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大鼠短间隔连续部分肝切除后ADAMs mRNA表达分析被引量：3: 2001年; 目的　说明ADAMs(adisintegrinandmetalloproteinase)在肝再生的不同阶段表达不同。方法　用RT -PCR方法和ADAMs通用引物对本实验建立的大鼠短间隔连续部分肝切除 (shortintervalsuccessivepartialhepatectomy ,SISPH )模型 0、4、8、12hr ,0、36、72、10 8、14 4hr及 0、4、40、76、112hr肝再生过程中的mRNA进行分析。结果　正常大鼠和SISPH后大鼠肝脏均存在ADAMs的表达 ,但表达强度不同。; 李玉昌马军林俊堂梁卫红徐存拴; 关键词：ADAMS 通用引物 RT-PCR 肝再生

大鼠短间隔连续部分肝切除上调表达基因的克隆与分析: 2003年; 以短间隔连续部分肝切除 1 1 2h为试验方 ,以 0h对照为驱动方 ,应用抑制性消减杂交技术构建了高效率的正向消减cDNA文库 ,从中随机挑取的 5 0个克隆中有 45个包含了 1 0 0～ 3 5 0bp插入片段 ,对这些片段进行测序后经GenBankblast同源性检索 ,表明 8个片段均为未知新序列。; 李玉昌徐存拴林俊堂张会勇李文强魏明旭张云汉; 关键词：短间隔连续部分肝切除抑制性消减杂交肝再生基因克隆

ADAMs的结构和功能被引量：6: 2001年; ADAMs是近几年发现的一类锚定于细胞膜的跨膜糖蛋白,含多个结构域并具有多种功能,它们的结构域包括信号肽区、前调控区、金属蛋白水解酶区、解联蛋白区、富半胱氨酸区、上皮生长因子区、跨膜区和胞内区等;它们的功能包括蛋白水解、分子修饰、分子释放、细胞与细胞和细胞与基质相互作用、细胞识别、细胞内信号传导、细胞间通讯等,简要总结了ADAMs一级结构、高级结构、理化性质、结构区组成、各结构区功能以及ADAMs在肝再生过程中的变化等方面的研究进展。; 徐存拴张为民林俊堂胡轶红梁卫红李玉昌; 关键词：ADAMS 信号肽整联蛋白跨膜糖蛋白结构域

短间隔连续部分肝切除(SISPH)对大鼠肝ACP、AKP、HSC70/HSP68和PCNA的影响被引量：6: 2001年; 本文以间隔时间(4h和36h)相互交叉的短间隔连续部分肝切除(36-4-4 SISPH和4-36-36-36SISPH)为模型,分析了ACP、AKP、HSC70/HSP68和PCNA的活性和含量变化。结果表明:140 kD的ACP和AKP活性在两种模型中都随着肝切除次数的增加而增加,而160 kD的AKP和ACP则与此相反;PCNA在4-36-36-36 SISPH中比在36-4-4SISPH中表达更多,而HSC70/HSP68的表达则与此相反。可见,连续部分肝切除的次数和方式能影响ACP、AKP、HSC70/HSP70和PCNA的活性和含量,并讨论了其可能的机理和生理意义。; 徐存拴卢爱灵封青川李庚午; 关键词：短间隔连续部分肝切除大鼠肝 ACP AKP PCNA

ADAMs的结构和功能简介被引量：1: 2002年; ADAMs(adisintegrinandmetallopoteinase)是近几年在细胞中发现的一类含有多个功能区的膜蛋白。本文简要介绍了ADAMs的结构和功能 ,为国内进行有关方面的研究提供了初步资料。; 张卫民徐存拴; 关键词：ADAMS 细胞膜蛋白蛋白水解细胞识别信号传导

常氏肝癌细胞cDNA文库的构建及ADAMs相关基因的免疫筛选与序列分析被引量：4: 2004年; 抽提常氏肝癌细胞的总RNA ,以oligo(dT)为引物 ,通过两次转换模板 ,采用LD PCR合成全长cDNA ,在cDNA两端引入SfiⅠ的酶切位点。以λTriplEX2为载体经过包装后构建了常氏肝癌细胞cDNA表达文库。以ADAMs通用抗体 ,用免疫筛选技术从常氏肝癌cDNA文库中筛选出 2 2个阳性克隆 ,经测序分析和BLAST检索 ,证实其中一个为新基因 ,部分区域具有蛋白酶的功能 ,对该基因进行了GenBank登录 ,获注册号为AY0 780 70。; 林俊堂李玉昌张会勇徐存拴; 关键词：CDNA文库免疫筛选基因克隆

连续4次(每次间隔36h)部分肝切除对大鼠肝ACP、AKP、HSC70/HSP68和PCNA的影响被引量：8: 2001年; 在分析了连续 3次 (每次间隔 4h)部分肝切除对肝细胞生化和增殖的影响后 ,本文又以连续 4次 (每次间隔 3 6h)部分肝切除 (shortintervalsuccessivepartialhepatectomy ,SISPH)大鼠为模型 ,分析了SISPH对肝脏酸性磷酸酶 (ACP)、碱性磷酸酶 (AKP)、构成性热休克蛋白 70 /诱导性热休克蛋白 68(HSC70 /HSP68)和增殖细胞核抗原 (PCNA)活性和含量的影响。结果表明 ,第 1次切除肝的左外叶后恢复 3 6h ,ACP和AKP活性及HSC70 /HSP68和PCNA表达量均增加 ;第 2、 3、 4次分别切除左中叶和中叶、右叶、尾状叶 (每次间隔 3 6h)后 ,AP活性和PCNA含量与AKP活性和HSC70 /HSP68含量呈负相关性 ;间隔 3 6h的连续部分肝切除延缓了细胞分化时间。根据上述实验中ACP和AKP在细胞内位置和活性变化推测 :AKP和ACP可能共同参与了细胞的增殖启动 ;PCNA和AKP可能参与了DNA合成和细胞增殖 ;ACP和HSC70 /HSP68可能在蛋白质转运、选择性降解和细胞结构、功能重建中起重要作用。; 封青川卢爱灵李庚午徐存拴

短间隔连续部分肝切除(SISPH)对肝细胞核和核仁的影响被引量：8: 2001年; 以建立的 4种短间隔连续部分肝切除模型 (shortintervalsuccessivepartialhepatectomy ,SISPH)为材料 ,分析了连续部分肝切除 (successivepartialhepatectomy ,SPH)次数和方式对大鼠肝细胞核和核仁的体积、数目影响 ,证实了肝细胞核和核仁的大小、数目变化与SISPH的次数和方式正相关。; 段瑞峰昌静峰张冬芬夏民徐存拴

短间隔连续部分肝切除(SISPH)中ADAMs基因表达差异分析被引量：2: 2001年; 用ADAMs通用引物进行RT PCR ,以检测短间隔连续部分肝切除 ( 4 3 6 3 6 3 6SPH)中不同恢复时间ADAMs基因转录情况。结果表明 :( 1)ADAMs基因转录无个体和性别差异 ,也无肝再生恢复期依赖性 ;( 2 )PCR产物克隆、测序证实 ,肝脏中有MDC9同源序列存在 ;( 3 )用MDC9特异性引物PCR检测表明 ,MDC9在正常和不同恢复时期肝脏中均有一定水平转录。; 梁卫红林俊堂李玉昌徐存拴; 关键词：肝再生 RTPCR ADAMS

应用抑制性消减杂交技术克隆大鼠肝再生过程中特异表达基因被引量：1: 2002年; 应用抑制性消减杂交技术成功地构建了高消减效率的正向消减cDNA文库 ,从随机挑取的 5 0个克隆中有31个均检出了 6 0～ 40 0bp插入片段 ,对这些插入cDNA片段进行测序后经Genbank同源性检索 ,表明其中 7个片段为未知新序列。大鼠肝切除后肝再生cDNA正向消减文库的建立为进一步大批量筛选、克隆肝再生特异性表达的未知新基因奠定了基础。; 李玉昌徐存拴张云汉; 关键词：抑制性消减杂交消减文库部分肝切除再分化

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