白娟 作品数:134 被引量:227 H指数:9 供职机构: 南京农业大学 更多>> 发文基金: 国家生猪现代产业技术体系建设项目 国家自然科学基金 国家公益性行业科研专项 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 生物学 电气工程 更多>>
脑心肌炎病毒灭活疫苗佐剂的筛选及其效力评价 ISA201、ISA15A、GEL、CP940和1313佐剂分别与脑心肌炎病毒(EMCV)灭活抗原混合,配制成5种疫苗,采用BALB/c小鼠进行免疫保护试验.结果显示,5种佐剂疫苗对小鼠无明显不良反应,均能够诱导机体产生... 蒋康富 白娟 李玉峰 王先炜 姜平关键词:猪脑心肌炎病毒 灭活疫苗 免疫保护效力 鉴别猪伪狂犬病毒变异毒株的PCR引物及方法 本发明涉及生物毒株鉴别技术领域,具体公开了鉴别猪伪狂犬病毒变异毒株的PCR引物及方法,提取待鉴别病毒DNA,采用本发明设计的引物进行第一步扩增,扩增出两条条带的为变异株或HB98疫苗毒株,扩增出1条条带的为经典毒株;扩增... 白娟 吕林 姜平 王先炜猪源伪狂犬病病毒gB蛋白抗体阻断ELISA的建立与应用 被引量:4 2018年 利用伪狂犬病病毒(PRV)ZJ01毒株重组gB蛋白及其对应的HRP标记的单克隆抗体,旨在建立一种检测伪狂犬病病毒gB抗体的阻断ELISA。对ELISA反应条件进行了优化,具体为:包被抗原的质量浓度为0.5 g/mL;待检血清的稀释比例为1∶1,孵育条件是37℃作用1 h;酶标单抗的稀释度为1∶15 000,作用时间为37℃0.5 h。ELISA结果的判定标准为:血清样品阻断率PI≥28.67%时判为阳性;PI≤18.27%时判为阴性;18.27%〈PI〈28.67%时判为可疑。该ELISA能特异性地识别PRV阳性血清,而与PRRSV、PCV2、CSFV和FMDV阳性血清无交叉反应性。ELISA的重复性试验表明,批间和批内的变异系数均小于10%。比较试验结果表明,该ELISA的相对敏感性和特异性分别为80.9%和96.4%,与IDEXX PRV gB ELISA试剂盒的符合率为85.1%。用建立的此ELISA对田间采集的535份猪临床血清样品进行了检测,结果显示,PRV抗体阳性率达61.87%。综上所述,本试验建立的猪源伪狂犬病病毒gB蛋白抗体阻断ELISA具有特异、简单、快速的优点,为建立标准化的检测试剂盒奠定了基础。 孙海凤 徐旋 董静 孙涛 白娟 姜平关键词:伪狂犬病病毒 阻断ELISA 猪圆环病毒2型Cap蛋白单克隆抗体的制备与应用 被引量:5 2014年 利用纯化的猪圆环病毒2型(PCV2)免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤细胞技术,筛选获得3株能稳定分泌抗PCV2蛋白抗体的杂交瘤细胞株,分别被命名为3E5、3E6和5A6。经ELISA测定,它们的培养上清的效价分别为1∶12 800、1∶1 600和1∶6 400,腹水效价分别为1∶6 400 000、1∶640 000和1∶800 000;亚类鉴定结果显示,3株单克隆抗体为IgG2a亚类,轻链为κ型;Western-blot结果显示,3株单克隆抗体均能与PCV2Cap蛋白发生特异性反应;间接免疫荧光试验(IFA)结果显示,3株单克隆抗体均能与感染PCV2的PK-15细胞产生特异性荧光反应;病毒中和试验显示,3E5和3E6具有中和活性。利用单克隆抗体3E5建立了检测PCV2抗原的夹心ELISA;它可被用于检测经β-丙内酯灭活的PCV2和杆状病毒表达系统表达的PCV2Cap蛋白。上述研究成果为PCV2感染的诊断和PCV2蛋白功能的研究提供了重要工具和手段。 翟淑燕 陈兴慧 白娟 王先炜 姜平关键词:猪圆环病毒2型 CAP蛋白 中和活性 单克隆抗体 夹心ELISA PRRSV不同毒力毒株诱导Toll样受体和细胞因子表达特性的比较 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)基因容易变异,不同流行毒株毒力差异较大,造成严重经济损失,但其免疫和致病机制尚不清楚。本研究将24头仔猪平均分成4组,每组6头,分别接种高致病性PRRSV分离株BB0907(HP),低... 张莉莉 刘捷 白娟 王晓晔 李玉峰 姜平关键词:PRRSV TLRS 细胞因子 文献传递 猪Toll样受体配体对PRRSV免疫佐剂作用 猪呼吸与繁殖综合征病毒(PRRSV)给全球养猪业造成了巨大的经济损失,目前商品化疫苗仅能提供部分保护力。近来关于人和猪的一些研究表明Toll样受体(TLR)的配体有免疫佐剂效应,如合成的双链RNA(dsRNA)[poly... 张莉莉 白娟 刘捷 王晓晔 李玉峰 姜平关键词:PRRSV 佐剂 文献传递 Poly(I:C)通过IFIT3作用IFN-β抑制PRRSV复制 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)是引起世界养猪业巨大经济损失主要病原之一,目前商品化疫苗和抗病毒药物保护力有限。三角形四肽重复干扰素诱导蛋白3(IFIT3)被认为是一种新的抗病毒蛋白,对先天性免疫具有重要调节作用。猪... 张莉莉 刘捷 白娟 杜以军 王先炜 刘星 姜平关键词:PRRSV IFN-Β 文献传递 猪源脑心肌炎病毒单克隆抗体研制与免疫学特性测定 2014年 利用纯化灭活的猪源脑心肌炎病毒(EMCV)免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤细胞技术,研制获得4株能稳定分泌抗EMCV抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为1D1、2A2、2B6和4E2。经ELISA测定,细胞培养上清中抗体效价分别为1∶1 600,1∶6 400,1∶6 400和1∶3 200,小鼠腹水抗体效价分别为1∶1.63×106,1∶3.28×106,1∶1.13×106和1∶5.63×105。1D1和2A2单抗亚类为IgG1,2B6和4E2单抗亚类为IgG2b,轻链均为κ型。Western blot结果表明,1D1、2A2和4E2能特异性识别病毒的VP1蛋白,2B6能特异性识别病毒的VP2蛋白。间接免疫荧光试验证明,4株单抗具有良好的特异性,均能识别EMCV。本研究获得的4株特异性单抗,将为EMCV诊断方法的建立和病毒蛋白功能的研究奠定基础。 陈兴慧 白娟 王先炜 李玉峰 姜平关键词:脑心肌炎病毒 单克隆抗体 免疫荧光试验 猪繁殖与呼吸综合征病毒RT-LAMP可视化检测方法的建立与应用 被引量:9 2018年 本研究为建立一种针对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的快速检测方法,根据PRRSV O RF7基因保守区域序列,设计了三对特异性引物。通过Bst D N A聚合酶、引物、Mg2+、d NT Ps和SY BR G reenⅠ及H NB染料浓度等反应条件优化,建立了PRRSV反转录-环介导等温核酸扩增(RT-L AMP)检测方法 ,62℃条件下反应35 min,肉眼可见白色沉淀,1.5%琼脂糖凝胶电泳出现梯形条带,SYBR GreenⅠ染料显示呈绿色。该方法的最低检测限(TCID50)为1×10^0.5/m L,对猪瘟病毒、伪狂犬病病毒、猪圆环病毒2型和猪流行性腹泻病毒等病原均无交叉反应。110份临床样品检测结果显示,PRRSV阳性率60.0%,与RT-PCR检测结果符合率为85.5%。上述结果说明,该方法操作简便,灵敏特异,可用于PRRSV临床样品的快速诊断。 张日腾 张乔亚 姜辰龙 刘宗霞 杨茂春 姜平 白娟关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒 ORF7基因 猪圆环病毒2型单克隆抗体研制与夹心ELISA抗原检测方法的建立 环病毒2型(PCV2)是影响世界养猪业经济损失的重要致病原之一。本研究利用纯化的猪圆环病毒2型(PCV2)免疫Balb/c小鼠,通过单克隆抗体技术,筛选获得3株能稳定分泌抗PCV2-Cap蛋白抗体的杂交瘤细胞株,分别命名... 翟淑燕 陈兴慧 白娟 王先炜 姜平关键词:猪圆环病毒2型 单克隆抗体 抗原检测