公共文化服务平台

嗜热真菌Chaetomium thermophilium热稳定糖化酶的分离纯化及特性研究（英文）: ＜正＞Thermostable amylolytic enzymes are currently investigated to improve industrial processes of starch degrad...; 陈静; 文献传递

嗜热真菌Thermomyces lanuginosus热稳定几丁质酶的纯化及其性质研究: ＜正＞嗜热真菌Thermomyces lanuginosus在以胶状几丁质为惟一碳源的合成培养基中诱导产生了胞外几丁质酶,采用硫酸铵沉淀、DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子层析、Phenyl-Seph...; 郭润芳李多川王荣; 文献传递

一株嗜热毛壳菌β-葡萄糖苷酶的分离纯化及特性被引量：12: 2004年; 研究了液体发酵嗜热毛壳菌Chaetomium thermophile产生的β-葡萄糖苷酶的分离纯化及特性。粗酶液经硫酸铵沉淀、DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子层析、Phenyl-Sepharose 疏水层析、Sephacryl S-100分子筛层析等步骤后获得凝胶电泳均一的β-葡萄糖苷酶。经12.5%SDS-PAGE和凝胶过滤层析方法分别测得该酶的分子量大小约为78.4kDa和81kDa。该酶反应的最适温度和pH值分别为60℃和4.5-5.0。有较好的酸稳定性和热稳定性。金属离子对β-葡萄糖苷酶的活性影响较大, 其中Ca2+对酶有激活作用, 而Ag+、Cu2+ 、Hg2+对酶有显著的抑制作用。该酶对水杨苷具有很强的底物特异性。; 楚春雪李多川郭润芳; 关键词：Β-葡萄糖苷酶纯化嗜热真菌嗜热毛壳菌

嗜热真菌Thermomyces langinosus一种蛋白激酶的分子克隆及特性（英文）: ＜正＞Based on the conserved amino acid sequence of serine-threonine protein kinase from several filamentous fung...; 李多川; 文献传递

疏绵状嗜热丝孢菌热稳定几丁质酶的纯化及其性质研究被引量：19: 2005年; 采用硫酸铵沉淀、DEAE SepharoseFastFlow阴离子层析、Phenyl Sepharose疏水层析等步骤获得了凝胶电泳均一的疏绵状嗜热丝孢菌 (Thermomyceslanuginosus)几丁质酶。经SDS PAGE和凝胶过滤层析测得纯酶蛋白的分子量在 4 8～ 4 9 .8kD之间。该酶反应的最适温度和最适pH分别为 5 5℃和 4 5 ,在pH4 5条件下 ,该酶在 5 0℃以下稳定 ;6 5℃的半衰期为 2 5min ;70℃保温 2 0min后 ,仍保留 2 4 %的酶活性。其N 端氨基酸序列为AQGYLSVQYFVNWAI。金属离子对几丁质酶的活性影响较大 ,Ca2 + 、Na+ 、K+ 、Ba2 + 对酶有激活作用 ;Ag+ 、Fe2 + 、Cu2 + 、Hg2 + 对酶有显著的抑制作用 ;以胶体几丁质为底物的Km 和Vmax值分别为 9 .5 6mg mL和 2 2 . 12 μmol min。抗菌活性显示 ,该酶对供试病原菌有不同程度的抑制作用。; 郭润芳李多川王荣; 关键词：嗜热真菌 THERMOMYCES LANUGINOSUS 几丁质酶

嗜热真菌Thermomyces lanuginosus热稳定几丁质酶基因的cDNA克隆及表达被引量：14: 2006年; 根据Thermomyces lanuginosus热稳定几丁质酶Chit的N-端氨基酸序列和同源保守序列设计简并引物,通过RT-PCR及快速扩增cDNA末端(RACE)的方法,克隆了该几丁质酶的编码基因chit,全长cDNA为1500bp,包含一个由442个氨基酸组成的开放阅读框。该基因已在GenBank中注册,登录号为DQ092332。将成熟肽几丁质酶Chit阅读框与酵母表达载体pPIC9K连接,构建重组质粒pPIC9K/chit,转化毕赤酵母GS115,在甲醇的诱导下,成功地分泌出具生物活性的几丁质酶,诱导6d后酶活性达2.261U/mL,酶蛋白表达量为0.36mg/mL。该酶的最适反应温度和pH值分别为60℃和5.5,该酶在50℃以下稳定;65℃的半衰期为40min。; 郭润芳李多川; 关键词：几丁质酶 RACE 同源性

嗜热毛壳菌CT2纤维二糖水解酶Ⅰ在毕赤酵母中的高效表达被引量：13: 2006年; 嗜热毛壳菌ChaetomiumthermophilumCT2可产生具有重要工业生产价值的纤维素酶类。RT-PCR扩增cbh1成熟蛋白的编码基因,利用基因重组的方法构建可在毕赤酵母分泌表达系统中表达纤维二糖水解酶的重组表达载体,并转化毕赤酵母得到重组子。在毕赤酵母醇氧化酶AOX1基因启动子的作用下,重组蛋白得到高效表达,小规模发酵量达1.42mg/mL。表达蛋白分泌到培养基中,分子量约80kD;以脱脂棉为底物测得酶活为21U/mL。表达蛋白在60℃稳定,70℃保温60分钟仍保持90%的酶活力,具有较高的热稳定性。; 刘守安李多川张燕郭芳先俄世瑾; 关键词：纤维素酶羧甲基纤维素

嗜热毛壳菌外切葡聚糖纤维二糖水解酶的纯化和部分性质研究被引量：12: 2006年; 研究液体发酵嗜热毛壳菌(Chaetomium thermophilum)产生的一种外切葡聚糖纤维二糖水解酶的分离纯化及特性。粗酶液经硫酸铵沉淀、DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子层析、Sephacryl S-100分子筛层析、Q Sepharose Fast Flow强阴离子层析等步骤后获得凝胶电泳均一的外切葡聚糖纤维二糖水解酶。经12.5%SDS-PAGE和凝胶过滤层析方法测得该酶的分子量大小约为66.3kDa和67.1kDa。该酶反应的最适温度和pH值分别为65℃和5.0。在60℃以下酶比较稳定,在70℃酶的半衰期为1h,在80℃下保温20min仍具有20%的活性,该酶的热稳定性较中温真菌的同类酶高,与国外报道的嗜热真菌的同类酶热稳定性接近。以pNPC为底物的Km值为0.956mmol/L。; 李亚玲李多川滕芳超; 关键词：嗜热毛壳菌

嗜热毛壳菌纤维素酶(CBHⅡ)cDNA的克隆及在毕赤酵母中的表达被引量：23: 2005年; 嗜热毛壳菌Chaetomium thermophilumCT2是一种土壤腐生菌,可产生具有重要工业生产价值的纤维素酶类。RACEPCR获得嗜热毛壳菌纤维二糖水解酶Ⅱ(CBHⅡ)的编码基因(cbh2)。DNA序列分析表明cbh2的开放阅读框由1428个碱基组成,编码476个氨基酸。推断的氨基酸序列包含一个典型真菌纤维素酶的糖结合域(CBD)、催化域(CD)以及二者之间富含脯氨酸和羟基氨基酸的连接桥。根据氨基酸序列推算该酶分子量为53kD,属于糖苷水解酶第六家族,具有该家族催化保守区的典型特征。PCR扩增cbh2的成熟蛋白编码基因,利用基因重组的方法构建可在毕赤酵母分泌表达系统中表达纤维二糖水解酶蛋白的重组表达载体,并转化毕赤酵母得到重组子。在毕赤酵母醇氧化酶AOX1基因启动子的作用下,重组蛋白得到高效表达,小规模发酵量达1.2mgmL。经硫酸铵沉淀、DEAE-Sepharose Fastflow阴离子层析等步骤纯化了该重组表达蛋白。SDSPAGE得到重组蛋白分子量为67kD,与从嗜热毛壳菌中纯化的该酶分子量一致。该重组纤维二糖水解酶作用的最适合温度50℃,最适pH4.0,在70℃的半衰期为30min,具有较好的热稳定性。; 刘守安李多川俄世瑾张燕; 关键词：嗜热毛壳菌纤维二糖水解酶 CDNA克隆巴斯德毕赤酵母

嗜热毛壳菌一种β-葡萄糖苷酶的分离纯化及特性被引量：9: 2006年; 研究了嗜热毛壳菌Chaetomium thermophilum 液体发酵产生的一种胞外β-葡萄糖苷酶的分离纯化及特性.粗酶液经硫酸铵沉淀、DEAE-Sepharose Fast Flow 阴离子层析、Phenyl-Sepharose 疏水层析、Sephacryl S-100 分子筛层析等步骤后获得凝胶电泳均一的β-葡萄糖苷酶.经10%SDS-PAGE 和凝胶过滤层析方法分别测得该酶的分子量大小约为118.0kDa 和120.1kDa.该酶反应的最适温度为70℃, 最适pH 值为4.0～5.0.有高的热稳定性,在60℃保温1小时酶活性不丧失,在70℃时的半衰期为16min,在90℃保温10min仍具有7.6%的活性.且能在pH 4.0～11.0 之间保持稳定.金属离子对β-葡萄糖苷酶的活性影响较大, 其中 Ca2＋、Ba2＋对酶有激活作用, 而Zn2＋、Cu2＋、Al3＋、Ag＋、Hg2＋对酶有显著的抑制作用.; 滕芳超李多川李亚玲李浙江; 关键词：嗜热真菌最适温度最适PH值

渝B2-20050021-1　渝公网安备 50019002500403号　违法和不良信息举报中心　互联网出版许可证　新出网证(渝)字10号

国家高技术研究发展计划(2003AA241162)

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户反馈

国家高技术研究发展计划(2003AA241162)

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户登录

用户反馈