李秀梅
- 作品数：23 被引量：32H指数：3
- 供职机构：中国人民解放军更多>>
- 发文基金：广州市科技攻关项目广东省科技计划工业攻关项目广州市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- HBV蛋白在乙肝转基因小鼠中的表达研究
- 目的:研究已传20代的HBV转基因小鼠血清和组织中HBV蛋白的表达情况.方法:采用血清ELISA检测和免疫组化的方法研究HBV病毒蛋白在转基因小鼠血清和肝脏组织的表达情况.结果:转基因小鼠血清HBsAg表达量在853.2...
- 黄黎珍刘光泽李秀梅胡莲美顾为望
- 关键词：小鼠HBV转基因
- 文献传递
- HBV转基因小鼠尿液中乙肝病毒相关指标的分析被引量：2
- 2016年
- 目的检测分析HBV转基因小鼠尿液中HBV相关指标表达情况,进一步认识转基因小鼠的生物学特性;并通过多种实验方法确定尿液中HBV相关指标的组织来源。方法使用酶联免疫吸附法（ELISA）和荧光定量PCR（real-time PCR）检测转基因小鼠尿液中HBV相关指标;并通过水动力转染的小鼠实验、RNA干扰方法抑制HBV表达转基因鼠实验、乙肝患者HBV阳性血清感染正常小鼠实验等多种实验方法确定其复制表达组织来源。结果 HBV转基因小鼠尿液中存在HBsAg、HBe Ag、及HBV-DNA表达,其中HBsAg的表达水平较高（6674±619.8 IU/m L）,但低于血清中HBsAg的表达水平（16470±2704 IU/m L）,尿液HBsAg雄性小鼠的表达水平高于雌性小鼠;而尿液HBe Ag表达水平较低,且尿液中HBe Ag的阳性率高于血液,HBe Ag的表达水平个体间和性别间有明显差异;尿液中存在HBV-DNA含量达到10~3~10~5copy/m L;未检测到相关抗体表达。通过水动力转染等实验表明转基因鼠尿液中的HBV相关指标来源于肾脏的复制表达,而不是由肝脏分泌进入血液循环以尿液排出,肾脏是HBV独立的表达场所。结论转基因小鼠尿液中存在HBV相关指标的表达,并随月龄长期表达,其中HBsAg及HBV-DNA表达水平较高且比较稳定,雄性小鼠尿液HBsAg的滴度高于雌性小鼠;HBe Ag雄性鼠表达水平相对雌性鼠较高且比较稳定;尿液中无各类抗体表达;肾脏也是HBV独立的复制表达场所。
- 杨阳刘光泽李秀梅孔祥平顾为望
- 关键词：转基因小鼠尿液生物学特性
- C基因型HBV转基因小鼠的制备被引量：3
- 2008年
- 目的:建立C型HBV转基因小鼠,为乙肝防治研究提供实验动物模型.方法:采用受精卵显微注射法,制备HBV转基因小鼠,用PCR,ELISA,荧光定量PCR和免疫组化的方法研究HBV基因在转基因小鼠体内的整合、复制和表达情况.结果:注射受精卵2840枚,筛选注射后成活的受精卵共2256枚,注射成活率79.4%.注射后受精卵共移植假孕雌鼠85只,其中有42只怀孕,假孕雌鼠妊娠率49%,共产下F0代小鼠168只,PCR检测共有14只小鼠阳性,其中ELISA检测血清HBsAg阳性5只,HBeAg均阴性.荧光定量PCR血清HBV DNA显示,2只小鼠的拷贝数分别为3.12×105copies/L,1.98×105copies/L,经传代产下F1代小鼠61只,PCR检测HBV DNA阳性5只,ELISA检测HBsAg阳性4只,其中肝脏HBsAg免疫组化阳性2只,HBcAg均阴性,且肝组织表达HB-sAg为胞浆型.结论:构建的C型HBV基因不但可以在转基因小鼠体内进行复制表达,而且可以遗传给下一代小鼠.
- 尤玉琴黄黎珍刘光泽佟明华李秀梅胡莲美顾为望孔祥平
- 关键词：血清DNA
- 1.3拷贝C基因型HBV转基因小鼠的构建方法
- 本发明提供了一种1.3拷贝C基因型HBV转基因小鼠的构建方法。所述方法是通过囊胚注射ES细胞制备定点整合1.3拷贝C基因型乙型肝炎病毒（HepatitisBvirus，HBV）转基因小鼠。首先构建定点整合1.3拷贝C型H...
- 刘光泽陈媚娟李秀梅谢勇张振伟孔祥平
- 文献传递
- 慢病毒载体介导的绿色荧光蛋白转基因小鼠的制备
- 目的：以携带绿色荧光蛋白(green fluorescentprotein,GFP)的慢病毒为载体,制备转基因小鼠,建立慢病毒介导的转基因动物制备技术平台。方法：慢病毒表达载体FLJGW与ViraPowerTM Lent...
- 孔祥平李秀梅刘光泽
- 关键词：慢病毒载体转基因动物绿色荧光蛋白
- 高复制HBV转基因小鼠模型对抗乙型肝炎病毒药物的效应研究被引量：8
- 2007年
- 目的:研究高复制HBV转基因小鼠模型对抗乙肝病毒药物的效应评价。方法:选用抗乙肝药物拉咪呋啶、大剂量重组乙肝蛋白疫苗、α-1b型干扰素和RNA干扰在转基因小鼠进行药效及作用机制评价。结果:拉咪呋啶、重组乙肝疫苗、α-1b型干扰素均可使HBV转基因小鼠血清中HBV DNA滴度显著降低。其中后两者还可提高机体脾细胞IL-2和IFN-γ的水平及使分泌IFN-γ脾细胞Elispot斑点数明显增加。将RNA干扰表达载体pU6-siHBV质粒尾静脉注入小鼠体内。注射后5d血清HBsAg下降56.7%,抑制作用持续14d。肝脏免疫组化显示HBcAg阳性细胞明显减少,但血清HBV DNA定量无明显降低。结论:本近交系高复制HBV转基因小鼠模型对抗乙肝药物药效学评估是可靠、可行的。
- 刘光泽孔祥平任向荣李秀梅胡莲美黄黎珍顾为望
- 关键词：HBV转基因小鼠乙型干扰素Α
- 肌肽在抗肝炎病毒方面的应用
- 本发明公开了肌肽在抗肝炎病毒方面的应用。本发明首次研究发现，肌肽对肝炎病毒具有显著的抗病毒活性，能够抑制肝炎病毒的复制及其表面抗原的分泌表达，可用于抗肝炎病毒药物，对肝炎病毒的防治具有重要的意义。同时，肌肽作为天然物质性...
- 张振伟杨富强刘光泽欧阳石李秀梅
- 文献传递
- 1．3拷贝C基因型HBV转基因小鼠的构建方法
- 本发明提供了一种1.3拷贝C基因型HBV转基因小鼠的构建方法。所述方法是通过囊胚注射ES细胞制备定点整合1.3拷贝C基因型乙型肝炎病毒（Hepatitis B virus，HBV）转基因小鼠。首先构建定点整合1.3拷贝C...
- 刘光泽陈媚娟李秀梅谢勇张振伟孔祥平
- 文献传递
- 抗乙型肝炎病毒药物转基因小鼠模型药效评价技术平台建设
- 孔祥平刘光泽易学瑞佟明华陈文吟李秀梅胡莲美吴庆洲罗显荣
- 经不同整合位点乙肝病毒转基因小鼠双杂交以增加转基因小鼠目的基因拷贝数和整合位点，进一步提高了转基因小鼠HBV的复制表达水平和阳性率，已稳定传至23代。建立了先进、全面、系统抗乙型肝炎病毒药物评价体系，并应用于多种抗乙肝病...
- 关键词：
- 关键词：抗乙型肝炎病毒药物药效评价实验动物模型
- HBV转基因小鼠尿液中乙肝病毒相关指标的分析
- 目的 检测分析HBV转基因小鼠尿液中HBV相关指标表达情况,进一步认识转基因小鼠的生物学特性;并通过多种实验方法确定尿液中HBV相关指标的组织来源.方法 使用酶联免疫吸附法(ELISA)和荧光定量PCR (Real-ti...
- 杨阳刘光泽李秀梅孔祥平顾为望
- 关键词：转基因小鼠尿液生物学特性
