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外源性p16基因导入对人原发性肝癌细胞迁移能力和VEGF及nm23表达的影响: 2006年; 目的探讨外源性p16基因导入对人原发性肝癌细胞迁移能力和VEGF及nm23表达的影响。方法细胞划痕法检测外源性p16基因导入对人肝癌细胞SMMC-7721迁移能力的影响;免疫细胞化学法分析外源性p16基因导入对VEGF表达的影响;Western blotting法分析外源性p16基因导入对nm23表达的影响。结果外源性p16基因导入人肝癌细胞SMMC-7721后,转染组细胞迁移能力较空载体对照组和空白对照组SMMC-7721细胞明显下降。外源性p16基因导入人肝癌细胞SMMC-7721后,转染组VEGF表达较空载体对照组和空白对照组SMMC-7721细胞减弱。外源性p16基因导入人肝癌细胞SMMC-7721后,转染组nm23表达较空载体对照组和空白对照组SMMC-7721细胞增强。结论外源性p16基因导入能降低人肝癌细胞SMMC-7721的侵袭和迁移能力。; 石丽娟朱建思王成昆周建国董琳雷战平; 关键词：P16 肝肿瘤 VEGF NM23

外源性p16基因导入对人肝癌细胞侵袭相关蛋白表达和迁移能力的影响: 目的:探讨外源性p16基因导入对人原发性肝癌SMMC-7721细胞侵袭相关蛋白VEGF、nm23、MMP-9及TIMP-1表达和其迁移能力的影响。　　方法:细胞划痕和Transwell法检测外源性p16基因导入对人肝癌细...; 石丽娟; 关键词：肝肿瘤 P16基因 SMMC-7721细胞; 文献传递

稳定表达外源性p16基因肝癌SMMC-7721细胞株的建立及鉴定被引量：3: 2005年; 目的　构建稳定表达外源性p1 6基因的肝癌SMMC - 772 1细胞株。方法　利用脂质体介导的基因转染方法,借助真核质粒表达载体pcDNA3.1 ( + ) ,将外源性p1 6基因转染入此基因表达下调的人肝癌细胞株SMMC - 772 1细胞中,经G41 8筛选,建立稳定表达的细胞株,用逆转录聚合酶链反应(RT -PCR)及免疫组织化学法鉴定p1 6基因的表达,同时对细胞株分泌蛋白进行活性检测。结果　转染p1 6基因的SMMC - 772 1细胞中可以检测到p1 6mRNA及蛋白的表达。结论　建立稳定表达P1 6抑癌蛋白的SMMC - 772 1细胞株有助于研究p1 6抑癌基因在肝癌发生中的作用。; 罗春华朱建思; 关键词：P16抑癌基因基因转染肝肿瘤

外源性p16基因对肾癌细胞周期及体外增殖的影响: 2005年; 目的　观察外源性 p16基因对肾癌细胞周期的影响及其对肾癌细胞的生长抑制作用。方法　利用携带人 p16基因的真核表达载体,采用脂质体介导法将其导入人肾癌细胞系 GRC- 1 中,观察其对瘤细胞的作用。结果　①免疫组织化学方法检测显示转染 p16基因的GRC 1细胞可显著表达 p16蛋白。②流式细胞仪检测证明,外源性 p16 基因可在肾癌细胞周期G1期到S期发挥抑制作用。③与对照组相比,转染 p16 基因的 GRC- 1 细胞生长明显受到抑制。结论　外源性 p16基因具有细胞周期特异性地抑制肾癌细胞生长的作用。; 种铁王子明常建同张鹏张勇杜岳峰蒋思雄; 关键词：肾肿瘤 P16基因转染

外源性p16基因对人肝癌细胞生物学行为的影响及其机制: 目的:构建人p16cDNA重组真核表达载体。探讨转入外源性p16cDNA对人原发性肝癌SMMC-7721细胞生物学行为的影响及其抑制细胞生长的机制。方法:从pBS-p16克隆载体中,将人p1...; 罗春华; 关键词：G1期阻滞 CYELIND1 PRB; 文献传递

外源性p16基因对人原发性肝癌细胞生物学行为的影响及其机制被引量：1: 2005年; 目的:探讨导入外源性p16cDNA真核表达载体对人原发性肝癌细胞系SMMC- 772 1生物学行为的影响及其分子机制。方法:构建外源性p16基因真核表达载体并转染SMMC- 772 1细胞,经G4 18抗性筛选和扩增,得到稳定的表达株,并经RT -PCR及免疫细胞化学鉴定。通过生长曲线,流式细胞术,免疫细胞化学及Western -Blot等实验方法,对转基因后肿瘤细胞生物学行为及细胞周期调控因子CDK4 ,CyclinD1及pRb进行观察。结果:转染外源性p16基因的SMMC- 772 1细胞有外源性p16基因的整合及表达,细胞生长速度明显减慢,倍增时间明显延长,G1期细胞明显多于转基因前(P <0 .0 5 ) ;免疫细胞化学显示外源性p16表达可下调CDK4及cylinD1的表达(P <0 .0 5 ) ,Western -Blot提示转染外源性p16基因后细胞中磷酸化pRb表达明显降低。结论:外源性p16基因导入人肝癌细胞株SMMC -772 1中可稳定表达并使细胞停滞在G1期,抑制细胞生长,其机制可能为下调CDK4、cyclinD1的表达和抑制pRb磷酸化有关。; 罗春华朱建思苏影周建国董琳; 关键词：G1期阻滞 CYCLIND1 CDK4 PRB

外源性p16基因对人原发性肝癌细胞生物学行为的影响及其机制: 本文研究了外源性p16基因对人原发性肝癌细胞生物学行为的影响及其机制。文章采用基因转染技术,将全长的野生型p16cDNA转染入SMMC-7721细胞中,分析了外源性p16表达对细胞周期调节网子CDK4,CyclinD1及...; 周建国罗春华朱建思曹建国; 关键词：原发性肝癌细胞生物学基因表达; 文献传递

外源性p16基因与放疗联合治疗喉鳞癌的实验研究被引量：8: 2004年; 目的　探讨外源性 p16基因对人喉鳞状细胞癌的抑制作用及与放射治疗联合应用的协同增敏作用。方法　应用携带 p16基因的复制缺陷型腺病毒 (Ad- p16 )转染人喉鳞癌细胞株 ,用 Western Blot方法检测 p16基因在喉鳞癌细胞中的表达 ,体外、体内实验观察 p16基因治疗和放射治疗对喉癌细胞的生长抑制作用。结果　复制缺陷型腺病毒载体可有效地将外源性 p16基因转染入人喉鳞癌细胞株中并使其表达 P16蛋白 ;体外、体内抑瘤实验表明 :Ad- p16基因治疗组、单纯放疗组和 Ad- p16基因与放疗联合治疗组肿瘤生长均明显受抑制 ,疗效显著优于携带 L ac Z基因的重组腺病毒 (Ad- L ac Z)组和 PBS对照组 (P<0 .0 5 ) ,其中联合治疗组肿瘤生长最为缓慢 ,与 Ad- p16基因治疗组和单纯放疗组比较均有显著性差异 (P<0 .0 5 )。结论　 p16基因可有效地抑制人喉鳞癌细胞生长。; 付艳军刘世喜鲜均明; 关键词：P16基因放疗喉鳞癌基因治疗

外源性p16基因稳定转染对喉癌细胞周期和增殖的影响被引量：4: 2003年; 目的 :探索p16基因在喉癌细胞内的表达作用及基因治疗方面的应用前景 .方法 :采用亚克隆技术 ,构建p16真核表达载体 pCDNA3 p16 .利用lipofectamine介导 ,将外源野生型 p16基因导入喉癌细胞系Hep 2 ,筛选阳性克隆 ,采用打点杂交技术、免疫荧光、免疫组化、图像分析法观察和分析p16基因的表达 .同时以空载体质粒pCDNA3为对照 ,用流式细胞仪分析瘤细胞生长周期、荧光染色检测细胞凋亡 .结果 :打点杂交、免疫荧光、免疫组化及图像分析法分析证实转染p16基因的Hep 2细胞有外源p16基因的表达 ,外源基因p16在Hep 2细胞系中的表达能抑制Hep 2细胞系的生长 .流式细胞仪计数和免疫荧光检测证实p16能诱导喉癌细胞系Hep 2发生凋亡并导致其发生G1期阻滞 .结论; 孙永柱崔鹏程陈文弦李贵泽朱春生; 关键词：外源性P16基因喉癌细胞周期细胞增殖基因治疗

外源性p16基因转染对人膀胱癌细胞PCNA和P53蛋白表达影响的研究被引量：1: 2003年; 目的 :探讨复制缺陷型腺病毒介导的 p16基因转染 ,对人膀胱癌细胞中增殖细胞核抗原 (PCNA)和P5 3蛋白表达的影响。　方法 :将 p16基因重组腺病毒 (Ad p16 )感染P16蛋白表达缺失的人膀胱癌T2 4细胞株 ,流式细胞术评估Ad p16对T2 4细胞中PCNA和P5 3蛋白表达的影响。　结果 :PCNA主要在S期和G2 ～M期高表达 ,Ad p16转染T2 4细胞后 ,PCNA阳性细胞百分率降低 ,PCNA表达的荧光强度减弱 ;Ad p16转染未能使T2 4细胞表达P5 3蛋白。　结论 :PCNA在Ad p16转染后其含量减少 ,PCNA的表达与细胞的增殖能力密切相关 ,PCNA可作为评估肿瘤细胞恶性增殖能力的指标 ;Ad p16转染不能使T2 4细胞表达P5 3蛋白。; 周文泉高建平葛京平张征宇魏武马宏青周水根薛松梁培禾; 关键词：P16基因增殖细胞核抗原 P53蛋白

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