刘倩
- 作品数：6 被引量：12H指数：2
- 供职机构：天津科技大学生物工程学院更多>>
- 发文基金：“十一五”国家科技支撑计划国家科技重大专项国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程化学工程生物学更多>>
- pta基因敲除对L-色氨酸发酵的影响被引量：9
- 2011年
- 【目的】探究pta基因缺失对大肠杆菌发酵生产L-色氨酸的影响。【方法】运用Red重组技术敲除pta基因,构建pta缺失株E.coli TRTHΔpta。利用30 L发酵罐进行分批补料发酵试验,考察重组菌E.coliTRTHΔpta发酵生产L-色氨酸过程中生物量、L-色氨酸产量、有机酸含量、发酵液中NH 4+浓度及变化。建立了大肠杆菌合成L-色氨酸的代谢流平衡模型,应用MATLAB软件计算出E.coli TRTH及其pta缺失株发酵中后期代谢网络的代谢流分布。【结果】发酵结果显示,pta缺失株能够以较长时间和较高比生长速率保持对数生长,最终菌体生物量和L-色氨酸产量分别提高了52.7%和46.8%。有机酸含量分析结果表明,pta缺失株乙酸含量显著降低,只有2.5 g/L,仅为亲株的19.5%;丙酮酸和乳酸的含量有一定增加。多参数分析结果显示,pta缺失株发酵过程中NH 4+浓度较亲株降低33.2%。pta缺失株发酵生产L-色氨酸的代谢流量分析结果表明,EMP途径的代谢流量降低7.4%,PP途径的代谢流量增加8.4%,TCA循环的代谢流量降低32.2%。【结论】pta基因的缺失导致在发酵生产L-色氨酸过程中代谢流发生变化,乙酸含量的显著降低解除了乙酸对菌体生长和产物生成的抑制,使得菌体生物量和L-色氨酸产量大幅提高。
- 黄静史建明刘倩徐庆阳谢希贤温廷益陈宁
- 关键词：基因敲除乙酸L-色氨酸
- 组氨酸产生菌的诱变育种及筛选方法
- 在工业生产中,谷氨酸棒杆菌已经广泛用于氨基酸的生产.通过传统诱变来直接解除相应通路的调控,从而增加茵株的氨基酸产量,这在工业生产中发挥着重要的作用.用诱变的方法,筛选结构类似物抗性,能够解除终产物对菌株通路的抑制.本研究...
- 程永松刘倩卢利宁徐庆阳谢希贤陈宁
- 关键词：L-组氨酸发酵工艺诱变育种
- 文献传递
- L-色氨酸生产菌质粒稳定性工艺研究被引量：2
- 2011年
- 从工程应用的角度研究L-色氨酸生产菌E.coliTRJH的质粒稳定性,采用30L自动控制发酵罐观察选择压力、温度、溶氧、酵母抽提物和葡萄糖浓度等条件对质粒稳定性的影响。结果表明,该菌具有分裂不稳定性,上述培养条件的变化均会对该菌的质粒稳定性产生较大影响。
- 黄静程立坤刘倩徐庆阳谢希贤陈宁
- 关键词：L-色氨酸发酵质粒稳定性
- 大肠杆菌L-组氨酸生物合成途径的改造及其对工程菌L-组氨酸产量的影响被引量：1
- 2011年
- 改造大肠杆菌L–组氨酸生物合成途径,以提高L–组氨酸的产量.用NTG诱变大肠杆菌M-17(SGr),依次赋予其2–噻唑丙氨酸(2-TA)和组氨酸氧肟酸盐(HisHx)遗传标记,再以突变株M-18(SGr+2-TAr+HisHxr)基因组为模板,扩增组氨酸操纵子基因,构建出重组质粒pUC118-his-operon,将重组质粒导入突变株M-18(SGr+2-TAr+HisHxr)得到工程菌E.coli M-19(SGr+2-TAr+HisHxr/pUC118-his-operon).根据zwf和prs基因序列分别合成引物进行PCR扩增,PCR产物与载体pSTV28连接,构建重组质粒pSTV28-zwf、pSTV28-prs和pSTV28-zwf-prs,将重组质粒分别转化至工程菌E.coli M-19,摇瓶发酵测定重组工程菌L–组氨酸的产量.摇瓶发酵结果显示,L–组氨酸产量与对照株相比,工程菌E.coli M-19提高了4.5倍,双质粒系统重组工程菌E.coli MZH-19、E.coli MPH-19和E.coli MZPH-19分别提高了5.14、5.78、8.43倍.
- 魏伟刘倩卢利宁谢希贤
- 关键词：L-组氨酸大肠杆菌摇瓶发酵
- 用Red重组系统快速敲除大肠杆菌trpE基因
- 本实验应用Red重组系统成功构建trpE缺失的大肠杆菌E.coli TRJH0709△pat色氨酸缺陷菌株.主要运用质粒pKD46系统将大肠杆菌E.coli TRJH0709 △pat染色体上色氨酸操纵子的trpE基因以...
- 刘倩魏伟徐庆阳谢希贤
- 关键词：色氨酸大肠杆菌RED重组系统菌株筛选
- 反相高效液相色谱法测定L-色氨酸发酵液中的有机酸
- 建立了一种利用反相高效液相色谱法同时测定L-色氨酸发酵液中8种有机酸的万法.应用Agilent C18 (5μ,150×4.6(mm))色谱柱,以0.05mol/L NH4H2PO4(H3PO4调节PH至2.6...
- 黄静刘倩史建明徐庆阳谢希贤
- 关键词：有机酸反相高效液相色谱法
