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宁波大学医学院宁波市医学分子诊断中心
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3篇
2010
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模板提取方法对HBV DNA实时荧光定量PCR检测的影响
2010年
目的:研究模板纯化与否对血浆HBV DNA实时荧光定量PCR检测线性范围、重复性、灵敏度的影响。方法:采用国产离心柱法DNA纯化试剂盒及实时定量PCR试剂盒提供的直接煮沸裂解法处理107~10110倍浓度梯度稀释的血浆样本和标准品及乙肝窗口期患者的血清标本,用国产HBV PCR荧光定量扩增试剂盒检测,比较其检测结果线性范围、重复性、灵敏度及乙肝窗口期患者HBV DNA阳性检出率。结果:离心柱纯化组和煮沸裂解组的检测线性范围分别为107IU/ml~101IU/ml和107IU/ml~103IU/ml;灵敏度分别为24 IU/ml~48 IU/ml和1200 IU/ml~2400 IU/ml;104IU/ml、103IU/ml、102IU/ml样品的批内变异系数(CV)离心柱纯化组为2.5%、2.3%、1.8%,煮沸裂解组为1.9%、1.6%、12%,批间变异系数(CV)离心柱纯化组为2.3%、2.9%、5.4%,煮沸裂解组为1.7%、4.5%、7.7%;离心柱纯化组和煮沸裂解组的窗口期患者血清标本阳性检出率分别为83.9%和3.6%。结论:HBV血清样品经离心柱纯化可以极大地改善乙型肝炎病毒DNA实时荧光定量PCR检测结果。
毛雄英
王卫华
王德扬
陈辉
关键词:
乙型肝炎病毒
实时荧光定量PCR
血浆游离DNA的定量测定及临床应用
目的建立血浆中游离DNA提取及定量检测方法方法采用国产硅胶吸附离心柱法和QIAGEN MINI BLOOD DNA KIT提取血浆中的游离DNA,用Picogreen荧光染料法和ABI游离DNA荧光定量PCR试剂盒检测试...
陈辉
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血浆游离DNA的定量测定及临床应用
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