郑惠文
- 作品数：49 被引量：116H指数：7
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项“重大新药创制”科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学历史地理更多>>
- 结核分枝杆菌在不同pH值液体培养基中对吡嗪酰胺敏感度的研究被引量：7
- 2017年
- 目的研究结核分枝杆菌在不同pH值液体培养基中对吡嗪酰胺（PzA）敏感度的影响，同时比较不同pH值下结核分枝杆菌对吡嗪酰胺的敏感度与测序结果的一致率，探讨最适合对吡嗪酰胺进行药物敏感性试验（简称“药敏试验”）的pH值。方法本研究采用简单随机抽样法中的直接抽选法，从2007年全国结核病耐药性基线调查的3929株结核分枝杆菌菌株中抽取348株；采用BACTECMGIT960系统在液体培养基pH值为5．3、5．5、5．7、5．9和6．1时，分别检测结核分枝杆菌对吡嗪酰胺的敏感度；同时对吡嗪酰胺耐药的结核分枝杆菌相关基因pncA和rpsA进行测序，分析其突变特征；采用卡方检验统计2种方法检测吡嗪酰胺耐药率的差别，以P〈0．05为差异有统计学意义。结果在348株结核分枝杆菌中，用MGITTM960PZA试剂盒（pH值为5．9）检测的吡嗪酰胺总耐药率为14．4％（50／348），DNA测序结果有43株耐药，其中有30（69．8％）株检测到吡嗪酰胺药物耐药相关基因加矾发生突变，1株（2．3％）耐药分离株仅在rpsA有突变。在液体培养基pH值为6．1、5．9、5．7、5．5和5．3时，DNA测序结果与所有菌株表型药敏试验结果的一致率分别为94．8％（330／348）、95．1％（331／348）、96．8％（337／348）、95．2％（316／332）和93．5％（287／307）。并且pH值为5．7时2种方法的耐药一致率（92．1％，35／38）明显高于pH值为5．9（76．0％，38／50）时（χ2=3．961，P=0．047）；而pH值为6．1（72．7％，40／55）、pH值为5．5（93．3％，28／30）和pH值为5．3（95．0％，19／20）时的耐药一致率与pH值为5．9时的耐药一致率相比，差异无统计学意义（χ2=0．147，P=0．702；χ2=．366，P=0．545；χ2=410，P=0．065）。结论液体培养基pH值为5．7时，结核分枝杆菌对吡嗪酰胺耐药与遗传突变检测结果有较好的相关性。
- 逢宇赵雁林郑惠文
- 关键词：分枝杆菌吡嗪酰胺培养基DNA突变分析
- IL-6对小鼠呼吸系统趋化因子表达谱及免疫细胞组成的影响被引量：1
- 2020年
- 目的探究IL-6对呼吸系统趋化因子表达谱及免疫细胞组成的影响。方法通过real-time PCR对IL-6敲除小鼠的上呼吸道鼻黏膜和下呼吸道肺组织中56种趋化因子及受体的表达谱进行芯片分析,利用流式细胞术对上下呼吸道中免疫细胞组成进行分析;再使用IL-6蛋白对野生型小鼠进行滴鼻处理,检测鼻黏膜和肺组织内趋化因子表达谱和免疫细胞组成的改变。结果IL-6敲除后小鼠肺组织CXCL5表达显著降低,鼻黏膜中T细胞占比升高,肺组织中肺泡巨噬细胞和CD4^+T细胞占比均降低;IL-6滴鼻后鼻黏膜中CCL3、CXCL2和CXCL3的表达显著升高,肺组织中总白细胞占比显著减少,除中性粒细胞占比增加外,其它免疫细胞均有减少。结论降低或升高IL-6水平均可导致呼吸系统内多种趋化因子表达以及免疫细胞组成发生改变,提示IL-6可调节呼吸系统免疫,尤其是中性粒细胞的免疫反应。
- 杨谨溪范琪琪李楠郑惠文李恒杨泽宁陈燕丽候东佩郭磊刘龙丁
- 关键词：白细胞介素-6趋化因子趋化因子受体中性粒细胞
- 肠道病毒-D68的研究进展
- 2017年
- 肠道病毒(enterovirus,EV)-D68可引起呼吸道系统感染,严重者会诱发肺炎及脑脊髓炎而死亡。自1962年首次报道以来,EV-D68已在全球范围内流行。2002年,中国也有感染病例出现。2014年,EV-D68在加拿大及美国等地发生大规模流行,给全球公共卫生带来重大威胁。本文对EV-D68的相关研究进展作一综述。
- 郑惠文孙明刘龙丁
- 关键词：急性呼吸道感染急性迟缓性麻痹
- 肠道病毒多抗原表位融合蛋白、基因、疫苗及其制备方法
- 本发明涉及疫苗制备技术领域，尤其涉及肠道病毒多抗原表位融合蛋白、基因、疫苗及其制备方法。本发明提供了一种肠道病毒多抗原表位融合蛋白，所述肠道病毒多抗原表位融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO：4所示。本发明疫苗采用基...
- 刘龙丁郑惠文李恒赵鑫于丽蒋国润李丹丹赵恒张莹廖芸施海晶
- 中国结核病耐药监测现状与监测体系建设被引量：16
- 2015年
- 抗生素耐药性问题严重威胁基本医疗保健和医学的发展,随着全球化进程的加快,旅游和食品贸易增加,微生物耐药性这个问题更加突显。中国结核分枝杆菌耐药率、耐多药率等处于较高水平,耐多药结核病防治问题在中国的结核病控制工作中显得日趋重要。耐药监测是评价国家结核病控制规划的重要对策之一。监测系统能够为结核病控制规划执行情况和改变现行治疗方针的必要性的评价提供有用的指标,以及确定引起耐药的危险因素。
- 郑惠文赵雁林
- 关键词：结核病药物耐受性
- HSV-1即刻早期基因的5′UTR对报告基因mRNA翻译的影响
- 2024年
- mRNA疫苗的5′非翻译区(5’untranslated regions,5′UTR)对其表达起着重要作用,报告基因增强绿色荧光蛋白基因(enhanced green fluorescent protein,EGFP)用于检测5′UTR调控mRNA表达已经是一个较为成熟的实验方法.为研究单纯疱疹病毒1型(herpes simplex virus 1,HSV-1)即刻早期基因的5′UTR作为报告基因EGFP mRNA的5′UTR对其翻译的影响,本研究将4个即刻早期基因的5’UTR以及表达能力较强的人β珠蛋白基因(humanβGlobin,hBg)5′UTR插入报告基因EGFP 5’端,通过观察绿色荧光强度研究不同即刻早期基因5′UTR对mRNA翻译的影响.结果表明:经mRNA转染试剂和纳米脂质体颗粒分别递送进293T细胞和小鼠体内;RL2的5′UTR作为报告基因EGFP 5′UTR的表达水平与hBg 5′UTR相近,RS1、US1、US12表达水平明显弱于hBg 5′UTR.因此,RL2基因的5′UTR有潜力作为mRNA疫苗的5′UTR.
- 徐朗希李丹丹李恒郑惠文彭沙沙彭沙沙张莹廖芸廖芸刘龙丁
- 关键词：单纯疱疹病毒1型蛋白表达水平
- 肠道病毒71型与乙型肝炎病毒联合疫苗免疫原性的初步评价被引量：9
- 2015年
- 目的初步评价肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)与乙型肝炎(简称乙肝)病毒(hepatitis B,HBV)联合疫苗中两种抗原之间的相互作用及其免疫小鼠诱导的特异性免疫应答水平。方法将EV71灭活疫苗抗原和重组HBV疫苗抗原(HBs Ag)按常规剂量,采用直接吸附法吸附Al(OH)3佐剂,配制成EV71-HBV联合疫苗,并设单苗组、佐剂对照组和空白对照组(PBS),分别于0、28 d各经腓肠肌免疫BALB/c小鼠1次,于初免后第2、4周和第2剂免疫后第2、4、8周经尾动脉采血,分离血清,采用双抗体夹心ELISA法检测血清中Anti-HBs水平,微量中和试验检测血清中EV71中和抗体效价;并于初免后第3、4周和第2剂免疫后第1、2、4周取小鼠脾脏,分离脾单个核细胞(mononuclear cell,MNC),采用酶联免疫斑点试验(enzyme-linked immunospot assay,ELISPOT)检测MNC中抗原特异性IFNγ的分泌水平。结果第2剂免疫后第2周,各疫苗组小鼠血清EV71中和抗体和Anti-HBs阳转率均达100%,各检测时间点疫苗组间抗体效价差异均无统计学意义(P>0.05),佐剂对照组和空白对照组抗体均无阳转。各疫苗组分泌IFNγ的斑点形成细胞(spot forming cell,SFC)数在5个检测时间点有所波动,第2剂免疫后第1周,所有疫苗组IFNγ分泌水平均明显升高,达5个检测时间点的峰值,第2剂免疫后第2周显著下降,但在第2剂免疫后第4周又小幅升高;除第2剂免疫后第2周EV71-HBV联合疫苗组SFC数显著高于EV71单苗组外(P<0.05),其他检测时间点EV71-HBV联合疫苗组与单苗组的SFC数差异均无统计学意义(P>0.05);佐剂对照组和空白对照组的ELISPOT检测结果均为阴性。结论一定剂量的EV71和HBV联合疫苗可诱导小鼠产生良好的体液免疫和细胞免疫应答,两种抗原间未发现相互作用。
- 陈梦娇杨晓蕾刘龙丁郑惠文罗娜尹晓晓李洪哲邓燕李在晗孙明波杨净思
- 关键词：肠道病毒71型乙型肝炎病毒联合疫苗体液免疫细胞免疫
- 一种抗EV-D68病毒的单克隆抗体及其制备和应用
- 本发明公开了一种抗EV‑D68病毒的单克隆抗体及其制备和应用。首次运用单个B细胞分离技术对EV‑D68病毒感染的恒河猴进行特异性单个记忆B细胞的分选，获得了配对的抗体轻重链基因，并进一步筛选得到具有中和活性的EV‑D68...
- 刘龙丁孙明郑惠文郭磊王晶晶李冰香李恒杨泽宁李洪哲范海涛储曼曼黄星李楠杨瑾溪吴琼雯
- 文献传递
- 细胞自噬对甲型流感病毒H1 N1感染A549细胞过程中病毒复制及Ⅰ型干扰素表达的影响被引量：3
- 2017年
- 目的 通过研究细胞自噬在甲型流感病毒H1 N1感染细胞过程中对病毒复制及Ⅰ型干扰素表达的影响,为进一步阐明流感病毒感染机制提供实验资料.方法 利用自噬抑制剂三甲基腺嘌呤（3-methyladenine,3-MA）抑制细胞自噬,流式细胞术检测3-MA对细胞凋亡的影响,激光共聚焦显微镜观察H1N1感染A549细胞后的自噬现象,利用real-time PCR检测自噬被抑制前后病毒拷贝数的变化以及Ⅰ型干扰素（typeⅠinterferon,IFN-Ⅰ）产生通路各基因mRNA表达量的变化.分析细胞自噬对病毒复制及干扰素表达的影响.结果 当H1N1感染A549细胞后可诱导细胞产生不完全自噬,导致自噬体积累.当自噬被3-MA抑制后,TLR3-TLR7-MyD88-IRF7-IFN-α/β信号通路各基因mRNA表达量上调,与此同时病毒拷贝数及血凝滴度下调.结论 H1N1可能通过诱导不完全自噬逃逸了机体的抗病毒固有免疫应答,促进了自身复制和存活.
- 李嘉祺胡雅洁宋杰李洪哲王晶晶郭磊郑惠文宁若彤范海涛杨泽宁刘龙丁
- 关键词：细胞自噬甲型流感病毒
- 一种检测血清中抗EV‑D68病毒抗体的方法
- 本发明公开了一种检测血清中抗EV‑D68病毒抗体的方法。提取EV‑D68病毒基因组RNA，通过反转录和PCR扩增反应得到VP1基因的cDNA，将其克隆到克隆载体，再将转入表达载体得到重组表达质粒，转化宿主菌并用IPTG诱...
- 刘龙丁郑惠文孙明王晶晶郭磊李冰香龙海亭李洪哲范海涛杨泽宁储曼曼黄星
- 文献传递
