南开大学生命科学学院遗传学和细胞生物学系 作品数:14 被引量:37 H指数:3 相关作者: 塔拉 更多>> 发文基金: 天津市应用基础与前沿技术研究计划重点项目 国家重点实验室开放基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 农业科学 环境科学与工程 更多>>
单分子PCR技术及其应用 被引量:3 2005年 常规PCR技术大都以大量DNA分子(一般为105个以上)为模板进行DNA扩增。新近发展起来的单分子PCR技术是一种以极少量DNA分子(1、5或10个分子)为模板进行扩增的技术。在高保真度DNA聚合酶作用下,单分子PCR技术能扩增出高度一致的DNA;在低保真度DNA聚合酶作用下,单分子PCR技术又能构建出含有大量突变基因的DNA文库。该文将介绍单分子PCR的基本原理、实验步骤、特点及其应用。 杨鹏 陈喜文 陈洁 陈德富关键词:DNA聚合酶 CYLD的亚细胞定位及其对微管组织的调节 2013年 CYLD基因位于16q12.1,编码一个由956个氨基酸组成的蛋白质,其基因的突变与人类家族性圆柱瘤等肿瘤的发生有着密切的关系.利用从细菌中纯化的CYLD片段免疫小鼠,得到CYLD特异性抗体.通过该抗体对细胞进行免疫荧光显微分析,发现在有丝分裂末期内源的CYLD与微管共定位于中体上.进一步利用绿色荧光蛋白标记的CYLD转染细胞,发现CYLD过表达导致细胞内微管组织的紊乱.这些研究结果提示CYLD作为一种微管结合蛋白,除了已知的调节微管组装的动态性之外,在调节微管的组织方面可能也发挥重要的作用. 孙蕾 高金珉 孙晓鸥 刘敏 李登文 周军关键词:抗体 免疫荧光 微管 小鼠胚胎干细胞系的建立及向雌性生殖细胞诱导的研究 被引量:1 2018年 胚胎干细胞具有自我更新和多向分化潜能的两大特性.在体外产生功能性的配子需要模拟体内生殖细胞发育的多个步骤.而将胚胎干细胞诱导成生殖细胞对于生殖细胞特化的机制研究以及在辅助生殖领域的应用都有着重大的意义.建立了具有生殖系转移能力的雌性胚胎干细胞系,并在体外将其定向分化成原始生殖细胞样细胞,这些原始生殖细胞样细胞在体内可以发生减数分裂,证明了诱导的生殖细胞具有功能性.建立一个有效的生殖细胞诱导的平台,为以后研究体外配子的发生打下了坚实的基础. 曾明 绳小艳 叶孝颖 王玲玲 王华 周忠诚 赵强 刘林关键词:减数分裂 生物膜曲度形成机制的探讨 被引量:1 2012年 细胞及其内部的细胞器均是由生物膜包被的。很多膜结构的特异形状是由膜的不同曲度引起的。诱导膜曲度的因子非常多,但往往都使用相似的原理。本文总结了生物膜曲度形成的几种主要机制,包括脂质成分组成的影响、细胞骨架的牵引、蛋白质的疏水性插入,以及蛋白形成脚手架维持曲度等。另外,有些蛋白质虽然本身不诱导曲度,却可以感应膜的曲度。这些曲度的形成机制在细胞生命活动中经常会交互综合产生作用,以确保细胞器塑形、囊泡发生及细胞自噬等重要过程的正常进行。 孙厦 胡俊杰关键词:生物膜 细胞骨架 脚手架 Mdp3抗体的制备和应用 2012年 Mdp3是1个由876个氨基酸组成的蛋白质,其基因位于Xq26.3.利用pET32a(+)载体,构建了原核表达His-Mdp3融合蛋白的质粒pET32a(+)-Mdp3,转化到E.coli BL21(DE3)中,用IPTG诱导融合蛋白表达.摸索得到了His-Mdp3融合蛋白的最佳表达条件,并纯化得到大量纯度较高的蛋白质.利用从细菌中纯化的His-Mdp3蛋白免疫小鼠,得到针对Mdp3的抗体,并通过免疫印迹实验验证了该抗体的特异性.最后,用该抗体对细胞进行免疫荧光显微分析,发现Mdp3在细胞内呈现特异的定位模式. 孙晓鸥 塔拉 周军关键词:蛋白纯化 抗体 免疫荧光 利用蛋白组学分析杜氏盐藻Ds-26-26提高大肠杆菌耐盐性的分子机制 土壤盐渍化是限制生物生长与分布的关键因素之一,寻找和鉴定新的耐盐基因、阐明其分子机制,是利用生物技术提高生物耐盐性的重要环节,对于盐渍化土壤改良与利用具有特殊的意义。杜氏盐藻(Dunaliella salina)是迄今为... 王燕龙 胡斌 高山 张文豪 陈喜文 陈德富关键词:耐盐性 ITRAQ 分子机制 大肠杆菌 乳铁蛋白的理化性质及其重组表达系统的研究进展 被引量:13 2015年 乳铁蛋白(Lactoferrin,Lf)是分子量大小约为80 k Da的铁离子结合糖蛋白,是转铁蛋白(Transferrin,Tf)家族的成员之一。其理化性质独特,具有抑菌、抗病毒、抗癌、免疫调节、调节铁离子的吸收等诸多生物学功能。获得高产且有生物活性的重组乳铁蛋白,并用于临床治疗,一直是研究热点。随着基因工程技术的发展,已获得多个可表达重组乳铁蛋白的表达系统。本文对乳铁蛋白的理化性质、生物学活性、临床研究以及目前的重组表达系统进行综述,以期为乳铁蛋白的临床应用提供参考。 庞晓楠 弘笑 魏璇 陈喜文 刘佳 陈德富关键词:乳铁蛋白 抑菌 抗病毒 免疫调节 内质网膜形态维持的分子机制 被引量:1 2011年 内质网(endoplasmic reticulum,ER)是广泛存在于真核生物中的一类形态多样、功能重要的细胞器。内质网的连续膜系统由细胞核核膜、核周区域和外周区域组成。从形态上来看,内质网可以分为片状及管状两种结构,并且这两种形态又发挥着不同的生理功效。近年来的一些研究逐渐揭示了内质网这一复杂膜结构维持的机制,许多新发现的蛋白参与到内质网形态的维持过程中,其中整合膜蛋白reticulons和DP1/Yop1p既能诱导内质网管状结构的形成,又可能参与片状内质网的塑形,而atlastins和Sey1p则通过介导膜融合促进内质网管状网络的构建。更重要的是,一类称做遗传性痉挛性截瘫的人类神经退行性疾病与内质网形态的完整性有直接的关联。以近几年的研究结果为基础,对内质网膜形态的维持机制进行简要阐述。 隋学武 胡俊杰关键词:内质网 CLIP-170在细胞内定位与发挥功能的分子基础 2014年 构建了带有绿色荧光标记的CLIP-170不同结构域的表达质粒,检测了CLIP-170全长对微管形态的影响及其不同结构域在细胞内与微管相互作用的情况.发现不仅2个CAP-Gly结构域对CLIP-170定位于微管很重要,其coiled-coil结构域和锌指模序也可以使CLIP-170部分定位于微管上. 孙晓东 高金珉 刘敏 李登文 周军关键词:微管 微管结合蛋白 绿色荧光蛋白 JNK/c-Jun信号通路对肿瘤多药耐药基因表达的调控 肿瘤的多药耐药性,即肿瘤细胞同时对多种在化学结构和作用机理上显著不同的药物产生抗性,是肿瘤化疗的一大难题。肿瘤多药耐药性发生的一个重要原因是,肿瘤细胞过量表达 P 糖蛋白(由 MDR1基因编码)等药物泵,可以将进入肿瘤细... 刘敏文献传递