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李新生: 作品数：216 被引量：646H指数：12; 供职机构：河南农业大学更多>>; 发文基金：国家科技支撑计划国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>; 相关领域：农业科学生物学文化科学轻工技术与工程更多>>

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传染性喉气管炎病毒河南株ILTV-CG GX基因的克隆与序列分析被引量：2: 2007年; 根据GenBank中收录的鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)GX基因核苷酸序列,设计并合成了1对引物,应用PCR技术扩增ILTV河南株(ILTV-CG)GX基因。将ILTV-CG接种10日龄鸡胚,提取ILTV基因组DNA进行PCR扩增。将回收的PCR产物与pGEM-T Easy载体进行连接,转化JM109感受态细胞,经蓝白斑筛选,对菌液PCR和酶切鉴定为阳性的菌株进行测序。测序结果表明,所克隆的GX基因全长为950 bp,含有一个开放阅读框,编码299个氨基酸的多肽。推导的氨基酸有4个潜在的N-糖基化位点,有11个与二硫键形成有关的半胱氨酸。序列分析表明,克隆的ILTV-CGGX基因与GenBank中发表的ILTV-SA2株GX基因核苷酸同源性为97.2%,变异点为第124位插入1个碱基G,第136位又插入2个碱基C,从而引起该毒株GX基因推导的氨基酸序列在第33位插入1个亮氨酸,还存在多处氨基酸发生变化,氨基酸同源性为95.3%。GX基因的成功克隆为构建ILTVGX基因缺失的病毒活载体奠定基础。; 陈红英崔保安李新生杨明凡赵丽方剑玉; 关键词：传染性喉气管炎病毒聚合酶链反应

表达H5亚型禽流感病毒HA基因和鸡IL-18基因重组禽痘病毒的构建被引量：8: 2008年; 【目的】获得共表达H5亚型AIVHA基因和鸡IL-18基因的重组禽痘病毒。【方法】将含痘病毒启动子LP2EP2的HA基因和鸡IL-18基因插入到禽痘病毒转移载体pSY681中,获得重组转移载体pSYHA/IL-18。用脂质体将其转染已感染亲本禽痘病毒S-FPV-017株的鸡胚成纤维细胞,使其在鸡胚成纤维细胞内与禽痘病毒基因组发生同源重组,产生表达HA和IL-18的重组禽痘病毒(rFPV-HA-IL-18)。在含有X-gal的营养琼脂培养基上进行蓝斑筛选后,对重组禽痘病毒又进行了多次蚀斑克隆。【结果】以重组禽痘病毒DNA为模板,利用HA基因和鸡IL-18基因引物进行PCR,分别扩增出1条约1.7kb带和1条0.6kb左右的带。以间接免疫荧光试验、T细胞转化试验和SPF雏鸡免疫接种证实重组禽痘病毒能表达HA和鸡IL-18,并初步证明鸡IL-18增强HA免疫作用。【结论】重组禽痘病毒能表达具有生物学活性的HA和鸡IL-18。; 陈红英黄青云崔保安李新生管倩; 关键词：H5亚型禽流感病毒 HA基因鸡IL-18 重组禽痘病毒

鸡新城疫和产蛋下降综合征二联灭活氢氧化铝胶疫苗免疫研究: 2009年; 使用鸡新城疫病毒LaSota株和产蛋下降综合征病毒分离株HE03株制备鸡新城疫和产蛋下降综合征二联灭活氢氧化铝胶疫苗。把40只16周龄SPF蛋鸡分成A、B组,分别是30只、10只。A组接种0.5 mL鸡新城疫和产蛋下降综合征二联灭活氢氧化铝胶疫苗,B组作为对照组,每隔14 d采集血清样本直到接种后第6周。至22周龄时,A组再次分成A1和A2两组。A2组与B组的鸡接受强致病性的产蛋下降综合征病毒攻击。结果表明,A组在不同时间采集的血清抗鸡产蛋下降综合征病毒的最高的抗体出现在接种后的第4周,抗鸡产蛋下降综合征病毒的HI抗体滴度从1∶128到1∶512不等,几何平均滴度(GMT)为1∶111;第4周时,抗鸡新城疫病毒的HI抗体滴度GMT为1∶134。该疫苗能保护鸡抵抗强致病性的产蛋下降综合征病毒和鸡新城疫病毒的感染,B组在攻毒感染后产蛋率显著下降,出现畸形蛋、软壳蛋和无壳蛋。; 李新生陈红英杜向党韩玉林崔沛崔保安; 关键词：产蛋下降综合征新城疫血凝抑制

不同类型鸡新城疫La Sota疫苗的免疫应答比较被引量：2: 2009年; A、B、C、D组SPF鸡分别接种La Sota加佐剂活疫苗,未加佐剂活疫苗,氢氧化铝胶佐剂苗和油佐剂灭活疫苗,通过采集血清进行红细胞凝集抑制试验,测定其抗体水平,并进行比较。结果表明,La Sota加佐剂活疫苗组可产生较高的抗体滴度,并持续较长时间;而未加佐剂疫苗组血清阳转较弱,且持续时间较短;油佐剂灭活疫苗组抗体滴度最高,维持时间最长。; 莫娟韩玉林陈玉霞赵金凤郭鑫李新生; 关键词：新城疫疫苗佐剂免疫应答

一例肾型鸡传染性支气管炎的诊断被引量：5: 2008年; 2007年9月,郑州某鸡场发生一起疑似肾型鸡传染性支气管炎。将分离毒株接种20日龄肉鸡,于接种后第4 d出现精神不振、拉稀,第6 d出现死亡。分离病毒可致死部分鸡胚及产生卷曲胚,但不能凝集鸡红细胞,经1%胰酶处理后能凝集鸡红细胞。经过实验室检查结果结合流行病学调查、临床症状和剖检变化,初步诊断为肾型鸡传染性支气管炎。; 陈红英李新生段廷云贾艳艳郭显坡崔保安; 关键词：传染性支气管炎肾型

兽医微生物学大实验教学调查分析: 2024年; 为了解兽医微生物学大实验课程教学进展情况,捕捉影响学生学习效果与教师教学效果的关键问题,为改进课程教学方式,提高课程教学质量提供参考依据。通过调查问卷形式开展了广泛调研,对兽医微生物学大实验课程开设过程中存在的问题和不足进行分析。结果显示,兽医微生物学大实验能充分调动学生的自主学习能力和实验操作技能,锻炼学生的综合素养,教学效果良好,同时也存在一些突出问题。因此,教师应加强教学指导、合理安排实验时间、完善考核评价方式,以提高学生的学习兴趣和能力;学生应提高科学研究素养,合理使用实验资源,推动兽医学科的发展和进步。; 宋亚鹏张宜娜金钺杨明凡张红英夏平安李新生; 关键词：兽医微生物学问卷调查

一种林可霉素耐药基因新亚型Lnu(G)的发现与鉴定: 林可霉素是由链霉菌产生的一种林可胺类抗生素,作用于敏感菌核糖体的50S亚基,阻止肽链的延长,从而抑制细菌细胞蛋白质的合成,对大多数革兰氏阳性菌和某些厌氧菌有抗菌作用。本研究在药敏试验、耐药基因筛选的基础上,在一株猪源肠球...; 朱晓清王晓明李新生胡功政张素梅潘玉善商艳红杜向党; 关键词：林可霉素肠球菌转座子; 文献传递

鸡传染性支气管炎病毒HA抗原的制备方法: 本发明公开了一种鸡传染性支气管炎病毒HA抗原的制备方法，该方法是通过病毒增殖、病毒液浓缩与磷脂酶C处理、抗原的灭活和抗原的稳定步骤制得鸡传染性支气管炎病毒HA抗原。所得HA抗原在4℃的稳定性由原来的24小时延长到6个月以...; 崔保安李新生高文明王莉王学斌杨明凡陈少渠冯利霞; 文献传递

HACCP在低温火腿食品生产中的应用被引量：3: 1996年; HACCP即危害分析和关键控制点。是一种保证食品安全,维护人们健康的质量管理系统。通过对食品和食品生产情况进行广泛的危害分析,确定加工过程每个程序中的危害因素,制定出使危害降低到最小限度的预防措施。; 王自振赵军李新生李志培沈莉; 关键词：火腿灌肠低温火腿 HACCP