方方
- 作品数:2 被引量:6H指数:1
- 供职机构:新乡医学院更多>>
- 发文基金:河南省重大公益性科研项目国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- 液压转基因技术应用于大鼠肝脏转基因实验被引量:6
- 2009年
- 目的探讨液压转基因技术(HDT)应用于大鼠肝脏转基因的条件、方法。方法以不同速度从大鼠尾静脉注射不同体积、浓度的含绿色荧光蛋白基因质粒pEGFP—C1,于注射后不同时间取大鼠(各4只)各肝叶制备玲冻切片,在波长488nm的荧光显微镜下观察、计数各肝叶的绿色荧光蛋白表达情况。结果在一次性注射浓度为30mg/L质粒、注射速度为2ml/s、注射体积为大鼠体重9%的条件下,注射pEGFP-C1质粒后6h,绿色荧光蛋白阳性细胞比例最高,占肝脏总细胞的20%以上,从24h起绿色荧光蛋白的表达量逐渐减少,至72h时各肝叶均基本难以检出绿色荧光蛋白阳性细胞。在上述最佳条件下,绿色荧光蛋白在各肝叶的表达情况是:蒂状叶的绿色荧光蛋白阳性细胞约为30%,左叶、中叶、右叶约为20%,尾状叶约为10%。结论液压转基因技术可应用于大鼠肝脏转基因,其适宜条件是:质粒溶液的浓度为30mg/L,注射量为大鼠体重的9%,注射速度为2ml/s,观察转染率的适宜时间是转基因后6~24h。
- 徐存拴邢雪琨谢来峰张明方方崔胜男王磊张富春
- 关键词:肝脏绿色荧光蛋白
- 大鼠8种肝脏细胞中缺血反应相关基因与肝再生的作用分析
- 2010年
- 为了解8种肝脏细胞的缺血反应相关基因与大鼠肝再生的相关性,用percol密度梯度离心和免疫磁珠方法分离大鼠部分肝切除后不同时间(0,2,6,12,24,30,3672,120和168h)再生肝中的8种细胞,用Rat Genome 2302.0芯片等方法检测上述8种细胞的缺血反应相关基因在大鼠肝再生中表达变化,用生物学和系统生物学等方法分析上述基因与大鼠肝再生的相关性.结果显示,缺血反应主要在肝再生启动阶段及进展阶段前期发挥作用,且上调占优势,可刺激il6,tnf等肝再生关键基因表达;肝星形细胞、树突状细胞中的缺血反应相关基因具有表达的相似性.缺血反应能推动肝再生的顺利进行,但胆管上皮细胞的基因表达情况特殊,值得进一步研究.
- 方方徐存拴
- 关键词:肝再生部分肝切除RATGENOME