申崇标
- 作品数：12 被引量：31H指数：3
- 供职机构：重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：重庆市自然科学基金重庆市卫生局医学科研项目长江学者和创新团队发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 硝酸甘油对体外培养三叉神经节星形胶质细胞的损伤作用
- 2010年
- 目的:硝酸甘油(glyceryl trinitrate或nitroglycerin,GTN)对于体外培养的三叉神经节星形胶质细胞损伤作用,为偏头痛发病机制研究提供依据。方法:体外纯化培养大鼠三叉神经节星形胶质细胞,采用胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫荧光法鉴定。不同浓度的硝酸甘油作用于星形胶质细胞后,应用Alarm blue检测细胞活力,并筛选出可以影响细胞活力的适宜刺激的浓度;适宜刺激后用Fluo-3AM为细胞内钙离子荧光指示剂,激光共聚焦显微镜测定各组星型胶质细胞内钙离子浓度的变化;RT-PCR检测IL-1β、TNF-αmRNA表达。结果:GFAP免疫荧光法显示培养的星型胶质细胞阳性率达95%左右;0.55mmol/L、1.1mmol/L和2.2mmol/L三种浓度硝酸甘油刺激星型胶质细胞后活力明显降低(P<0.05),但从细胞活力和形态上观察0.55mmol/L硝酸甘油刺激最佳;0.55mmol/L硝酸甘油刺激后细胞内钙略降低,IL-1β、TNF-αmRNA表达增高(P<0.05)。结论:硝酸甘油对于体外培养的星型胶质细胞有明显的损伤作用,其机制可能与炎症因子相关。
- 崔智威曾照芳陈力学周冀英申崇标
- 关键词：硝酸甘油偏头痛星形胶质细胞IL-1Β
- 降钙素基因相关肽与偏头痛关系的研究被引量：11
- 2010年
- 偏头痛是临床上常见的多发性疾病,主要表现为一侧或双侧头部反复发作的搏动性疼痛,可伴有恶心、呕吐、视物异常等神经症状。关于偏头痛的发病机制研究尚无定论。偏头痛的发病机理一直受到人们的关注,近年来一些研究表明,偏头痛的发作与头颅血管周围组织产生的血管活性物质,特别是与三叉神经血管系统的降钙素基因相关肽(calcitonin gene-relatedpeptide,CGRP)的含量变化关系密切。
- 申崇标曾照芳
- 关键词：降钙素基因相关肽偏头痛
- NR2B在硝酸甘油诱导的大鼠偏头痛中的表达变化所起作用的研究被引量：1
- 2009年
- 目的:探讨在硝酸甘油(Nitroglycerin,NTG)诱导大鼠偏头痛中NMDA受体NR2B亚基的作用。方法:通过皮下注射硝酸甘油构建偏头痛大鼠模型,采用RT-PCR、免疫组织化学法检测三叉神经节中NR2B的表达变化。结果:偏头痛大鼠三叉神经节NR2B的mRNA和蛋白表达量较对照组明显升高(P<0.05)。结论:NR2B通过神经传导可在偏头痛发病中起到重要作用。
- 申崇标曾照芳
- 关键词：NMDANO
- 下调PTEN基因对全脑缺血再灌注大鼠神经元损伤的保护作用研究
- 2010年
- 目的探讨下调第10号染色体同源丢失性磷酸酶张力蛋白基因(PTEN)对全脑缺血再灌注大鼠神经元损伤的保护作用。方法 60只SD大鼠随机分为正常对照组(转染脂质体)、pshGFP组(转染pshGFP质粒)、pshRNApten治疗组(转染pshRNApten质粒),每组20只,各组分别于再灌注后3d(6只)、7d(7只)、14d(7只)三个时间点进行观察。正常对照组与pshGFP组分别注射脂质体与pshGFP质粒,pshRNApten治疗组于海马局部注射pshRNApten质粒。注射2d后,采用四动脉结扎法建立大鼠全脑缺血再灌注模型。利用RT-PCR和免疫组化法检测海马神经元PTEN基因的表达;采用HE和Nissl染色检测神经元损伤情况;采用TUNEL法检测神经元凋亡情况。结果 pshRNApten治疗组海马神经元PTEN基因的mRNA和蛋白表达量均较正常对照组明显下降(P<0.05)。pshRNApten治疗组海马神经元损伤和变性程度均明显轻于pshGFP组大鼠,海马TUNEL染色阳性细胞数也明显少于psh-GFP组大鼠(P<0.05)。结论下调PTEN能有效缓解由缺血再灌注所致的神经元损伤。
- 申崇标陈力学刘宝松周冀英曾照芳邵阳
- 关键词：再灌注神经元
- 下调PTEN基因对偏头痛大鼠三叉神经节NMDAR1和一氧化氮的影响被引量：1
- 2012年
- 目的:利用RNAi重组腺病毒下调第10号染色体同源丢失性磷酸酶张力蛋白基因(phosphata-se and tensin homology deleted on chromosome ten,PTEN)的表达,探讨PTEN基因是否参与偏头痛的病理过程及其对三叉神经节内N-甲基-D-天冬氨酸受体1亚基(N-methyl-D-aspartate receptor1,NMDAR1,简写NR1)和一氧化氮(nitric oxide,NO)的影响。方法:SD大鼠分成4组:假手术组(Sham组,n=12);硝酸甘油模型组(NTG组,n=12);PTEN基因下调组(AdR-siPTEN组,n=12);Ad-RFP非特异siRNA处理空载体对照组(Ad-RFP组,n=12)。将重组腺病毒立体定向注射入大鼠三叉神经节内,一周后通过皮下注射NTG建立偏头痛大鼠模型,分别于NTG注射前及注射后15分钟、30分钟、1、2、4小时观察大鼠痛阈变化,同时检测各组大鼠三叉神经节NR1和NO的差异。结果 :AdR-siPTEN腺病毒可下调三叉神经节PTEN基因的表达。与Ad-RFP组相比,AdR-siPTEN组的偏头痛大鼠痛阈明显增高,并且三叉神经节内NR1表达及NO合成明显减少。结论 :PTEN基因参与调节偏头痛的病理过程,下调PTEN基因可减轻NTG诱导的偏头痛大鼠模型对机械性刺激的反应,其机制可能是下调PTEN引起NR1表达量减低,继而引起NO含量降低所致。
- 冉丽申崇标陈力学谭戈桂蓓周冀英张和
- 关键词：偏头痛
- PTEN、Akt与CREB基因在偏头痛大鼠三叉神经节的表达被引量：7
- 2010年
- 目的检测第10号染色体同源丢失性磷酸酶张力蛋白基因(phosphatase and tensin homolog deleted on chro-mosome ten,PTEN)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(serine-threonine kinase,Akt)与cAMP反应元件结合蛋白(cAMP responseelement-binding protein,CREB)基因在偏头痛模型大鼠三叉神经节的表达情况,探讨其在偏头痛发病机制中的相互关系及作用。方法通过硝酸甘油(glyceryl trinitrate,GTN)法建立大鼠偏头痛模型,分别在GTN注射后1、4、12和24h,取三叉神经节通过RT-PCR和免疫组化法对PTEN、Akt和CREB基因在mRNA和蛋白水平进行检测。结果 PTEN的基因与蛋白表达开始呈下降趋势,至GTN12h时分别为(0.42±0.07)(0.19±0.02),较对照组(1.00±0.07)(0.36±0.02)有显著降低(P<0.05),但到24h时基因与蛋白表达量分别为(3.09±0.21)(0.45±0.05),又明显回升(P<0.05);Akt与PTEN呈相反变化趋势,基因与蛋白表达在GTN4h(1.38±0.07)(0.23±0.03)和12h(1.42±0.03)(0.25±0.02)时显著增加(P<0.05),24h(0.88±0.15)(0.15±0.06)表达又降至正常水平(P>0.05);而GTN各组的CREB的基因与蛋白表达均较对照组(1.00±0.07)(0.43±0.03)有显著降低(P<0.05),24h(0.42±0.14)(0.27±0.05)表达量降到最低(P<0.05)。PTEN与Akt、CREB的基因表达呈显著负相关,r分别为-0.671,-0.484(P<0.05),蛋白表达也呈显著负相关,r分别为-0.563,-0.430(P<0.05),而Akt与CREB的基因及蛋白表达相关性不显著,r分别为0.272,-0.041(P>0.05)。结论偏头痛大鼠三叉神经节中PTEN、Akt及CREB在GTN不同时间点表达发生改变,且PTEN调控了Akt与CREB的表达,可能通过影响神经突触可塑性,参与偏头痛的发生发展过程。
- 桂蓓张聪申崇标陈力学秦光成周冀英谭戈
- 关键词：PTENAKTCREB偏头痛三叉神经节
- 下调PTEN对血管性痴呆大鼠海马神经元CREB的调节作用被引量：3
- 2010年
- 目的探讨PTEN基因对血管性痴呆大鼠海马神经元CREB表达的影响机制。方法 30只大鼠随机分为正常组、AdR-siPTEN干预组、AdRFP阴性对照组,海马CA1区局部注射AdR-siPTEN腺病毒后2 d,采用双侧颈总动脉永久性结扎(2-VO)法建立血管性痴呆模型,4 w后应用HE染色检测神经元的损伤,RT-PCR和免疫组织化学检测CA1区Akt、CREB mRNA的表达。结果海马部位有PTEN基因红色荧光蛋白表达,并有PTEN基因的mRNA表达量明显下降(P<0.01);HE染色显示,AdR-siPTEN组海马神经元损伤和变性程度明显轻于AdRFP阴性对照组大鼠;RT-PCR和免疫组化染色结果显示,与AdRFP组相比,AdR-siPTEN治疗组CA1区Akt、CREB的mRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。结论下调PTEN基因可通过Akt增加CREB的表达,从而改善血管性痴呆大鼠神经元突触可塑性,达到减轻神经元损伤、提高学习记忆和神经保护的目的 。
- 韦永琼陈力学周冀英曾照芳申崇标黄道超崔智威
- 关键词：血管性痴呆突触可塑性
- 下调PTEN基因介导的NR2B信号通路对偏头痛大鼠的防治作用
- 偏头痛是一种给病人身心健康带来严重危害的常见病和多发病,关于其发病机制有多种学说。目前用于治疗偏头痛的药物较多,但治疗效果并不理想,因此,寻找对偏头痛信号通路关键环节或相关靶点有调节作用的药物,提高偏头痛治疗的有效性,成...
- 申崇标
- 关键词：偏头痛PTENNR2BNOS
- 文献传递
- 基于生物信息学分析方法设计HSV-1诊断芯片的通用寡核苷酸探针被引量：1
- 2010年
- 目的：设计单纯疱疹病毒1型（HSV-1）诊断芯片的寡核苷酸（Oligo）探针;方法：利用BLAST软件对HSV-1的基因序列进行对比,得出对设计HSV-1探针有意义的特异序列,并通过生物学软件Oligo 6.0设计特异性高Tm值相近、长度均一的Oligo探针;结果：获得在相同的杂交、清洗条件下可得到最佳杂交效果的10条30-mer的Oligo探针;结论：通过生物信息学方法设计出HSV-1诊断芯片的探针,可为后期制备成基因芯片,为进行HSV-1的检测打下良好的基础。
- 崔智威曾照芳申崇标
- 关键词：单纯疱疹病毒1型基因芯片BLAST
- 下调PTEN基因对偏头痛大鼠三叉神经节CREB的调节作用被引量：3
- 2010年
- 本研究利用RNAi重组腺病毒(AdR-siPTEN)下调偏头痛大鼠三叉神经节的PTEN(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten)基因,探讨其对偏头痛大鼠行为学的影响,以及经Akt(serine-threonine kinase)信号途径对CREB(cAMP responseelement-binding protein)的调控情况。实验采用健康雄性SD大鼠,随机分为假手术组(Sham)、硝酸甘油模型组(GTN)、Ad-RFP非特异siRNA处理空载体对照组(Vehicle+GTN)、AdR-siPTEN下调组(AdR-siPTEN+GTN)。用AdR-siPTEN重组腺病毒对大鼠进行预处理,然后通过硝酸甘油(glyceryl trinitrate,GTN)法建立大鼠偏头痛模型,进行大鼠挠头和爬笼次数的检测,并用RT-PCR和Western-blot法进行相关基因的mRNA和蛋白检测。结果表明,当PTEN基因表达下调时,有效缓解了偏头痛导致的挠头和爬笼行为,并激活Akt信号途径,增加其下游作用因子CREB的表达,进而可能经"PTEN/Akt/CREB"信号通路影响神经突触可塑性,参与了偏头痛的发病机制。
- 桂蓓申崇标陈力学周冀英谭戈
- 关键词：PTENCREB偏头痛三叉神经节
