潘美辉
- 作品数：9 被引量：49H指数：4
- 供职机构：中国协和医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 人胎脑mRNA的差异显示分析及脑表达新ESTs的分离被引量：6
- 1997年
- 应用mRNA差异显示技术分析人胎脑组织不同发育阶段及不同部位基因表达的差异并研究其特异表达的基因。以3个锚定引物Oligo（dT）12M（M=A，G，C）及20个随机引物，对脑组织mRNA进行了近50次差异显示分析，共分离出上百个差示产物。对其中部分产物进行克隆、测序获得了39个CDNA序列，长度为100～500bp。其中34个已被Genbank接受并给予新序列编号。
- 潘美辉袁建刚陈斌周彦方鸣武梁植权强伯勤
- 关键词：PCR人胎脑表达序列标签
- 人脑新EST的分离及其表达特异性分析
- 1998年
- 为了解脑发育和分化的机制 ,利用差异显示技术从 1 3和 33周的胎儿脑中分离到 90个EST .比较GenBank以后发现其中的 74个EST代表新的基因 ,当中的一些与某些脑发育相关的基因同源 .将来自差异显示的 79个EST固定在膜上 。
- 潘美辉袁建刚杜光伟周彦姚辉强伯勤
- 关键词：分化胎儿基因差异表达EST
- 差异显示反转录PCR技术的建立和改进被引量：10
- 1996年
- 本文对差异显示反转录ＰＣＲ（ＤＤＲＴ－ＰＣＲ）的一系列条件进行了探索和改进，建立了有效的ＤＤＲＴ－ＰＣＲ方法。特别是单锚定碱基引物Ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）＿（１２）Ｍ（Ｍ＝Ａ，Ｇ，Ｃ）的应用，不但得到了十分良好的实验结果，而且在很大程度上降低了实验成本和工作量。
- 陈斌袁建刚潘美辉俞耀庭强伯勤
- 关键词：聚合酶链反应
- Pax——一个发育相关的重要基因家族被引量：3
- 1997年
- Pax基因是进化上保守的一个基因家族,它们均编码128个氨基酸的保守成对结构域。Pax蛋白作为重要的转录调控因子,在胚胎发育过程中对组织、器官的特化起重要的调控作用。Pax基因发生突变会导致几种遗传综合症。另外,Pax基因的表达异常与一些癌变也有一定关系。
- 潘美辉袁建刚
- 关键词：转录调控因子癌基因
- 一个新的人类硫氧化还原蛋白基因的克隆被引量：3
- 1999年
- 根据不同发育阶段 ( 1 3,33周 )的人胎脑组织mRNA差异显示分析 (又称DDRT PCR)所得到的具有差异表达的EST的序列 ,设计引物筛选点阵排列的人胎脑cDNA文库 ,得到一个新的全长cDNA克隆 .这个克隆全长 1 2 0 8bp ,包含一个 889bp的开放阅读框 ,一个 1 32bp的 5′非翻译序列和一个 2 0 9bp的 3′非翻译序列以及典型的polyA加尾信号 .其推断的氨基酸序列与人硫氧化还原蛋白同源 ,而且含有硫氧化还原蛋白的保守的活性位点序列 .将它命名为人的类硫氧化还原蛋白基因 (humanthioredoxinlikegene ,hTRXL) .
- 周彦潘美辉袁建刚杜光伟强伯勤
- 关键词：胎脑基因克隆
- 基因差异表达的研究方法被引量：18
- 1997年
- 基因差异表达的研究方法△潘美辉金虎林袁建刚强伯勤（中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室，北京，１００００５）ＡｂｓｔｒａｃｔＤｉｆｅｒｅｎｔｉａｌｇｅｎｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｓｃｌｏｓｅｌｙｒｅｌａｔｅ...
- 潘美辉金虎林袁建刚强伯勤
- 关键词：基因差异表达研究方法分子生物学
- 一种从琼脂糠凝胶中分离DNA的快速方法被引量：4
- 1997年
- 本文介绍一种冷冻挤压离心法从琼脂糖凝胶中分离ＤＮＡ片段，适合从０．５％～１．８％的凝胶中分离几十到几万ｂｐ的不同ＤＮＡ，ＤＮＡ回收率与凝胶浓度、ＤＮＡ大小有关，介于２５％～８０％。本方法快速、简单、经济、重复性好，值得推广应用。
- 潘美辉杨文华袁建刚
- 关键词：琼脂凝胶电泳DNA分离
- 人和鼠GRY-RBP cDNA的克隆
- 1999年
- 通过筛选人胎儿脑cDNA文库 ,克隆了编码一个新的RNA结合蛋白的人cDNA ,命名为GRY RBP .人GRY RBPcDNA的长度为 2 932bp ,编码一个具 6 2 3个氨基酸 ,分子量为 6 9.6ku的RNA结合蛋白 .GRY RBP蛋白含有 3个RNA识别基序 (RNARecognitionmotifs,RRMs)和一个富含甘氨酸 (G)、精氨酸 (R)、酪氨酸 (Y)的羧基端 .经数据库比较发现该蛋白与许多RRMRNA结合蛋白有较高的相似性 .还以鼠脑cDNA文库为模板 ,利用PCR扩增了鼠GRY RBPcDNA的全编码区和部分非编码区 .Northern杂交发现人GRY RBP在所检测的 8种成人组织中都有表达 ,在心脏。
- 杜光伟潘美辉周严陈建和姚辉袁建刚强伯勤
- 关键词：CDNARNA结合蛋白克隆
- cDNA3′端代表差异显示分析被引量：5
- 1997年
- 根据真核ｍＲＮＡ３′端一般含Ｐｏｌｙ（Ａ）的原理，可使用共同引物将不同的ｍＲＮＡ反转录成ｃＤＮＡ，然后设计特殊引物进行反转录ＰＣＲ，或者将限制性酶切与反转录ＰＣＲ偶联使用，均可获得对应于ｍＲＮＡ３′端的ｃＤＮＡ３′端代表扩增子。比较不同条件下的ｃＤ－ＮＡ３′端代表扩增子，可以获得两种或多种细胞中ｍＲＮＡ的表达差异谱，并分离。
- 潘美辉金虎林袁建刚
- 关键词：DNA
