鄂顺梅 作品数:33 被引量:105 H指数:5 供职机构: 广东省中医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家教育部博士点基金 广东省科技计划工业攻关项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
大肠埃希菌sdiA基因缺失株的建立 2015年 目的为研究HSL信号分子对大肠埃希氏菌的影响而建立大肠埃希菌sdiA基因缺失株。方法通过Red重组系统敲除大肠杆菌BW25113和SM10λpir的sdiA基因,PCR测序鉴定;不同时间点检测A600值,绘制细菌生长曲线;荧光定量PCR检测csgD、csgB基因水平。结果 PCR测序结果经DNAman软件比对分析,与预想结果一致;与野生株相比,sdiA基因突变对细菌生长曲线无明显影响。结论成功建立BW25113、SM10λpir的sdiA基因缺失株,为后续研究铜绿假单胞菌信号分子HSL对大肠埃希菌的影响奠定了基础。 伍彬宁 蔡壬辛 曾建明 鄂顺梅 李有强 叶大柠 鲁洋 陈茶关键词:大肠埃希菌 RED重组系统 热休克反应对氧化应激所致nucleolin裂解的影响 被引量:3 2004年 观察热休克反应对氧化应激 (0 .5mmol/LH2 O2 )诱导细胞凋亡发生时nucleolin(C2 3)裂解的影响并探讨其机制。方法 :采用caspase 3活性定量分析及免疫印迹技术检测氧化应激诱导的原代心肌细胞、RAW 2 6 4 .7巨噬细胞及K5 6 2白血病细胞凋亡及C2 3的裂解 ;通过热休克反应观察热休克反应对C2 3裂解的影响。结果 :0 .5mmol/LH2 O2处理细胞 2hcaspase 3活性显著升高 ,12h达高峰。免疫印迹结果显示上述各种细胞的C2 3蛋白均发生了裂解 (有 80kD裂解片断出现 ) ,而且最早出现裂解片段的时间都在H2 O2 处理 30min到 1h左右 ;同时热休克反应通过诱导HSP70 ,HSP2 5等应激蛋白表达而显著减少氧化应激所致C2 3的裂解。结论 :氧化应激诱导凋亡发生的同时也引起C2 3的裂解 ;热休克反应显著抑制氧化应激所致C2 3的裂解 。 王慷慨 蒋磊 易宇欣 刘可 鄂顺梅 唐道林 王建设 石永忠 王秋鹏 肖献忠关键词:热休克反应 氧化应激 CASPASE-3 H2O2 片段 HSF1对热应激所致细胞凋亡及凋亡相关基因Fas表达的影响 本研究采用生物信息学方法,筛选启动子区含有HSE核心序列(nGAAnnTTCn)的凋亡相关基因。在此基础上,选用HSF1基因敲除小鼠及其胚胎成纤维细胞(mouseembryonicfibroblasts,MEFs)和稳定... 鄂顺梅关键词:细胞凋亡 热休克因子1 热应激诱导 凋亡基因 文献传递 喹诺酮耐药鲍曼不动杆菌的AFLP基因分型研究 被引量:2 2014年 目的通过对喹诺酮耐药鲍曼不动杆菌(AB)的扩增片段长度多态性分析(AFLP),了解鲍曼不动杆菌的同源性,并探讨其耐药基因分型与AFLP分型之间的联系。方法 Primer Premier 5软件设计11对喹诺酮耐药基因,利用PCR技术对52株喹诺酮耐药鲍曼不动杆菌进行分析,同时使用扩增片段长度多态性分析(AFLP)技术研究基因型,Cross Checker和ntsys软件分析耐药基因和UPGMA方法分析AFLP基因的树型聚类情况。结果 52株鲍曼不动杆菌均对喹诺酮类药物耐药。由聚类分析的结果显示,该52株AB可分2个基因群,其中A群包括A1、A2和A3三个亲缘关系相近的基因型,B群则包括B1和B2两个亲缘关系相近的基因型,A1型为优势菌群。同型的A27、28、30、32、37、47、56均分离自ICU,ICU可能存在过耐药AB的暴发流行。通过与前期研究比较,耐药基因的多基因聚类分析与AFLP树型聚类分析具有一致性也存在不同之处。结论 ICU或许已成为耐药AB菌传播的一个重要枢纽。两种细菌分类方法各有优势,AFLP法是针对全细菌基因组的限制性酶切,在调查细菌流行病学和监控医院整体感染情况方面更权威。 张伟铮 刘纹 蓝锴 屈平华 鄂顺梅 林冬玲 陈茶关键词:鲍曼不动杆菌 基于细菌16SrRNA基因的PCR扩增与测序分析在临床不常见菌鉴定中的应用 被引量:28 2012年 目的探讨细菌16SrRNA基因的广谱PCR扩增与测序分析在临床分离的少见病原菌的鉴定及分类中的价值。方法收集2010年12月至2011年9月来自7家不同医院和机构,常规方法难以鉴定或具有特殊表型的少见菌48株,以及仪器法连续监测报警阳性、但二次传代无细菌生长的液体增菌培养瓶7个,采用细菌16S核糖体核糖核酸(rRNA)基因MicroSeq500试剂盒、通用引物27f-1492r、27f-1525r进行广谱PCR扩增及目的片段的基因测序。运用美国国立生物信息中心“基于局部比对算法的搜索工具(Blast)”,结合“具有法定分类学地位的原核生物名称目录(http://W^Ufir.bacterio.cict.fr/)”提供的分类学信息,比较待鉴定细菌与近缘种模式菌株基因序列的相似程度;参考美国临床与实验室标准化协会(CLSI)MM18-A的解释标准,以确定待鉴定细菌的种属及分类学位置。结果采用广谱PCR测定,7份假阳性血培养瓶中,2份扩增到细菌的16SrRNA基因,经序列分析鉴定均为肺炎链球菌。48株不同来源、不同种属的少见菌,均扩增到16SrRNA基因目的片段并成功测序,参考CLSIMM18-A的解释标准,35株(72.9%)直接鉴定到“种”,11株(22.9%)鉴定到“属”,另2株鉴定为可能的新属新种。进一步结合细菌的生化反应特征及其他管家基因序列分析结果,则可鉴定到“种”的细菌可增加到42株(87.5%),其中包括链杆菌、嗜二氧化碳噬纤维菌、玫瑰单胞菌、奴卡菌、弯曲菌、分枝杆菌等具有明确临床意义的少见菌,以及多株近十年内命名的新细菌,如小不动杆菌、富西亚分枝杆菌、黏液玫瑰单胞菌、Halomonasjohnsoniae等。此外,还发现了1个新亚型的胎儿弯曲菌。结论16SrRNA基因测序鉴定能明确提供细菌的遗传学信息,且无种属选择性,对临床少见菌、苛养菌、以及固体培养基不生长的� 陈茶 屈平华 顾全 黄彬 张伟铮 穆小萍 张磊 陈默蕊 王露霞 鄂顺梅 叶金艳 唐小龙 蓝锴 罗强 戴小波 袁慧关键词:聚合酶链反应 细菌学技术 接合转移质粒pUCP24T的构建与性能研究 被引量:1 2013年 目的构建能在大肠埃希菌(E.coli)和铜绿假单胞菌(PA)间高效接合转移的质粒。方法通过NCBI blastn程序分析质粒pCVD442接合反应起始序列oriT,PCR扩增oriT后插入pMD18-T,再将pMD18-oriT转化E.coli DH5α,经酶切、测序验证后用SmaⅠ和HindIIII双酶切亚克隆至质粒pUCP24,获得质粒pUCP24T,将pUCP24T转化E.coli后研究pUCP24T从E.coli到PA的接合效率和质粒稳定性等。结果成功构建pUCP24T重组质粒,在E.coli和PA的接合实验中,E.coli(pUCP24T)-PA共培养2 h的接合效率平均为3.588×10-2,按12 h一代连续9代继代培养108 h,抗生素压力下质粒保存率为98.29%,无抗生素的培养基中质粒保存率为21.76%。结论成功构建高接合效率的接合转移质粒pUCP24T。 陈树林 陈茶 黄彬 张妮 鄂顺梅 蔡壬辛 袁慧 曲平华 林冬玲关键词:铜绿假单胞菌 基因水平转移 2型糖尿病大鼠六味地黄丸治疗后血脂、血糖以及IL-2和IL-10水平的变化 被引量:1 2016年 目的探讨六味地黄丸治疗2型糖尿病大鼠的疗效。方法构建2型糖尿病、中医分类的阴虚热盛型和气阴两虚型三种的大鼠模型,模型组均采用六味地黄丸干预治疗,正常对照组大鼠采用安慰剂干预,检测四组大鼠干预前后的血糖(Glu)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)以及细胞因子IL-2和IL-10的水平。结果正常对照组的Glu、TC和TG均无明显变化。模型组干预治疗后的Glu和TG水平均明显下降(P<0.05),而TC除阴虚热盛组水平下降明显(P<0.05)外,其余各组的变化不明显;模型组IL-2和IL-10均呈明显弱表达,而治疗后两者的升高较为明显(P<0.01)。结论在大鼠模型中,六味地黄丸治疗2型糖尿病的疗效明显,可引起细胞因子IL-2和IL-10水平的高表达,其疗效可能与Th1/Th2平衡相关。 陈富 郑德想 罗燕芬 李松 秦笙 鄂顺梅关键词:六味地黄丸 2型糖尿病 细胞因子 氧化应激所致C2C12肌源细胞核仁损伤的分子机制 被引量:1 2005年 目的 探讨氧化应激诱导细胞核仁损伤的分子机制。方法 向传代培养的C2C12肌源细胞中加入0 .5mmol/L过氧化氢以模拟氧化应激。结果 甲苯胺兰染色发现正常C2C12细胞可见一个位于中央的,浓染致密的核仁颗粒。过氧化氢处理后3h ,可见明显的核仁分离,处理6h最为明显。细胞总蛋白质合成能力分析发现过氧化氢处理后6h细胞总蛋白质合成能力显著下降(与正常对照比P <0 .0 5 ) ,并持续至2 4h。免疫印迹检测核仁素(又称C2 3)发现,过氧化氢处理1h后可见一80kDa条带,而其110kDa主带明显减弱,过氧化氢处理6h和12h最为明显。用脂质体将核仁素反义核酸导入细胞后2 4h ,免疫印迹发现核仁素表达明显被抑制,同时也可观察到细胞总蛋白合成能力下降及明显的核仁分离。结论 氧化应激通过诱导核仁蛋白质核仁素的裂解并使其110kDa全长分子的量减少,而导致C2C12细胞核仁损伤。 王慷慨 邓恭华 刘可 易宇欣 鄂顺梅 张玲莉 肖献忠关键词:病理学与病理生理学 过氧化氢 核仁 反义核酸 广州市某医疗机构体检儿童血铅水平调查 被引量:3 2012年 [目的]调查广州市0~14岁儿童血铅水平,为防治儿童铅中毒提供科学依据。[方法]收集2010年1月至2011年6月在广东省中医院就诊的0~14岁儿童1517名血铅资料,按照年龄划分为3组:<3岁、3~7岁及>7岁儿童组。采用原子吸收光谱法测定血铅含量。[结果]0~14岁儿童血铅均值为57.05μg/L;血铅≥100μg/L者39例,占调查人数的2.57%。不同年龄组间儿童血铅水平差异有统计学意义(P<0.05);3~14岁年龄段男童血铅水平明显高于女童(P<0.05)。[结论]本次调查儿童血铅水平及铅中毒率较低。但铅对儿童健康的潜在风险不能忽视,应加强儿童铅中毒防治健康教育。 鄂顺梅 陈茶 曾建明 胡国成关键词:血铅 儿童 铅中毒 核仁素表达下调对C_2C_(12) 细胞增殖与凋亡的影响 被引量:7 2005年 目的:探讨核仁素反义寡核苷酸对细胞增殖与凋亡的影响。方法:采用反义寡核苷酸技术以抑制CC12细胞中核仁素的表达后,用MTT法检测细胞增殖状况,流式细胞术及DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡。结果:免疫印迹结果显示,反义寡核苷酸导入细胞后24h,核仁素的表达受到明显抑制,同时反义寡核苷酸处理组细胞的增殖能力亦明显受到抑制,细胞凋亡百分率显著升高,并能检测到清晰的“梯状条带”。而正义及随机核酸导入细胞后不能降低核仁素的表达,对细胞增殖及凋亡均无明显影响。结论:核仁素表达下调能抑制C2C12细胞增殖并能触发C2C12细胞凋亡。 王慷慨 蒋磊 鄂顺梅 刘可 张玲莉 刘梅冬 肖献忠关键词:表达下调 核仁素 反义寡核苷酸技术 MTT法检测 凝胶电泳检测 组细胞