重庆医科大学基础医学院干细胞与组织工程研究室
- 作品数：46 被引量：190H指数：7
- 相关作者：沈宜梁芯李静梁潇姜容更多>>
- 相关机构：第三军医大学高原军事医学系重庆医科大学附属第一医院临床学院第三军医大学大坪医院野战外科研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学自动化与计算机技术更多>>
- 沉默核糖核酸酶抑制因子促进膀胱癌BIU-87细胞生长和转移潜能
- 2011年
- 目的研究沉默核糖核酸酶抑制因子(ribonuclease inhibitor,RI)基因表达,对人膀胱癌BIU-87细胞增殖和侵袭能力及肿瘤生长的影响。方法通过用RI mRNA的特异性siRNA表达载体和无同源性的对照载体,在脂质体介导下稳定转染膀胱癌BIU-87细胞,通过筛选、鉴定后,用Am-blue法检测细胞增殖能力及用Western blot分析细胞中MMP-2和MMP-9的表达。将siRNA RI BIU-87(实验组)及对照组细胞皮下注射到BALB/c裸鼠中,观察肿瘤的生长和肿瘤微血管密度的变化,以及nm23-H1和E-cadherin在肿瘤中的表达。结果 RI基因表达下调显著增加了细胞的增殖,而且显著增强了MMP-2和MMP-9的表达。动物实验结果显示,实验组显著促进了肿瘤的生长(促瘤增长率31.85%),具有更大的瘤质量和更高的肿瘤微血管密度以及更低的nm23-H1和E-cadherin的表达。结论抑制RI基因的表达能显著提高膀胱癌细胞的生长和侵袭潜能,RI可能作为治疗膀胱癌的靶蛋白。
- 陈俊霞高娟朱军姜蓉
- 关键词：核糖核酸酶抑制因子膀胱癌细胞肿瘤生长
- ERK途径可能参与抗坏血酸诱导的神经干细胞向多巴胺能细胞分化被引量：6
- 2013年
- 目的探讨抗坏血酸（ascorbic acid，AA）诱导神经干细胞（neural stem cells，NSCs）向多巴胺能神经元方向分化的作用并初步探索其机制。方法从12.5 d胚胎大鼠中脑获得NSCs，培养扩增后分为对照组和分别加入1、10、50、100、200 μmol/L AA处理组，比较NSCs向多巴胺能神经元分化结果；采用免疫细胞化学对NSCs以及分化后神经元进行鉴定和检测，RT-PCR检测酪氨酸羟化酶（tyrosine hydroxylase，TH）、多巴胺转运子（dopamine transporter，DAT）、SHH、Nurr1、Ptx3 mRNA表达；在AA诱导分化中加入ERK阻断剂 PD98059，以探讨ERK通路在分化中的作用。结果获得大量的神经球并且表达nestin强阳性；AA处理组比对照组表现出较强的多巴胺能分化，其中100 μmol/L AA诱导组表达TH和DAT阳性细胞数量比对照组明显增加（P〈0.05），增加30～50倍；AA诱导增加了Nurr1、TH、DAT、SHH mRNA的表达，ERK抑制剂PD98059能抑制AA诱导后Nurr1、TH、DAT mRNA的表达而不影响SHH mRNA表达（P〈0.05 ）。结论抗坏血酸能诱导神经干细胞分化为多巴胺能神经元，ERK途径可能是AA诱导过程中参与多巴胺能分化的途径之一，Nurr1基因可能参与到ERK途径中或者是其下游基因。
- 邓小兰晋贞超王健郑敏
- 关键词：神经干细胞促分裂原活化蛋白激酶细胞外信号调节激酶通路信号转导
- 高三尖杉酯碱对小鼠黑色素瘤细胞增殖和迁移的影响和机制探讨
- 2021年
- 本研究探讨了高三尖杉酯碱(Homoharringtonine,HHT)对小鼠黑色素瘤细胞B16F10增殖和迁移的影响及可能的机制。不同浓度HHT处理体外培养的B16F10细胞,CCK-8法检测HHT对细胞活力的影响;细胞克隆形成实验检测其对细胞增殖能力的影响;流式细胞术检测HHT对细胞周期的影响;Transwell实验检测HHT对B16F10迁移能力的影响;蛋白免疫印迹法(Western blotting)检测周期及迁移关键蛋白的表达水平。
- 唐加峰冉建华张滔李静陈地龙
- 关键词：高三尖杉酯碱B16F10小鼠黑色素瘤细胞蛋白免疫印迹法
- 当归多糖照射前后给药对放射损伤小鼠造血功能恢复的比较研究被引量：21
- 2010年
- 目的:研究和比较当归多糖(Adhesion molecule,APS)2种不同给药方式对放射损伤小鼠造血功能的修复作用。方法:外周血WBC、RBC、PLT及BMNC计数;流式细胞术检测APS对放射损伤小鼠Sca-1+BMNC粘附分子CD44和CD49d表达、BMNC细胞周期的影响;MTT法测定APS对放射损伤小鼠骨髓细胞增殖活性的影响。结果:与正常组比较,各NS组外周血WBC、RBC、PLT及BMNC计数明显减少,Sca-1+BMNCCD44、CD49d表达、骨髓细胞增殖活性明显下降,BMNCG0/G1期细胞比例显著增加。各APS预处理组能在更早期促进外周血各系和BMNC数目恢复、更早促进Sca-1+BMNC表面CD44和CD49d的表达下降使放射损伤小鼠造血功能较同时间点、同等剂量APS治疗组恢复快。各APS预处理组骨髓细胞增殖活性、BMNCG0/G1期细胞比例较同时间点、同等剂量APS治疗组差异无统计学意义(P>0.05)。结论:APS对放射损伤小鼠造血功能具有修复作用,初步观察APS预处理组优于APS治疗组。
- 张雁吴宏关雪晶周玥
- 关键词：当归多糖粘附分子SCA-1CD49D
- 当归多糖对放射损伤小鼠骨髓单个核细胞黏附分子表达及细胞周期的影响被引量：7
- 2010年
- 目的探讨当归多糖(APS)对放射损伤小鼠骨髓单个核细胞(BMNC)黏附分子表达及细胞周期的影响,旨在阐明APS防护辐射性造血损伤的分子机制。方法建立小鼠放射损伤模型后连续给予不同剂量APS 13d,在不同时间点进行外周血白细胞、红细胞、血小板及BMNC计数;流式细胞术检测小鼠Sca-1+BMNC黏附分子CD44和CD49d表达及BMNC细胞周期的变化;Western blot和RT-PCR方法分别检测小鼠BMNC细胞周期蛋白(Cyclin)D2 mRNA和蛋白表达水平的改变。结果与正常组比较,NS组外周血WBC、RBC、PLT及BMNC计数明显减少,Sca-1+BMNC CD44、CD49d表达明显下降,G0/G1期细胞比例显著增加,CyclinD2 mRNA和蛋白表达水平明显降低。2 mg/kgAPS组和8 mg/kgAPS组能增加外周血各指标及BMNC计数,第7d明显提高Sca-1+BMNC黏附分子CD44、CD49d的表达水平,第14d能降低Sca-1+BMNC黏附分子CD44、CD49d的表达水平,降低G0/G1期细胞比例,提高CyclinD2mRNA和蛋白表达水平。结论当归多糖能通过调节放射损伤小鼠Sca-1+BMNC黏附分子的表达水平、上调BMNC的CyclinD2 mRNA和蛋白表达水平来加速BMNC G1期向S期的转换,促进造血恢复。
- 张雁关雪晶吴宏周玥姜蓉何晓莉
- 关键词：当归多糖SCA-1黏附分子CD49D细胞周期CYCLIN
- 高三尖杉酯碱对人黑色素瘤A375细胞增殖的影响及机制研究被引量：4
- 2020年
- 目的探究高三尖杉酯碱(homoharringtonine,HHT)对人黑色素瘤A375增殖的影响及可能的作用机制。方法采用CCK-8法检测HHT对A375细胞增殖的影响;Hoechst 33258染色法观察染色质凝集情况;细胞克隆形成实验检测HHT对A375细胞克隆形成能力的影响;流式细胞术(Flow cytometry,FCM)检测HHT对A375细胞凋亡和周期影响;Western blot检测Bcl-2、Bax、Cleaved-caspase 3、Cleaved-PARP、CyclinB1和CDK1蛋白的表达情况。结果CCK-8结果显示,随着药物的剂量(0、0.05、0.1、0.2、0.4、0.8μmol·L^-1)和作用时间(24、48、72 h)增加,HHT对A375细胞的抑制作用逐渐增强;Hoechst 33258染色和FCM结果显示,HHT可使A375细胞染色质呈凋亡形态改变,促进细胞凋亡,将A375的细胞周期阻滞于G2/M期;克隆形成实验显示,HTT可以抑制A375细胞的克隆形成能力;Western blot结果表明HHT可下调CyclinB1、CDK1和Bcl-2蛋白水平,上调Bax,Cleaved-caspase 3和Cleaved-PARP蛋白表达水平。结论HHT使A375细胞阻滞于G2/M期,抑制A375细胞增殖;HHT可激活线粒体凋亡信号通路,诱导黑色素瘤A375细胞凋亡。
- 唐加峰张滔黄世莹杜玉梅李静冉建华陈地龙
- 关键词：黑色素瘤HHT增殖A375
- 阿尔兹海默病的血管病变研究进展被引量：3
- 2017年
- 阿尔兹海默病(AD)的大脑存在Aβ大量沉积,表现为认识、学习和记忆能力障碍。体视学方法研究提示,大脑结构的完整性与AD早期的认知功能下降有密切联系,同时血管在对大脑结构完整性中发挥重要作用。大脑毛细血管起着调节大脑微环境、维持局部脑血流量的作用,而血管性因素对AD的发病和病程进展起着关键作用,甚至被认为是AD的发病机制之一。基于血管的病理改变在中枢神经系统的地位及对AD的重要作用,本文回顾了血管性危险因素、血管损伤机制和血管病变在AD中的研究进展。
- 张毅晁凤蕾张蕾蒋林周春妮唐勇
- 关键词：阿尔兹海默病大脑结构血管危险因素毛细血管
- 肝X受体激动剂对抑郁模型小鼠海马少突胶质细胞的影响被引量：1
- 2021年
- 目的:探讨肝X受体(LXRs)激动剂(GW3965)对慢性不可预知性应激(CUS)诱导的抑郁症小鼠海马结构各亚区内少突胶质细胞数量的影响。方法:将51只4〜6周龄雄性C57BL/6J小鼠,随机分为对照组(control)、慢性不可预知性应激组(CUS)和慢性不可预知性应激+GW3965处理组(CUS+GW3965),给予CUS组小鼠和CUS+GW3965组小鼠连续70 d的CUS干预,同时从第43 d起给予CUS+GW3965组小鼠连续28 d的腹腔注射GW3965,在第70 d进行行为学测试,随后利用免疫组织化学结合现代体视学方法,对小鼠海马结构各亚区CC1+标记的成熟少突胶质细胞的数量进行三维定量研究。结果:42 d的CUS干预导致CUS组小鼠和CUS+GW3965组小鼠的体质量和糖水偏好百分比均显著性降低,强迫游泳不动时间显著性增加;而28 d的LXRs激动剂治疗可显著性增加CUS+GW3965组糖水偏好百分比,并显著性减少强迫游泳不动时间。体视学结果显示:CUS干预可导致小鼠海马CA 1区、CA 3区和D G区内CC1^(+)少突胶质细胞数量显著性减少,而LXRs激动剂治疗可显著增加CUS+GW3965组小鼠海马CA3区内CC1^(+)少突胶质细胞数量。结论:LXRs激动剂能够改善CUS模型小鼠的抑郁样症状,逆转抑郁症模型小鼠海马CA 3区内少突胶质细胞的丢失。
- 祝佩林唐静梁芯梁芯黎悦肖凯李静黄春霞
- 关键词：肝X受体海马少突胶质细胞体视学小鼠
- 二甲双胍激活AMPK/p53调节尿素循环抑制结肠癌HCT116细胞增殖被引量：2
- 2020年
- 目的探讨二甲双胍(metformin,Met)对HCT116细胞增殖的抑制作用及机制。方法采用CCK-8法检测细胞增殖情况;细胞克隆形成实验检测细胞克隆形成的能力;流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测细胞周期和凋亡率;免疫荧光染色观察磷酸化腺苷酸激活蛋白激酶(p-AMPK)的定位情况,Western blot检测p-AMPK、AMPK、p53、p-p53、精氨酸酶1(ARG1)、鸟氨酸转氨甲酰酶(OTC)和鸟氨酸脱羧酶(ODC)的表达情况。结果 CCK-8结果显示:Met呈浓度和时间依赖性抑制细胞的增殖;FCM结果显示:Met能诱导细胞发生凋亡,将细胞周期阻滞于G1期;克隆形成实验显示:Met可以抑制细胞的克隆形成能力;经免疫荧光染色可知:Met处理组细胞胞质及胞核内p-AMPK的表达增加;Western blot结果显示:p-AMPK、p53、p-p53蛋白的表达上调,ARG1、OTC、ODC蛋白的表达下调。结论 Met可抑制结肠癌细胞HCT116的增殖,诱导G1期细胞周期阻滞,促进细胞凋亡;其可能的机制与激活AMPK、p53信号,抑制尿素循环ARG1、OTC和多胺生成限速酶ODC的表达有关。
- 张滔胡玲唐加峰徐航田宽黄世莹杜玉梅杨周倩李静李静陈地龙
- 关键词：二甲双胍HCT116P53OTCODC
- S100A9通过TLR4/NF-κB信号通路活化星形胶质细胞促进炎症反应被引量：2
- 2022年
- 为探讨S100A9诱导星形胶质细胞活化及促炎机制,本研究采用不同浓度S100A9蛋白作用于小鼠星形胶质细胞24 h, CCK-8检测星形胶质细胞增殖;划痕实验检测细胞迁移能力;RT-qPCR检测胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)和补体C3 mRNA表达水平;ELISA检测细胞上清液中白细胞介素-6(interleukin-6, IL-6)和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)蛋白水平;细胞转录组测序筛选出TLR4/NF-κB信号通路;Western blot检测细胞中TLR4、MYD88、P65和PP65蛋白含量;TLR4/NF-κB信号通路的活化情况验证。结果表明,与对照组相比,5μg/mL S100A9对星形胶质细胞有明显的促进增殖和迁移的作用;S100A9可以显著上调活化标志物GFAP、C3以及炎症因子IL-6、TNF-α,并上调细胞表达TLR4、MYD88、P65和PP65蛋白水平;应用TLR4受体抑制剂TAK-242和NF-κB通路抑制剂BAY11-7082可以显著逆转星形胶质细胞活化及炎症因子的分泌。综上所述,S100A9促进星形胶质细胞的增殖和迁移,通过TLR4/NF-κB信号通路促进星形胶质细胞A1型活化及分泌炎症因子促进炎症反应。
- 周鑫白巧张小印叶柳彭彦唐勇刘永刚
- 关键词：S100A9星形胶质细胞炎症NF-ΚB
