刘晓颖
- 作品数：35 被引量：88H指数：6
- 供职机构：上海市血液中心更多>>
- 发文基金：上海市公共卫生重点学科建设项目上海市卫生局青年科研基金上海市卫生局科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 紫草多糖抑制LPS活化PBMC表达炎症相关因子的基因转录被引量：4
- 2011年
- 目的：研究紫草多糖对LPS活化外周血单个核细胞（Peripheral blood mononuclear cells,PBMC）表达TNF-α、IL-10、IL-18相关因子的影响及其可能的信号通路。方法：LymphopreTM（1.077 g/ml）淋巴细胞分离液离心分离正常健康人PBMC,紫草多糖处理正常健康人的PBMC或LPS活化的PBMC,利用Real-time RT-PCR法检测TNF-α、IL-10、IL-18、IL-18BP、IL-18Rα、IL-18Rβ基因转录水平,通过Western blot检测PBMC中ERK磷酸化水平。结果：紫草多糖可增强PBMC TNF-α、IL-10、IL-18Rα、IL-18Rβ的转录,与LPS处理的PBMC相近。紫草多糖处理LPS活化的PBMC,在处理早期（4小时）可抑制LPS活化的PBMCTNF-α及IL-18的表达,抑制率达15%50%（P〈0.05）;并可抑制LPS诱导的ERK磷酸化,抑制率达27%61%（P〈0.05）。结论：紫草多糖可能是通过抑制PBMC的MAPK信号通路进而抑制LPS诱导的炎症相关因子TNF-α等高表达。
- 刘春红王维王静朱红薇刘晓颖姜韵王迅陈道峰曹文俊瞿涤
- 关键词：紫草多糖IL-18MAPK
- 细菌基因组DNA抽提液及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种血液和血小板制品中细菌基因组DNA的提取液和制备方法及使用方法。本发明所述的细菌基因组DNA抽提液由chelex-100，吐温，NP-40，SDS，溶葡萄球菌素，破壁酶，蛋白酶K和水组成。本发明可有效用于...
- 刘晓颖马敏王迅郑岚钱开诚
- 文献传递
- 优化血小板制品中细菌基因组抽提方法被引量：6
- 2007年
- 目的:建立裂解液加热煮沸法抽提细菌基因组DNA。方法:选取大肠埃希菌、金葡菌分别应用五种不同方法抽提细菌基因组,Tagman荧光定量PCR检测抽提产物。并在两种细菌中验证chelex-100抽提方法的灵敏度。结果:对相同浓度的大肠埃希菌、金葡菌样品进行抽提时,chelex-100加热煮沸法抽提所得样品在后续荧光定量PCR检测中CT值均为最小。应用该方法对两种细菌进行抽提鉴定时,灵敏度可达到每毫升个位菌数。结论:chelex-100裂解液加热煮沸法抽提细菌基因组DNA操作简便、省时、经济,为血液标本细菌基因检测在临床上的大规模应用奠定基础。
- 刘晓颖马敏王迅黄宇闻莫琴贾尧
- 关键词：细菌基因组血小板
- 针对病毒性肝炎病原体的多重PCR检测试剂盒及其制备和应用
- 本发明属于生物科学领域，具体涉及一种针对病毒性肝炎病原体的多重PCR检测试剂盒及其制备和应用。本发明的多重PCR检测试剂盒包括七种引物对中的一种或两种至七种的组合，所述七种引物对分别特异对应于甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒、...
- 刘晓颖邵俊杰张敬敬王迅
- 文献传递
- 16S rDNA实时荧光定量PCR法与全自动培养法在血小板细菌污染检测中的应用比较被引量：1
- 2008年
- 目的比较16S rDNA实时荧光定量PCR法与全自动培养法在血小板制品细菌污染检测中的灵敏度和特异性,评价2种方法的应用前景。方法将血小板制品污染中常见的6种细菌用浓缩血小板悬液进行稀释,并选取浓度为102、101、100的菌悬液,分别用实时荧光定量PCR法和全自动培养法进行检测。结果用16S rDNA实时荧光定量PCR法对6株细菌检测,其灵敏度和特异性均为100%,Κ=1.000。用全自动培养仪对6株细菌检测,其特异性均为100%;灵敏度分别为:金黄色葡萄球菌需氧瓶95.5%,Κ=0.886,厌氧瓶90.9%,Κ=0.787;表皮葡萄球菌及大肠杆菌2种培养瓶均为83.3%,Κ=0.667;蜡样芽孢杆菌2种培养瓶均为86.7%,Κ=0.684;铜绿假单胞杆菌需氧瓶度为100%,Κ=1.000,厌氧瓶为44.4%,Κ=0.286;痤疮丙酸杆菌需氧瓶为16.7%,Κ=0.105,厌氧瓶为91.7%,Κ=0.886。结论实时荧光定量PCR法检测血小板制品中的细菌污染,灵敏度高,特异性好,且省时、经济,能应用于临床上血液样本的大规模筛查。
- 刘晓颖马敏徐忠王迅林俊杰邱颖捷钱开诚
- 关键词：血小板实时荧光定量PCRRDNA
- 非特异磁性分离法在血小板制品污染菌富集中的应用研究
- 目的建立非特异磁性分离法富集血小板制品中的大肠杆菌和金黄色葡萄球菌,以提高应用核酸扩增方法检测血小板制品污染菌的效率。方法应用6种磁珠(80nm羧基、200nm羧基、2.8μm氨基、2.8μm羧基、2.8μm环氧基、2....
- 张敬敬刘晓颖钱开诚
- 亚甲蓝光化学病毒灭活效果质量评价方法及其质控品
- 本发明涉及血液病毒灭活效果质量评价领域。本发明解决了现有技术中MB－P灭活效果质量评价方法价格贵，周期长，不适合在常规工作中开展的问题，公开了一种新的亚甲蓝光化学病毒灭活效果质量评价检测方法，包括以下步骤：在对血液或血液...
- 郑岚黄宇闻王迅莫琴刘晓颖钱开诚
- 文献传递
- 定量PCR检测体系及其制备方法
- 本发明涉及血液制品中细菌保守区域检测体系。公开了一种针对细菌保守区域的定量PCR检测体系，由引物、探针、dNTP、Mg<Sup>2+</Sup>、PCR反应液、DNA聚合酶和水组成。本发明还进一步公开了上述检测体系的制备...
- 刘晓颖王迅马敏徐忠钱开诚
- 文献传递
- 裂解液加热煮沸法在血清HBV DNA抽提中的应用
- 2007年
- 目的建立裂解液加热煮沸法抽提血液HBV DNA的方法。方法选取浓度分别为106、105、104、103copies/ml的HBV DNA阳性血清,采用5种方法抽提HBV DNA,并用SYBR GreenI荧光定量PCR检测抽提产物。结果在HBV DNA浓度为106、105、104copies/ml时5种抽提法(异硫氰酸胍加热煮沸/盐酸胍加热煮沸/kit/SDS加热煮沸/chelex-100加热煮沸)均能得到阳性结果,而在HBV DNA为低浓度103copies/ml时,只有异硫氰酸胍加热煮沸/盐酸胍加热煮沸/chelex-100加热煮沸能得到阳性结果。结论chelex-100裂解液加热煮沸抽提HBV DNA操作简便、省时、经济,为血液标本HBV基因检测在临床上的大规模应用奠定基础。
- 刘晓颖马敏伍晓菲郑岚贾尧王迅
- 关键词：血清乙型肝炎病毒
- 非特异磁性分离法在血小板制品污染菌富集中的应用研究
- 2010年
- 目的建立非特异磁性分离法富集血小板制品中的大肠杆菌和金黄色葡萄球菌,以提高应用核酸扩增方法检测血小板制品污染菌的效率。方法应用6种磁珠(80 nm羧基、200 nm羧基、2.8μm氨基、2.8μm羧基、2.8μm环氧基、2.8μm甲苯磺酰基磁珠),分别对高浓度(102—103CFUs.ml-1)、低浓度(<102CFUs.ml-1)血小板制品中的大肠杆菌进行非特异性富集,选取富集效率最高的磁珠,进一步对不同稀释浓度的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌(10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6)进行富集,与直接离心法进行对比,比较不同细菌富集方法对后续聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测灵敏度的影响。结果 6种磁珠对高、低浓度的血小板制品中大肠杆菌均有富集作用,其中80 nm羧基磁珠的富集效率最高(P<0.05);应用直接离心法和80 nm羧基磁珠富集样品后,PCR检测大肠杆菌的灵敏度分别为588 CFUs.ml-1、1 CFUs.ml-1,检测金黄色葡萄球菌的灵敏度分别为1 130 CFUs.ml-1、40 CFUs.ml-1。结论应用磁性分离法富集血小板制品中污染菌,其操作简单,所获细菌纯度高,为后续PCR检测方法在血小板制品污染菌检测中的临床应用提供帮助。
- 张敬敬刘晓颖王迅徐忠邱颖捷周筱嫣钱开诚
- 关键词：血小板金黄色葡萄球菌聚合酶链反应
