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一种新型戊型肝炎病毒样颗粒的表达、纯化及其免疫原性被引量：18: 2006年; 目的：以非包涵体形式表达含戊型肝炎病毒（HEV）中和抗原表位的新型HEV重组蛋白,并对其进行鉴定和分析.方法：将HEV开放阅读框架2（ORF2）编码452～617位氨基酸的基因片段连接到载体pET28a（＋）,转化大肠杆菌,获取表达克隆.以Ni-NTA层析柱纯化表达的蛋白,并用SDS-PAGE、Western blot和直接电镜负染等方法分析鉴定,最后免疫小鼠检测特异性抗体的产生水平.结果：表达的重组蛋白天然可溶,相对分子质量（Mr）约为22 000,并可形成直径为20 nm左右的病毒样颗粒,能与戊型肝炎患者血清发生Westem blot阳性反应,免疫小鼠后可诱导产生高滴度的特异性抗体.体外中和试验显示产生的抗体具有中和HEV的活性.结论：原核表达的、含HEV中和抗原表位的、长度仅166个氨基酸的HEV ORF2近3＇端编码蛋白能够形成病毒样颗粒,而且该新型病毒样颗粒具有良好的抗原性和免疫原性.; 董晨孟继鸿; 关键词：戊型肝炎病毒重组蛋白病毒样颗粒

PPARG激活子联合SIRPα抗体在制备肿瘤免疫药物中的应用: 本发明涉及肿瘤免疫治疗领域，具体涉及PPARG激活子联合SIRPα抗体在制备肿瘤免疫药物中的应用。本发明提供了一种PPARG激活子联合抗体药物SIRPα在肿瘤免疫治疗药物中的新用途。本发明通过大量实验证实PPARG激活子...; 侯永忠董晨苟倩史娟娟; 文献传递

丙型肝炎病毒不同编码区His融合抗原的表达与纯化: 2008年; 目的:表达和纯化丙型肝炎病毒(HCV)-Core、NS3和NS4的His融合抗原H-C、H-NS3和H-NS4,并初步探讨其在抗体检测中的应用。方法:用重组基因工程技术,构建3种重组质粒C-pET-28a-c(+)、NS3-pET-28a-c(+)和NS4-pET-28a-c(+)以及相应的工程菌;质粒经双酶切、PCR和测序鉴定正确后,IPTG诱导抗原表达,从IPTG使用浓度、诱导温度与时间3个方面优化抗原表达条件;用NTA柱纯化抗原后,分别用单片段重组抗原和混合抗原以酶联免疫吸附试验(ELISA)检测100份HCV抗体阳性血清和40份健康人血清。结果:用单片段重组抗原和混合抗原检测的100份HCV抗体阳性血清中,H-C、H-NS3和H-NS4的抗体阳性率分别为91%、75%和52%,而H-C、H-NS3和H-NS4混合抗原的抗体检出率为100%;检测40份健康人血清,结果全部为阴性。结论:HCV不同编码区单片段His融合抗原具有不同的抗体检出率,但均低于混合抗原的阳性率;在开发HCV抗体诊断试剂时,应采用HCV混合抗原。; 韩振格乔伟振张敏孙艳雯董晨孟继鸿; 关键词：丙型肝炎病毒

乙型肝炎－戊型肝炎联合疫苗及其制备方法: 本发明公开了一种乙型肝炎－戊型肝炎联合疫苗(乙－戊肝联合疫苗)，包括戊型肝炎病毒(HEV)重组蛋白以及重组乙型肝炎病毒表面抗原(重组HBsAg)，所说的重组HBsAg含量为50－500μg/ml，HEV重组蛋白的含量为5...; 孟继鸿戴星董晨张敏; 文献传递

用不同基因型戊型肝炎病毒重组蛋白建立酶联免疫吸附测定一步法被引量：3: 2009年; 目的以7种不同基因型和亚型的HEV重组蛋白作为包被抗原，建立HEV抗体检测EuSA一步法。方法通过方阵滴定法确定包被抗原浓度，确定临界值，并进行敏感度、特异度和热稳定性试验。结果7种重组抗原混合物（Mix166）最佳包被浓度为1．5mg／L。抗-HEV IgG检测试剂的批内、批间变异系数分别为8．67％和10．85％，抗一HEV IgM检测试剂的批内、批间变异系数分别为4．56％和5．99％。一步法检测50份HEV RNA阳性血清的HEV IgG和HEV IgM抗体，阳性率均为94％。一步法检测674份健康者血清，52份抗-HEVIgG阳性．3份抗HEV IgM阳性。一步法检测HEV墨西哥株攻击黑猩猩后收集的系列血清发现，病毒攻击后1～6周抗-HEVIgM阳性，2～76周抗-HEV IgG阳性，而进口试剂盒缺乏对抗-HEV墨西哥株IgG、IgM的反应性。结论Mix166作为包被抗原建立的HEV抗体ELISA一步法具有较好的敏感性和特异性，可用于HEV感染的诊断。; 周镇先丁福董晨龚希平耿全林孟继鸿; 关键词：酶联免疫吸附测定基因型

一种重组戊型肝炎病毒蛋白、其制备方法及用途: 本发明提供一种方便易行、低成本并具有良好的抗原性和免疫原性的重组戊型肝炎病毒蛋白、其编码序列及用途。目前用于制备重组戊肝疫苗的HEV毒株均为第1基因型，而HEV p179是基于我国目前广泛流行的第4基因型HEV毒株制备，...; 孟继鸿戴星董晨; 文献传递

甲型肝炎-戊型肝炎联合疫苗的基础研究: 甲型肝炎(甲肝)和戊型肝炎(戊肝)同属经粪、口途径传播的急性病毒性肝炎，分别为甲型肝炎病毒(HAV)和戊型肝炎病毒(HEV)感染所致。HAV是一种无包膜的正链RNA病毒，主要感染儿童，其病情严重程度随年龄的增加而加重。H...; 董晨; 关键词：甲型肝炎戊型肝炎联合疫苗病毒样颗粒; 文献传递

新分离的两株EV71病毒基因特征分析被引量：3: 2009年; 目的:了解安徽马鞍山市肠道病毒71型(EV71)基因型的分布状况。方法:利用逆转录半巢式PCR(RT-nPCR)的方法检测马鞍山地区40份临床诊断为手足口病患儿的血清和咽拭子标本。结果:40份标本中检测到2份阳性EV71 RNA,检出率为5%;经过测序证实2份标本均为EV71 C型。结论:马鞍山地区手足口病主要由C型EV71病毒引起;利用生物信息学软件对这2份标本的核苷酸同源性进行比较,发现C型EV71存在一定的变异。; 朱明郑锦绣程险峰董晨陈瑾詹圣伟; 关键词：EV71 RT-PCR 手足口病基因型

PPARα激活子联合PD-1抗体在制备肿瘤免疫治疗药物中的应用: 本发明涉及肿瘤免疫治疗领域，具体涉及PPARα激活子联合PD‑1抗体在制备肿瘤免疫治疗药物中的应用。本发明通过研究发现细胞过氧化物酶体增殖物激活受体α（PPARα）激活子能够降低PD‑L1蛋白水平进而增加PD‑1抗体的肿...; 侯永忠贾晓苟倩董晨史娟娟; 文献传递

兔戊型肝炎病毒ORF2编码蛋白的抗原表位分析: 2013年; 目的:研究新发现的兔戊型肝炎病毒(HEV)与所有已知基因型HEV抗原表位的异同,为阐明动物HEV的人畜共患特征及戊型肝炎的诊断提供依据。方法:制备兔HEV ORF2重组蛋白R166(aa452-617),并免疫BALB/c小鼠制备单克隆抗体(McAb);采用间接ELISA法及免疫印迹法,检测McAbs与已知基因型HEV ORF2重组蛋白p166Bur(1型)、p166Mex(2型)、p166US(3型)和p166Chn(4型)的交叉反应性。用获得的杂交瘤细胞制备腹水,利用基于PCR的HEV体外中和试验,检测它们对基因1、4型人HEV和兔HEV的中和活性。结果:获得3株稳定分泌抗-R166的McAbs的杂交瘤细胞株,即1C1、6F9和10D2。其中1C1和6F9分泌的McAbs与已知1、2、3、4基因型p166均结合;10D2分泌的McAb只与R166特异结合,而不与1、2、3、4基因型p166结合。3株McAbs腹水均不能中和基因1、4型人HEV和兔HEV,提示3株McAbs针对非中和性抗原表位。结论:兔HEV与已知1、2、3、4基因型HEV既含有共同的抗原表位,也含有不同的抗原表位,具有不同的抗原特征。; 王松戴星董晨董敏梁久红孟继鸿; 关键词：抗原表位单克隆抗体

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董晨