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HPLC-一测多评法测定连花清瘟胶囊中绿原酸、甘草苷、木犀草苷、连翘酯苷A、连翘苷和大黄酸: 2024年; 目的建立高效液相色谱-一测多评法测定连花清瘟胶囊中绿原酸、甘草苷、木犀草苷、连翘酯苷A、连翘苷、大黄酸的方法。方法使用Inertsil ODS-3色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈–0.4%磷酸水,梯度洗脱;体积流量:1.0 mL/min;柱温:25℃;检测波长:280 nm。以连翘苷为内参物,建立其他5种成分的相对校正因子,一测多评法计算各成分。结果绿原酸、甘草苷、木犀草苷、连翘酯苷A、连翘苷、大黄酸分别在0.243~4.861、0.112~2.248、0.087~1.732、0.247~4.949、0.370~7.402、0.095~0.952μg/mL线性关系良好(r≥0.9995),平均回收率分别为99.40%、101.0%、104.5%、98.17%、99.70%、99.58%,RSD值分别为1.12%、2.53%、3.15%、2.94%、1.41%、2.84%(n=6)。结论该法回收率高、重复性良好,为连花清瘟胶囊建立更全面的质量控制提供了新方法。; 陈燕军吴有根魏惠珍金浩鑫; 关键词：连花清瘟胶囊甘草苷木犀草苷连翘酯苷A 连翘苷

连翘酯苷A对大鼠急性心肌缺血保护作用及机制研究被引量：1: 2023年; 目的观察连翘酯苷A(FA)对大鼠急性心肌缺血损伤的影响并探讨其作用机制。方法将SD大鼠随机分为假手术(n=25)、模型(n=17)、FA低剂量(n=19)、FA高剂量组(n=20)。除假手术组外,利用大鼠冠状动脉前降支结扎的方法构建急性心肌缺血模型。FA低、高剂量组于造模前1天分别给予FA20、40 mg/(kg·d)灌胃,假手术组和模型组给与等量生理盐水灌胃,连续7天。采用HE染色观察心肌组织病理学改变,ELISA检测大鼠血清中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、白介素-6(IL-6)、IL-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,Western Blot观察心肌Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子(MyD88)、磷酸化核因子κB(p-NF-κB)p65蛋白表达,免疫组化法观察心肌p-NF-κB p65蛋白表达。结果假手术组大鼠心肌细胞排列较为整齐,模型组大鼠的心肌纤维排列紊乱,横纹模糊,可见细胞肿胀,伴有大量炎性细胞浸润,FA低、高剂量组有所改善。与假手术组比较,模型组大鼠血清中SOD水平降低(P<0.01),血清MDA、IL-1β、IL-6、TNF-α水平、心脏组织TLR4、MyD88、p-NF-κBp65的蛋白表达升高(P<0.01)。与模型组比较,FA组SOD水平升高(P<0.01),IL-1β、IL-6、TNF-α、MDA水平、心脏TLR4、MyD88、p-NF-κB p65蛋白表达降低(P<0.01)。FA高、低剂量组各指标比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论FA可通过抑制TLR4/NF-κB信号通路的激活来发挥改善大鼠急性心肌缺血的作用。; 王琛赵小建孟哲李海禹桑海强; 关键词：连翘酯苷A 急性心肌缺血炎症反应氧化应激

连翘酯苷A对肝星状细胞增殖及凋亡的影响: 2023年; 目的研究连翘酯苷A(FA)对肝星状细胞增殖活化及凋亡的影响。方法以人肝星状细胞(LX-2)作为实验对象,采用血小板衍生生长因子(PDGF)-BB模拟肝纤维化微环境,实验分为对照组、PDGF-BB组、FA组、PDGF-BB+FA组。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测LX-2细胞活力;采用油红O检测细胞内脂滴的情况;采用免疫荧光染色检测细胞内α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达;采用蛋白质印迹技术(Western Blot)检测纤维化相关标志蛋白[α-SMA、α1-I型胶原蛋白(COL1A1)]和凋亡相关蛋白[B淋巴细胞瘤-2蛋白(BCL-2)、剪切的-腺苷二磷酸核糖聚合酶(cleaved-PARP)、BCL-2相关X蛋白(BAX)、剪切的-半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cleaved-CASPASE-3)]的表达;采用流式细胞仪检测细胞凋亡。结果 FA处理后LX-2细胞活力明显下降,且呈剂量依赖性;油红O实验结果显示,与PDGF-BB组比较,FA组细胞内脂滴数量较多;免疫荧光染色结果显示,与PDGF-BB组相比,FA组细胞内α-SMA荧光斑点的数量减少;WesternBlot实验结果显示,FA组α-SMA、COL1A1、BCL-2蛋白表达减少,cleaved-PARP、BAX、cleaved-CASPASE-3蛋白表达增加。结论 FA可抑制肝星状细胞的增殖、活化,促进凋亡,改善PDGF-BB诱导的体外肝纤维化。; 刘蓉唐斌刘漪沦谭悦浩李灿胡雪沈昊天邓峰美; 关键词：凋亡肝纤维化肝星状细胞连翘酯苷A

连翘酯苷A对玉米赤霉烯酮诱导的PK-15细胞凋亡的影响: 2023年; 为探究连翘酯苷A(FA)对玉米赤霉烯酮(ZEA)诱导的猪肾上皮细胞PK-15凋亡的影响及其可能的保护机制,体外培养PK-15细胞,经36.55μg·mL^(-1)ZEA和不同质量浓度(31.25、62.50、125.00μg·mL^(-1))FA处理24 h,采用噻唑蓝(MTT)法测定细胞存活率;通过Hoechst 33342活细胞染色在荧光显微镜下观察细胞凋亡情况;利用试剂盒检测细胞上清液中的乳酸脱氢酶(LDH)活性和活性氧(ROS)水平;利用实时荧光定量PCR测定细胞中的Bax、Bcl-2、Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9 mRNA的表达水平.结果表明:质量浓度在125.00μg·mL^(-1)以下的FA可以提高PK-15细胞存活率;FA能显著提高经ZEA处理的PK-15细胞存活率,且能显著降低经ZEA处理的细胞上清液中的LDH活性,抑制ZEA引起的ROS的生成;ZEA能显著提升Bax、Caspase-8、Caspase-3和Caspase-9 mRNA的表达量,Bcl-2 mRNA的表达量显著降低;不同质量浓度的FA能不同程度地提高Bcl-2 mRNA的表达量,降低Bax、Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9 mRNA的表达量.上述结果说明ZEA会诱导PK-15细胞发生凋亡,但FA可通过抑制内源性凋亡途径和氧化应激反应抑制细胞凋亡,从而起到保护作用.; 卢春亭潘丽琴胡会石金姿朱洁莹崔红杰黄小红; 关键词：连翘酯苷A 玉米赤霉烯酮 PK-15细胞细胞凋亡

连翘脂苷A通过miR-502-3p/CDCA5通路调控结肠癌细胞HCT 116增殖、迁移和侵袭的分子机制研究: 2023年; 目的探讨连翘脂苷A是否通过微小RNA-502-3p(miR-502-3p)/细胞分裂周期相关蛋白5(CDCA5)通路调控结肠癌细胞HCT 116增殖、迁移和侵袭。方法将对数期的HCT 116细胞用80、160、320 mg/L连翘脂苷A处理,分别记为低剂量组、中剂量组、高剂量组,同时将未处理的细胞设为对照(NC)组。将正常人正常结肠上皮NCM460细胞用320 mg/L连翘脂苷A处理,计为NCM460高剂量组,将未处理的细胞设为对照,计为NCM460组。48 h后收集HCT 116细胞、进行增殖、迁移、侵袭、基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP9、CDCA5蛋白表达和miR-502-3p表达测定,收集NCM460细胞进行增殖、迁移、侵袭测定。根据转染靶标将HCT 116细胞分为NC组(未行转染)、si-NC组(转染si-NC)、si-CDCA5组(转染si-CDCA5)、miR-NC组(转染miR-NC)、miR-502-3p组(转染miR-502-3p)、anti-miR-NC组(转染anti-miR-NC)、anti-miR-502-3p组(转染anti-miR-502-3p)、anti-miR-NC+高剂量组(转染anti-miR-NC+320 mg/L连翘脂苷A)、anti-miR-502-3p+高剂量组(转染anti-miR-502-3p+320 mg/L连翘脂苷A),检测HCT 116细胞的增殖、迁移和侵袭。双荧光素酶活性检测分析miR-502-3p与CDCA5的靶向结合。结果低、中、高剂量连翘脂苷A作用后结肠癌HCT 116细胞的增殖能力、细胞迁移数量、细胞侵袭数量、MMP2、MMP9、CDCA5蛋白表达量均逐渐降低,miR-502-3p表达量逐渐升高,呈剂量依赖性,差异均有统计学意义(P<0.05)。NCM460组与NCM460高剂量组的NCM460细胞增殖、迁移及侵袭数量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。CDCA5低表达或miR-502-3p高表达可减弱HCT 116细胞MMP2及MMP9蛋白表达、细胞增殖、迁移及侵袭能力,差异均有统计学意义(P<0.05),而miR-502-3p低表达的结果相反。miR-502-3p靶向调控CDCA5的表达。连翘脂苷A抑制HCT 116细胞CDCA5、MMP2、MMP9蛋白表达、增殖能力、细胞迁移和细胞侵袭的作用被miR-502-3p低表达所逆转。结论连翘脂苷A通过上调miR-502-3p靶向调控CDCA5的表; 卞雪春杨赛廖若夷; 关键词：结肠肿瘤微RNAS 增殖

连翘酯苷B抑制小鼠脑缺血/再灌注引起的氧化应激损伤:基于激活AAMPK/DAF-16/FOXO3通路被引量：2: 2023年; 目的研究连翘酯苷B(FB)对脑缺血/再灌注(I/R)引起的氧化应激损伤的保护作用及作用机制。方法将90只C57BL/6小鼠随机分为5组,假手术组(Sham),模型组(model),FB低、中、高剂量组(10、20、40 mg/kg),采用大脑中动脉阻塞(MCAO)2 h,再灌注24 h,制备脑I/R模型。试剂盒检测小鼠脑组织ROS、MDA、PCO、8-OhdG、SOD、GSTα4、CAT、GPx水平,Western blot检测小鼠脑组织AMPK、P-AMPK、DAF-16、FOXO3、P-FOXO3蛋白表达。在此基础上,采用AMPK抑制剂Compound C(CC)验证FB是否通过AMPK发挥抑制氧化应激损伤作用,将36只C57BL/6小鼠随机分为,Sham组、model组、FB(40 mg/kg)组、FB(40 mg/kg)+CC(10 mg/kg)组。TTC染色检测脑梗死体积,试剂盒检测ROS、SOD水平,Western blot检测小鼠脑组织AMPK、P-AMPK、DAF-16、FOXO3、P-FOXO3蛋白表达。结果与model组比较,FB可降低小鼠脑组织ROS、MDA、PCO、8-OHdG水平,升高小鼠脑组织中抗氧化酶SOD、GSTα4、CAT、GPx活性,提高AMPK、FOXO3磷酸化及DAF-16蛋白表达水平(P<0.01)。与FB组比较,FB+CC组AMPK和FOXO3磷酸化水平降低,DAF-1表达减少,脑梗死体积增加,ROS水平升高,SOD水平降低(P<0.01)。结论 FB能够抑制I/R引起的脑组织氧化应激损伤,作用机制是通过促进AMPK磷酸化、其下游DAF-16蛋白表达及FOXO3磷酸化,促进抗氧化酶的表达,清除过量ROS,从而发挥治疗缺血性脑卒中的作用。; 陈兴王开万储德海朱羽张文兵曹慧萍谢文宇鲁传豪李侠; 关键词：氧化应激

Impact of Azithromycin on Forsythiaside Pharmacokinetics in Rats:A Population Modeling Method被引量：1: 2022年; Objective:Lianhuaqingwen and Shuanghuanglian are drug treatment options for Corona Virus Disease 2019(COVID-19).In China,use of traditional Chinese medicine with Shuanghuanglian or Lianhuaqingwen(for them,forsythiaside is the active antiviral and antibacterial component)in combination with azithromycin is common for the treatment of pediatric pneumonia.It is important to understand the reason why the combination of these compounds is better than a single drug treatment.This study aimed to explore the pharmacokinetic interaction between forsythiaside and azithromycin.Methods:Twelve male Sprague-Dawley rats were randomly divided into an experimental group(Forsythia suspensa extract and azithromycin)and a control group(a single dose of Forsythia suspensa extract in 5%glucose solution).Plasma samples were collected at scheduled time points,and the high-performance liquid chromatography combined with ultraviolet method was used to determine the plasma forsythiaside concentration.Non-compartmental analysis and population pharmacokinetic methods were used to investigate the forsythiaside pharmacokinetic difference between the experimental and control group.Results:Compared with a single administration,the area under the curve and half-life of forsythiaside increased,and forsythiaside clearance decreased significantly after co-administration with azithromycin.The in vivo behavior of forsythiaside could be described by the one compartment model.The forsythiaside clearance decreased when combined with azithromycin.Visual evaluation and bootstrap results suggested that the final model was precise and stable.Conclusion:Co-administration of azithromycin can significantly decrease the forsythiaside clearance and increase drug exposure.A lower dose of azithromycin can obtain sufficient forsythiaside concentration to provide antiviral and antibacterial activity.; Jing-chen TIANXuan-ling ZHANGJian-rong CUIXin-gang LI; 关键词：AZITHROMYCIN FORSYTHIASIDE PHARMACOKINETICS ANTIVIRALS

连翘脂苷A对乙酰胆碱酯酶的抑制作用被引量：3: 2022年; 连翘脂苷A(forsythiaside A,FTA)是连翘的主要活性成分,对阿尔茨海默症有一定的疗效。运用荧光竞争结合实验、分子对接、分子动力学模拟和丙氨酸突变扫描等方法分析了连翘脂苷A对乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE)的抑制作用和结合模式。结果显示:连翘脂苷A对AChE有一定抑制作用IC_(50)值为1.11×10^(-7)mol/L,解离常数Ki值为5.5×10^(-8)mol/L,连翘脂苷A经由H键作用结合于AChE的CAS区,两者结合自由能为-98.20 kJ/mol,静电作用力是结合的主要驱动力,Ser200,Phe120和Ser205为两者结合的关键氨基酸。; 邓培渊袁伟陈龙欣杨莹莹; 关键词：乙酰胆碱酯酶分子动力学

连翘酯苷A与弹性蛋白酶相互作用的研究被引量：2: 2022年; 连翘的主要成分之一连翘酯苷A(FSA)有抗炎活性,对弹性蛋白酶(PPE)有抑制作用。本文通过光谱法以及分子对接模拟法研究了FSA与PPE的相互作用。结果表明,FSA对PPE之间存在π-阳离子、π-π共轭、氢键和疏水作用力等多种作用,能够形成稳定的1∶1的复合物,使得FSA能够抑制PPE的活性,具有抗炎作用。; 付金凤姚红柳尹广婷周雪健苏丽红; 关键词：连翘酯苷A 弹性蛋白酶光谱法

连翘酯苷A对脓毒症大鼠急性肺损伤的保护作用被引量：1: 2022年; 目的观察连翘酯苷A对脓毒症大鼠急性肺损伤(ALI)的保护作用。方法将雄性SD大鼠随机分为正常对照组、假手术组、脓毒症模型组和连翘酯苷A干预组, 每组10只。正常对照组不予任何干预;假手术组仅行开关腹手术;模型组和连翘酯苷A干预组采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制备脓毒症大鼠模型。连翘酯苷A干预组于术后0.5 h内灌胃连翘酯苷A 75 mL/kg, 6 h后重复灌胃1次;假手术组和模型组灌胃等量生理盐水。各组术后12 h取肺组织进行病理学观察;制备肺组织匀浆, 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL-1β、IL-6)水平;采用黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶(SOD)活性;采用比色法检测丙二醛(MDA)含量;采用蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)检测核转录因子-κB p65(NF-κB p65)蛋白表达。结果正常对照组与假手术组肺组织均无明显病理学改变, 且各项指标差异均无统计学意义。模型组大鼠肺间质可见大量炎症细胞浸润, 肺泡结构破坏明显, 肺泡隔增宽, 肺泡腔内广泛出血, 毛细血管扩张;肺组织中TNF-α、IL-1β、IL-6、MDA含量及NF-κB p65蛋白表达均较正常对照组和假手术组显著升高〔TNF-α(ng/L):132.81±16.15比45.08±5.98、46.10±6.72, IL-1β(ng/L):137.32±15.22比51.03±7.89、50.92±8.13, IL-6(ng/L):138.39±14.28比51.68±7.03、52.48±7.36, MDA(kU/g):1.79±0.13比0.96±0.05、0.97±0.05, NF-κB p65蛋白(NF-κB p65/GAPDH):2.82±0.23比1.76±0.12、1.82±0.13, 均P<0.05〕, SOD活性则显著降低(kU/g:45.90±5.46比92.11±10.13、93.36±10.56, 均P<0.05)。连翘酯苷A干预组大鼠肺组织病理学改变较模型组明显改善, 表现为肺组织炎症细胞浸润明显减少, 肺泡隔增宽程度明显减小, 出血明显减少, 结构也较完整;肺组织TNF-α、IL-1β、IL-6、MDA含量及NF-κB p65蛋白表达均较模型组显著降低〔TNF-α(ng/L):72.48±9.78比132.81±16.15, IL-1β(ng/L):83.85�; 蔡莉娟江荣林; 关键词：连翘酯苷A 脓毒症肺损伤

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