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钱开诚

作品数：119 被引量：417H指数：12
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共 119 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
血浆及血细胞制品中巨细胞病毒(HCMV)的灭活
陆萍凌冰季育华莫琴黄宇闻彭奕冰钱开诚
1.实验室病毒株HCMV-AD169体外感染与检测模型的建立　　CMV严格的种族特异性很大程度上限制了有关的研究，是目前唯一公认可行的CMV体外培养的成人纤维细胞。本项研究成功地培养了可以繁殖CMV病毒的HELF细胞及C...
关键词：
关键词：血浆病毒灭活巨细胞病毒
应用实时荧光定量PCR方法检测血小板制品细菌污染被引量：7
2007年
目的应用实时荧光定量PCR方法检测血小板制品中细菌的探讨。方法选取金黄色葡萄球菌及大肠埃希氏杆菌,用改良的Chelex-100法抽提细菌基因组DNA,进行荧光定量PCR检测。并应用过滤法去除反应体系中潜在的细菌及其基因组DNA污染。结果针对16srRNA基因保守序列进行扩增的荧光定量PCR方法具有较高的特异性和灵敏度,与人类淋巴细胞及病毒等的基因组无交叉反应。在金黄色葡萄球菌检测中,应用过滤法后最低含菌量组与阴性对照组Ct值有极显著差异(P<0.001)。该方法对金黄色葡萄球菌的最低检出量为0.3CFUs/PCR,与阴性对照Ct值有显著差异(P<0.01),在大肠埃希氏杆菌中该法可检测出0.1CFUs/PCR,与阴性对照Ct值有显著性差异(P<0.01)。结论改良Chelex-100法抽提细菌基因组及后续的荧光定量PCR分析用于检测血小板制品中的细菌污染,检测实验缩短到3-4h,操作简单,灵敏性高,特异性好,为在临床标本大规模检测中的应用提供理论基础和实验数据。
马敏刘晓颖徐忠王迅黄宇闻莫琴林俊杰邱颖捷钱开诚
关键词：血小板制品实时荧光定量PCR细菌污染
亚甲蓝光化学灭活对血浆丙型肝炎病毒基因组核酸降解的研究被引量：8
2006年
目的研究丙型肝炎病毒(HCV)基因组核酸在亚甲蓝光化学法(methelene blue photochemistry,MB-P)灭活病毒前后的变化,在全基因组水平分析MB-P对基因组各结构区段的降解作用。方法含HCV的血浆中加入终浓度为1.0μmol/L的MB,经约30000Lux强度的荧光照射后,在不同作用时间点取样;将HCV全基因组序列分为互相重叠的8个区段,分别进行RT-PCR,分析基因组核酸的完整性;同时运用实时定量PCR(real time-PCR,RT-PCR)技术观察核酸降解的动力学变化。结果基因组各区段RT-PCR结果发现,经过不同的光照时间,HCV基因组各区段的稳定性不同,第2、4、5、6区段对MB-P作用较敏感,基因组5’端区段和3’端区段经MB-P作用后的稳定性高于基因组其它区段;RT-PCR结果显示,随着光照时间延长,可被检测到的病毒核酸拷贝数逐渐下降。结论MB-P灭活过程中HCV基因组核酸被降解,而且基因组不同区段对光化学作用的反应性不同,提示RNA降解可能是病毒灭活的重要机制;检测病毒核酸稳定性以监测病毒灭活具有一定临床实用价值。
郑岚黄宇闻曹文俊倪小菊莫琴王迅钱开诚
关键词：RT-PCR
核黄素光化学作用灭活大肠杆菌的研究被引量：4
2009年
目的研究核黄素光化学反应对细菌的灭活作用,探讨分析核黄素光化学灭活病原体的机理。方法将含有细菌的培养液4.950ml注入5ml血袋中,再加入10mmol/L的核黄素溶液50μl使其终浓度为100μmol/L,将血袋置控温光照仪中接受400—500nm波段可见光双侧照射[剂量(8.0—32.0)J/cm2],照射时温度为(4±2)℃;照射后标本通过细菌培养,透射电镜影像、核酸检测(LacZ基因片段)等方法观察核黄素光化学作用灭活大肠杆菌的效果。结果400—500nm可见光激发的核黄素光化学作用可以有效灭活大肠杆菌达6log;透射电镜影像示经核黄素光化学处理的大肠杆菌其拟核所在区域出现多个空泡;PCR显示经核黄素光化学处理的大肠杆菌其LacZ基因片段的复制被完全阻止。结论可见光激发的核黄素光化学作用可以有效灭活大肠杆菌,核酸是核黄素光化学产生病原体灭活作用的主要靶点。
黄宇闻莫琴崔振玲钱开诚
关键词：核黄素光化学大肠杆菌病原体灭活透射电镜
血小板保存添加液中葡萄糖对4℃冷藏血小板的影响被引量：1
2009年
目的:评价血小板保存添加液成分中葡萄糖对4℃冷藏血小板体外活力的影响。方法:将单采浓缩血小板分别悬浮于含35%ACD血浆的含糖的或无糖的血小板冷藏保存添加液(PAS-R1和PAS-R2)中,4℃保存5d,检测相关指标;另外,分别采用PAS-R1和PAS-R22种添加液保存血小板,先置22℃振荡4h,然后置4℃冷藏,分别取样检测0,4,48h和7d血小板ATP水平和及0,1,2d和3d血小板聚集反应的差异。结果:与含糖添加液相比,保存于无糖添加液中的血小板葡萄糖的消耗和乳酸的生成显著下降(P<0.05),保存期末的pH略高;无糖添加液中的血小板GPⅠbα的表达显著高于含糖添加液(P<0.05);经37℃血浆孵育后检测,血小板低渗休克率(HSR)显著高于含糖添加液(P<0.05);在降温和冷藏过程中,2种添加液中血小板ATP水平有相同的变化趋势,保存7d后差异无统计学意义(P>0.05)。在冷藏过程中,添加液PAS-R1和PAS-R2保存的血小板对ADP诱导的聚集反应均逐步下降,新鲜冰冻血浆可部分恢复血小板聚集率;2者保存1,2,3d的血小板对ADP诱导的聚集率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:35%ACD血浆所携带的葡萄糖足以维持4℃冷藏血小板5d所需的能量;额外的葡萄糖将导致乳酸生成增加;降低血小板冷藏添加液中葡萄糖的含量有利于维持血小板表面糖蛋白GPⅠbα的表达和保持血小板的代谢活力,可能有助于提高冷藏血小板的体内回收率和生存时间。
张斌谢如锋范华骅聂晓绚张晰钱开诚
关键词：葡萄糖
核黄素光化学法对红细胞形态及细胞膜影响的实验研究
2014年
目的研究420 nm可见光下核黄素光化学法对红细胞功能的影响。方法从ACD全血中分离得到红细胞,按比例重悬于红细胞保存液中。实验组加入终浓度100μmol/L的核黄素,取5 m L注入PVC袋,置420 nm可见光光源下照射,照射剂量40 J/m L。对照组不加核黄素,取5 m L注入PVC袋,不光照。2组均在(4±2)℃储存,于保存0、7、14、21、28、35、42 d测定实验组与对照组的渗透脆性、红细胞数量、Hct、平均红细胞体积,储存0、14、28、42 d检测游离Hb含量、溶血率。结果可见光下核黄素光化学处理:实验组与对照组红细胞均在Na Cl溶液浓度为0.48%时开始溶血;储存期末实验组红细胞数量为(5.61±0.28)×1012/L、对照组(5.52±0.52)×1012/L(P>0.05);储存期末红细胞Hct实验组为(54±2)%、对照组为(53±4)%(P>0.05);储存期末实验组平均红细胞体积(96.50±2.48)f L、对照组(96.76±2.86)f L(P>0.05);储存期末FHb实验组为(0.137±0.005)g/L,高于对照组(0.081±0.005)g/L(P<0.05);储存期末红细胞溶血率实验组(0.039±0.004)%,高于对照组(0.020±0.005)%(P<0.05),但仍满足标准。结论用420 nm可见光为照射光源,核黄素光化学法对红细胞的形态和膜结构无明显影响。
程珍珍张博黄宇闻莫琴王迅钱开诚
关键词：可见光红细胞
16S rDNA实时荧光定量PCR法与全自动培养法在血小板细菌污染检测中的应用比较被引量：1
2008年
目的比较16S rDNA实时荧光定量PCR法与全自动培养法在血小板制品细菌污染检测中的灵敏度和特异性,评价2种方法的应用前景。方法将血小板制品污染中常见的6种细菌用浓缩血小板悬液进行稀释,并选取浓度为102、101、100的菌悬液,分别用实时荧光定量PCR法和全自动培养法进行检测。结果用16S rDNA实时荧光定量PCR法对6株细菌检测,其灵敏度和特异性均为100%,Κ=1.000。用全自动培养仪对6株细菌检测,其特异性均为100%;灵敏度分别为:金黄色葡萄球菌需氧瓶95.5%,Κ=0.886,厌氧瓶90.9%,Κ=0.787;表皮葡萄球菌及大肠杆菌2种培养瓶均为83.3%,Κ=0.667;蜡样芽孢杆菌2种培养瓶均为86.7%,Κ=0.684;铜绿假单胞杆菌需氧瓶度为100%,Κ=1.000,厌氧瓶为44.4%,Κ=0.286;痤疮丙酸杆菌需氧瓶为16.7%,Κ=0.105,厌氧瓶为91.7%,Κ=0.886。结论实时荧光定量PCR法检测血小板制品中的细菌污染,灵敏度高,特异性好,且省时、经济,能应用于临床上血液样本的大规模筛查。
刘晓颖马敏徐忠王迅林俊杰邱颖捷钱开诚
关键词：血小板实时荧光定量PCRRDNA
一种用于血浆病毒灭活的处理装置
本实用新型涉及医疗技术领域，特别是涉及一种用于血浆病毒灭活的处理装置。本实用新型提供一种用于血浆病毒灭活的处理装置，包括血液分离装置和光处理装置，血液分离装置和光处理装置分别设有输入口和输出口，血液分离装置的输出口通过第...
黄宇闻莫琴张博钱开诚朱永明王学荣王迅伍晓菲贾尧刘李栋
文献传递
非特异磁性分离法在血小板制品污染菌富集中的应用研究
目的建立非特异磁性分离法富集血小板制品中的大肠杆菌和金黄色葡萄球菌,以提高应用核酸扩增方法检测血小板制品污染菌的效率。方法应用6种磁珠(80nm羧基、200nm羧基、2.8μm氨基、2.8μm羧基、2.8μm环氧基、2....
张敬敬刘晓颖钱开诚
血浆病原体灭活技术的现状及展望
周伟业张博钱开诚
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