沈玉
- 作品数：10 被引量：136H指数：5
- 供职机构：中国科学院发育生物学研究所遗传与发育生物学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划中国科学院科研项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生更多>>
- 人生长激素基因导入金鱼受精卵内的整合、表达和促生长效应研究被引量：3
- 1995年
- 通过显微注射法把小鼠ＭＴ启动子与人生长激素的融合基因（ＭＴ－ｈＧＨ）导入红龙睛金鱼受精卵内，共注射１５０６个卵子，获得８００多尾成鱼。经斑点和Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分子杂交表明，导入的ＭＴ－ｈＧＨ基因与部分受体鱼的染色体ＤＮＡ发生了整合，整合率为２２％，转基因鱼血清中的生长激素含量平均高于对照组，平均生长速度高于对照组。导入的ＭＴ－ｈＧＨ基因可以遗传给后代。
- 史瀛仙张玉廉沈玉于建康
- 关键词：显微注射转基因
- 由成年转基因山羊体细胞而来的克隆山羊被引量：64
- 2002年
- 在已经获得的乳腺特异性表达人促红细胞生成素 (rhEPO)成年转基因山羊 (Caprahircus)的基础上 ,取其耳尖成纤维细胞和卵巢颗粒细胞 ,进行体外传代培养 ,然后将这种培养的转基因山羊的体细胞移入去核的处于第Ⅱ次减数分裂中期的卵母细胞中 ,并进行电融合 ,构建重构胚胎 ,重构胚胎在体内培养 6d ,再将发育至囊胚或桑椹胚的重构胚胎移入同步情期的寄母羊子宫内。结果 ,有 2只寄母羊妊娠并最终产下 2只成活的克隆山羊。她们分别来自同一成年母羊的耳尖成纤维细胞和卵巢颗粒细胞。克隆羊经PCR RFLP图谱分析显示 :以克隆羊组织DNA为模板的PCR产物与相应的提供体细胞的基因羊的PCR产物的酶切图谱完全一致 ;并且经PCR对外源hEPO基因检测表明 2只克隆山羊均携带hEPO外源基因。
- 成勇王玉阁罗金平沈玉杨跃飞鞠辉明邹贤刚徐少甫劳为德杜淼
- 关键词：体细胞克隆山羊
- 核定位蛋白基因在转基因小鼠制备中的应用被引量：5
- 2001年
- 采用细胞质共注射方法，将目的基因表达构件牛α－ｓ１－ｃａｓｅｉｎ－ｈＧ－ＣＳＦ和哺乳类核定位基因表达构件导入受精卵细胞质，利用核定位蛋白的定向迁移功能， 将目的基因表达构件带入原核，获得转基因小鼠．这种转基因途径不仅可以提高转基因小鼠的出生率，而且整合率达５８％（２９／５０），表达率达７５％，用Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ方法初步估算表达水平在６０～５５０ｍｇ／Ｌ乳清．因此这种转基因方法可以替代受精卵原核注射的转基因方法，且效率高、方法简单、实用，便于推广．
- 张靖溥王玉阁李光三沈玉朱少侠杜淼
- 关键词：转基因小鼠基因表达
- 人生长激素基因在花叶芋中的整合与表达被引量：10
- 1993年
- 本试验将人生长激素(hGH)基因插入质粒载体pLGV1103中,构建了重组质粒pLB-9,将此重组质粒引入携带Ti质粒pGV3850的农杆菌,经同源重组,获得共整合重组体pGL198(hGH)Ti质粒。用叶盘共培养法,使pGL198(hGH)转化单子叶植物花叶芋(Caladium bicolor),获得转基因再生植株。经胭脂碱、新霉素磷酸转移酶、Southern印迹以及Western印迹等分析,表明hGH基因已整合到花叶芋DNA中,并且合成了分子量为22kD的表达产物。
- 李宝健王金发徐增富许友卿余慕贞何新沈玉
- 关键词：生长激素花叶芋基因表达
- 携带人衰变加速因子基因转基因小鼠的建立被引量：2
- 2000年
- 目的 通过建立转人衰变加速因子 (DAF)基因小鼠 ,为研究异种器官移植的超急性排斥反应提供有效的研究手段。方法 采用受精卵显微注射技术 ,将人DAF基因导入小白鼠受精卵的原核中。Dot blot及Southern blot杂交确定阳性转基因小鼠。以Northern杂交法检测人DAF基因的表达情况。结果 基因注射后共生出小鼠 2 4只 ,4只为转基因小鼠 ,人DAF基因在其中 1只小鼠体内得到表达。结论 所导入的人DAF基因在小鼠的基因组中实现整合及表达。
- 王剑鹏马腾骧王广有李光三王为先沈玉于建康
- 关键词：衰变加速因子
- 人DAF基因在转基因小鼠中的遗传与表达被引量：1
- 2000年
- 为研究人 DAF基因在小鼠体内遗传与表达的规律 ,从质粒 p SFFV- DAF分离出一段包含人 DAF基因的 DNA片段 .采用受精卵显微注射法建立转人 DAF基因小鼠 .提取出生小鼠的染色体 DNA,经 Dot- blot与 Southern- blot杂交相结合确定首建转基因小鼠 ,并经Dot- blot杂交研究人 DAF基因在转基因小鼠体内的遗传特征 ,Northern杂交确定其表达情况 .小鼠受精卵经基因导入后 ,共生出 2 4只小鼠 ,其中 4只被确定为首建转基因小鼠 ,整合率为 1 5% .在首建转基因小鼠两两交配生出的 F1代小鼠中分别有 70 %和 75%继续携带人DAF基因 .首建转基因小鼠中有 1只小鼠在 RNA水平表达了人 DAF基因 .可见 ,人 DAF基因整合入小鼠基因组中 ,并能够稳定遗传及表达 .
- 王剑鹏马腾骧王广有沈玉李光三于建康
- 关键词：衰变加速因子转基因小鼠异种器官移植
- 金鱼垂体细胞谱系基因切除研究
- 1997年
- 将大鳞大麻哈鱼的垂体细胞特异性表达的生长激素基因（ＧＨ）的启动子与白喉毒素基因的Ａ链相连，构建成融合基因ＧＨ－ＤＴＡ。通过显微注射导入金鱼（Ｃａｒａｓｉｕｓａｕｒａｔｕｓ）受精卵内，获得的实验鱼经Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分子杂交检测表明，少数实验鱼染色体ＤＮＡ中含有导入的外源基因。胚胎的原位分子杂交和垂体的组织切片观察发现，转基因鱼和正常鱼之间存在差异。
- 常华沈玉王为先于建康余来宁
- 关键词：转基因鱼金鱼生物技术
- SL-DTA基因导入金鱼受精卵内整合、表达及效用研究
- 1999年
- 曹凯沈玉于建康
- 关键词：基因导入发育生物学分子杂交显微注射法白喉毒素
- 精子介导鱼类基因转移和聚合酶链反应检测技术被引量：32
- 1994年
- 金鱼精子与美洲大绵■的抗冻蛋白基因一起保温３０分钟后，再与卵子受精，共获得１４５尾成鱼和若干胚胎。从胚胎和成鱼中提取 ＤＮＡ经聚合酶链反应（ＰＣＲ法）扩增和 Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ分子杂交表明，外源的抗冻蛋白基因进入了部分受体鱼的染色体组内。测定的４５尾一年龄实验鱼中，有１２尾显示出明确的杂交带，阳性率为２６％。
- 于建康阎维张玉廉沈玉严绍颐
- 关键词：精子基因转移聚合酶链反应鱼纲
- 人生长激素基因在团头鲂和鲤中的整合和表达被引量：29
- 1994年
- 采用显微注射方法，将带有小鼠ＭＴ－１基因启动顺序与人生长激素ｈＧＨ基因顺序重组的线状ＤＮＡ片段，注入团头鲂和鲤的受精卵，获得成活的实验鱼。经斑点、Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交、Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交、放射免疫和酶联等方法检测，表明外源基因在受体鱼中得到整合、转录、翻译和表达，并具促生长效应。转基因雌鱼和雄鱼有性繁殖所获得的子鱼带有外源基因，表明外源基因能通过性细胞传递给子代，并仍具促生长效应。
- 吴婷婷杨弘董在杰夏德全史瀛仙季肖东沈玉孙伟勇
- 关键词：人生长激素基因团头鲂
