力障碍的作用。方法线栓法制作大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)模型,术后2周内腹腔注射川芎嗪,第15天开始采用Morris水迷宫装置评价大鼠的空间学习记忆能力,脑切片尼氏染色观察皮质和海马的神经元数量变化。结果脑缺血对照组大鼠在定向航行试验和空间探索试验中均表现出明显的空间认知功能的障碍,川芎嗪治疗组大鼠平均逃避潜伏期与缺血对照组比较明显缩短(P<0.01)。在空间探索试验中,川芎嗪治疗组大鼠原平台象限停留时间百分比以及穿过原平台位置次数均大于脑缺血对照组(P<0.01)。在形态学观察中,川芎嗪治疗组大鼠缺血侧顶叶皮质神经元数量明显多于脑缺血对照组(P<0.01),各组动物海马神经元数量上无统计学差异。结论川芎嗪可以明显改善大鼠永久性局部脑缺血后空间学习记忆能力,其机制可能与川芎嗪对神经元的保护作用有关。
- 赵建军刘勇陈新林刘建新田英芳邱芬张蓬勃康前雁
- 关键词：学习记忆MORRIS水迷宫脑缺血
- 早期人胚神经干细胞分布及分离培养被引量：5
- 2003年
- 目的 研究发育早期人胚脑神经干细胞的形态特征及其分布情况 ,并观察其体外生长分化特性。方法 计划生育流产的 6～ 12周胚胎大脑组织切片用vimentin抗体进行免疫组织化学染色 ,光镜观察。机械分离皮质细胞 ,用无血清培养基和含血清培养基进行悬浮和贴壁培养 ,分别用MAP2 、GFAP及GalC抗体进行免疫细胞化学染色 ,鉴定干细胞和神经元、星形胶质细胞及少突胶质细胞。结果 发育早期大脑Vimentin阳性细胞分布广泛 ,细胞形态单一 ,多呈圆球形 ,体积较小。体外培养的大脑皮质细胞在培养的第 5～ 7天时 ,形成较多克隆 ,可多次传代 ;贴壁培养时细胞发生分化 ,分别为MAP2 、GFAP、GalC阳性的神经元、星形胶质细胞及少突胶质细胞。结论 胚胎发育早期大脑神经干细胞分布广泛 ,形态单一 ,皮质Vimentin阳性细胞数量多 ,便于分离 ,是最佳神经干细胞分离部位 ;
- 吕海侠翟伟刘勇李敏杰刘朝晖王桂贤
- 关键词：体外生长免疫细胞化学星形胶质细胞人胚胎
