山东大学医学院分子生物学实验室
- 作品数：30 被引量：125H指数：5
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- HPV58 E6体外降解p53蛋白作用的研究
- 2002年
- 通过PCR方法从人乳头瘤病毒 5 8型 (HPV5 8)全基因克隆中扩增出HPV5 8E6基因片段 ,克隆至真核表达质粒pcDNA3的T7启动子下游 ,并在体外转录成mRNA后 ,在源自网织红细胞的翻译缓冲液中成功表达了含有生物素标记的HPV5 8E6蛋白 ,并在体外成功发现HPV5 8E6能够降解p5 3蛋白 ,从而推断结合并降解p5 3蛋白是其致癌作用的关键环节 。
- 杨海宁于修平卞继峰JasonJChen赵蔚明贾继辉周亚滨刘颖栾怡齐眉
- 关键词：体外降解P53蛋白乳头状瘤病毒抑癌蛋白
- RelA反义寡核苷酸对胰腺癌细胞增殖活性的影响被引量：3
- 2004年
- 目的 研究核因子-κBp65(RelA)反义寡核苷酸对胰腺癌细胞株Capan-2增殖活性的影响。方法 噻唑蓝(MTT)还原法、克隆形成试验观察RelA反义寡核苷酸对细胞的生长抑制,逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测Rel AmRNA变化,细胞免疫组织化学检测RelA蛋白表达,流式细胞仪检测细胞周期。结果 RelA反义寡核苷酸作用后,细胞生长抑制率可达43.5％,克隆形成率下降(47.3±8.2 vs 26.7±5.5,P<0.05),RelA mRNA表达降低,RelA蛋白表达下降(70.8±6.5 vs 49.5±6.0,P<0.01),G_0/G_1期细胞由56.54％增至82.83％,S期细胞由39.06％减至11.29％。结论 RelA反义寡核苷酸能够抑制胰腺癌细胞的生长。
- 史朝晖姜希宏赵峰王伟
- 关键词：反义寡核苷酸增殖活性胰腺癌细胞噻唑蓝克隆形成率
- RP-HPLC测定盐酸恩丹西酮注射液中盐酸恩丹西酮的含量被引量：2
- 2004年
- 盐酸恩丹西酮(ondansetron hydrochloride)是一种高效并有高度选择性的5-羟色胺受体拮抗剂。临床上用于癌症药物化疗和放射性治疗引起的恶心呕吐。有文献用紫外分光光度法和高效毛细管区带电泳技术测定含量。未见用RP-HPLC法测定的报道，本文建立了用RP-HPLC法测定盐酸恩丹西酮注射液制剂中的盐酸恩丹西酮含量，经方法考察，本法简便、快速、准确、结果可靠，可用于本品质量控制和临床应用检测。
- 刘传华陈运久卞继峰胡海燕王伟
- 关键词：RP-HPLC法盐酸恩丹西酮色谱条件
- 脑脊液寡克隆IgG区带检测方法研究被引量：2
- 2001年
- 刘师莲秦延江刘传华刘贤锡胡海燕祁维平王哓明于素贞
- 关键词：寡克隆区带电泳聚丙烯酰胺凝胶高压液相色谱法
- 牛乳头瘤病毒E6蛋白与p73蛋白作用的研究
- 2001年
- 杨海宁于修平Jason J.Chen卞继峰
- 关键词：乳头瘤病毒E6蛋白P73蛋白
- 人乳头瘤病毒16型野毒株L1-E7融合基因重组腺病毒载体构建及在293细胞中表达嵌合病毒样颗粒的研究被引量：5
- 2001年
- 目的 制备人乳头瘤病毒HPV16L1 E7重组腺病毒 ,以期获得防治宫颈癌的重组腺病毒减毒活疫苗。方法 以HPV16型的野毒株HPV16 114/K为模板 ,利用PCR克隆技术制备HPV16L1 E7融合基因pUC19L1 E7,含L1的 1～ 30 1氨基酸 (AA)和E7的 1～ 6 0AA的编码DNA序列 ;并转入腺病毒穿梭质粒pCA14L1 E7,与腺病毒质粒pBHG10共转染 2 93细胞 ,筛选重组腺病毒rAd5HPV16L1 E7。以PCR、ELISA和Westernblot方法鉴定重组病毒及其表达的L1 E7蛋白 ,密度梯度超速离心纯化HPV16嵌合L1 E7VLP ,电镜观察VLP的形态结构。结果 PCR DNA序列分析表明成功构建了HPV16L1 E7重组质粒pUC19L1 E7;并获得HPV16重组腺病毒rAd5HPV16L1 E7,在 2 93细胞中可高效表达L1 E7蛋白 ,并形成嵌合病毒样颗粒 (cVLP)。结论 构建的重组腺病毒rAd5HPV16L1 E7可有效表达HPV16L1 E7cVLP ,可进一步用于动物实验 。
- 卞继峰于修平赵蔚明杨海宁王芸胡海燕周亚滨贾继辉栾怡齐眉耿昭
- 关键词：乳头状瘤病毒病毒样颗粒腺病毒载体
- 携带双启动子DNA疫苗载体的减毒沙门菌在体内定植及动态变化被引量：4
- 2004年
- 目的:探讨双启动子DNA疫苗载体在减毒沙门菌中的稳定性和重组减毒沙门菌在小鼠体内的定植及动态变化。方法:将人乳头瘤病毒双启动子DNA疫苗载体pCN鄄16L1E7转化减毒沙门菌S.SL3261熏经口服、鼻饲和皮肤途径免疫小鼠,在免疫后的第3、4、5、6周取小鼠粘膜相关淋巴组织,电镜观察细菌在组织中的定植;组织匀浆,细菌培养计数确定细菌的增殖;从细菌中提取质粒酶切鉴定以确定质粒的稳定性。结果:重组减毒沙门菌S.SL3261能在小鼠脾脏、肝脏和粘膜相关淋巴组织中定植,电镜可检测到多个细菌定植灶;重组减毒沙门菌可有效进入机体细胞并有限增殖达6周,在第4～5周菌落数量达到高峰,然后逐渐减少以至最后被清除。pCN鄄16L1E7可在减毒沙门菌中稳定存在,载体的产量和酶切图谱没有明显变化。结论:双启动子DNA疫苗载体pCN鄄16L1E7与减毒沙门菌有较好的相容性,能够在小鼠体内定植及有限增殖。口服、鼻饲和皮肤粘膜接种途径均可有效地将减毒沙门菌携带的DNA疫苗载体导入粘膜相关淋巴组织。
- 卞继峰于修平耿昭卢翌胡海燕王晓明
- 关键词：乳头状瘤病毒疫苗DNA沙门菌属
- HIF-1α、VEGF在腋淋巴结阴性乳腺癌组织中的表达及意义被引量：1
- 2006年
- 目的:检测缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)、微血管密度(MVD)在腋淋巴结阴性乳腺癌组织中的表达及其与乳腺癌分型、分级及预后的关系,探讨HIF-1α作为判断肿瘤恶性程度、预后及肿瘤基因治疗靶点的可行性。方法:采用免疫组织化学方法检测73例乳腺癌组织中HIF-1α、VEGF、MVD的表达状况,并与临床随访结果进行综合分析,对其中随访10年以上的32例作生存分析研究。结果:HIF-1α在乳腺癌中总阳性表达率为65.8%,其中强表达7例(9.6%),中度表达10例(13.7%),弱表达31例(42.5%),不表达25例(34.2%);73例乳腺癌组织中69例VEGF表达阳性,占94.5%,其中强表达52例(71.2%),中度表达15例(20.5%),弱表达2例(2.7%),不表达4例(5.5%)。73例乳腺癌中每例MVD为4～48个,平均为20.16±16.48。HIF-1α和VEGF在乳腺癌中两者阳性指数呈正相关(P<0.01)。HIF-1α、VEGF均为单独影响乳腺癌预后的危险因素。结论:HIF-1α可作为判断乳腺癌恶性程度、预后的单独指标,与VEGF联合检测可提高判断水平;HIF-1α可作为肿瘤治疗的靶点。
- 马超周庚寅肖颖郭玲玲林晓燕
- 关键词：缺氧诱导因子内皮生长因子
- 牡丹皮药材HPLC指纹图谱研究被引量：2
- 2006年
- 目的建立牡丹皮药材的HPLC指纹图谱鉴别方法。方法色谱条件:色谱柱:迪马公司D iam onsil C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm)。流动相:甲醇-水溶液梯度洗脱。流量:1mL.m i-n 1。检测波长:280nm。以丹皮酚为参照物。结果指纹图谱共有色谱峰的稳定性、精密度和重复性试验中的RSD均小于6%,符合有关规定〔1〕。结论本研究可作为鉴定牡丹皮药材质量的方法之一。
- 刘传华陈沪宁
- 关键词：牡丹皮高效液相指纹图谱
- 喉鳞癌组织Caveolin-1表达及其与HPV病毒感染相关性的研究被引量：4
- 2011年
- 目的:研究喉鳞状细胞癌组织Caveo-lin-1的表达情况及其与HPV感染之间关系,探讨两者对喉鳞癌生物学行为的影响。方法:分别应用免疫组织化学和原位杂交方法检测喉鳞癌组织中Caveolin-1蛋白及HPV感染的情况,统计学分析两者之间的相关性。结果:Caveolin-1蛋白在喉鳞癌和癌旁组织中的表达率分别为71.2%和9.5%,两者表达差异有统计学意义,P<0.05;Caveolin-1蛋白的表达程度与病理类型、TNM分期、转移相关。喉鳞癌组织HPV感染阳性率为55.1%,癌旁组织为21.4%,两者表达差异有统计学意义,P<0.05;HPV感染与患者年龄、病理类型、TNM分期和转移均无关。喉鳞癌Caveolin-1表达与HPV感染之间呈正相关表达(r=0.62,χ2=10.40,P<0.05)。结论:喉鳞癌组织Caveolin-1表达明显增高并与肿瘤的浸润和转移行为有关,Caveolin-1为判断喉鳞癌生物学的指标之一;HPV感染是喉鳞癌发生的高危因素,并且Caveolin-1与HPV两者之间存在协同作用。
- 肖颖马超潘新良阎世坤曹倩周亚滨
- 关键词：CAVEOLIN-1喉肿瘤肿瘤鳞状细胞乳头状瘤病毒
