陈红英 作品数:429 被引量:1,054 H指数:13 供职机构: 河南农业大学 更多>> 发文基金: 河南省科技攻关计划 国家科技支撑计划 国家科技重大专项 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 政治法律 更多>>
猪伪狂犬病毒SYBR-GreenⅠ实时定量PCR检测方法的建立 被引量:9 2009年 利用PCR技术扩增出猪伪狂犬病毒gH基因中187 bp的片段,并克隆到pGEMT载体上,纯化的质粒作为PCR检测的标准模板,以10倍梯度稀释质粒为标准模板,进行SYBR GreenⅠ荧光定量PCR扩增并制作标准曲线,建立了猪伪狂犬病毒的荧光定量PCR检测方法.该方法检测灵敏度可达1.26×102拷贝.μL-1,与猪圆环病毒,猪细小病毒,猪繁殖与呼吸综合征病毒,猪瘟病毒不发生交叉反应,具有良好的特异性和重复性;对15份疑似病料进行了检测,发现均为荧光定量PCR阳性,而常规PCR只能检测出6份阳性.结果表明,建立的实时荧光定量PCR具有特异、敏感、快速、定量、重复性好等优点,可用于临床PRV感染的检测. 李明凤 魏战勇 郭显坡 贾艳艳 陈红英 王学兵 崔保安关键词:猪伪狂犬病毒 实时荧光定量PCR 猪α干扰素基因在干酪乳酸杆菌中的表达 从质粒pMD18-IFN-α扩增出猪α干扰素(IFN-α)基因成熟蛋白序列,克隆到含有信号肽的质粒pUCK-SP中,获得重组质粒pUCK-SP-IFN-α。再将NdeⅠ和EcoRⅠ双酶切获取的SP-IFN-α片段插入到同... 陈红英 马世杰 李坤 付朋飞 郭晓庆 高晓云 崔保安关键词:猪Α干扰素 基因表达 抗病毒活性 文献传递 精液中猪细小病毒DNA三种提取方法效果比较 被引量:6 2009年 猪精液中含有高浓度的蛋白质,因此提取高纯度DNA较为困难;试验分别用水煮法、异硫氰酸胍法和Trizol法三种方法对连续稀释梯度猪精液提取猪细小病毒DNA,应用Taqman荧光定量PCR技术评价提取效果并加以对比。结果发现Trizol法可以提取出高纯度的DNA,但因Trizol试剂价格昂贵,不适用临床检测;比较另外两种方法,水煮法较异硫氰酸胍抽提法更为有效,是一种迅速、简便、经济、高效的DNA提取方法,适合于临床大量样品的检测。 魏战勇 梁静怡 李厚伟 王东方 陈红英 崔保安关键词:猪精液 DNA提取方法 猪细小病毒 异硫氰酸胍 鸽新城疫的诊断和防制 2007年 杨明凡 陈红英 方忠意 崔保安关键词:鸽新城疫 防制 病毒灭活苗 发病情况 白色稀粪 纳米铝胶佐剂猪细小病毒灭活疫苗猪体免疫效果研究 本研究为探讨纳米铝胶佐剂猪细小病毒灭活疫苗对猪体的免疫效果,探明纳米铝胶佐剂的免疫增强作用。将制备的纳米铝胶佐剂和常规铝胶佐剂PPV灭活疫苗与市售的PPV油乳剂灭活疫苗做对比,接种猪体后进行免疫效果比较,在免疫后0、1、... 寇亚楠 陈红英 崔保安 魏战勇关键词:猪细小病毒 灭活疫苗 免疫效果 文献传递 猪细小病毒与猪圆环病毒2型二重SYBR Green I实时荧光PCR检测引物及方法 本发明公开了一种猪细小病毒与猪圆环病毒2型二重SYBR Green I实时荧光PCR检测引物及方法,设计与合成引物,利用引物检测猪细小病毒与猪圆环病毒2型的二重SYBR Green I实时荧光PCR检测方法,包括提取样品... 崔保安 魏战勇 陈红英 李明凤 党玉丽 郭显坡文献传递 麻鸭γ-干扰素基因的克隆与序列分析 被引量:1 2007年 应用RT-PCR技术,直接从成年麻鸭脾淋巴细胞提取的总RNA中扩增出麻鸭γ-干扰素基因(duIFN-γ),并克隆、测序。测序结果表明,麻鸭IFN-γ全序列大小为515 bp,包含一个完整阅读框(495 bp),编码164个氨基酸残基,推导的氨基酸有3个潜在的N-糖基化位点,有5个与二硫键形成有关的半胱氨酸。麻鸭IFN-γ基因序列与AF087134、AF100929、AJ012254的序列完全一致,而与北京鸭(AY166850)核苷酸同源性为99.6%,有2个碱基差异,为非同义突变,氨基酸同源性为98.8%。麻鸭IFN-γ基因与鸡、火鸡和鹌鹑IFN-γ基因核苷酸序列同源性分别为77.2%、78.0%、78.8%,氨基酸序列同源性均67.1%,而与人、狒狒、猪、牛、绵羊、犬、猫IFN-γ核苷酸序列同源性为39.7%~42.1%,氨基酸序列同源性在28.0%~31.7%之间。 陈红英 崔保安 赵丽 崔沛 郑兰兰 王东方 郭小参关键词:IFN-Γ 基因克隆 一种猪伪狂犬病毒株 本发明公开了一种猪伪狂犬病毒株,其特征在于:猪伪狂犬病毒(Herpesviridae)毒株,CCTCC NO:V201314。本发明将PRV/HN2012株传至第7代,并对第7代病毒进行了病毒滴度TCID<Sub>50<... 陈红英 杨明凡 高晓云 崔保安 杨兴武 张宇 徐朋丽文献传递 PCV2、PRV与SIV H9亚型多重SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR引物及其检测方法 本发明公开了一种PCV2、PRV与SIV H9亚型多重SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR引物及其检测方法,SIV H9亚型引物的序列如下:上游引物P1:5′-GGAACAACGCTTACCCTG-3′;下游引物P2:... 魏战勇 李明凤 陈红英 宋亚鹏 韩志涛 崔保安文献传递 一养鸡地区传染性法氏囊炎免疫失败的研究 被引量:1 2006年 鸡传染性法氏囊病(in fectious bursa l d isease,IBD)是一种严重危害养禽业健康发展的传染病,该病感染后不但造成重大的损失,还引起不同程度的免疫抑制,给禽群免疫带来更大的困扰。作者对发生在河南某地区的IBD免疫失败进行了研究,研究结果发现:鸡群免疫使用的鸡传染性法氏囊炎中等毒力苗每瓶标识含量均为500羽份,发生严重免疫失败的A疫苗抽检的6瓶测得的0.1 m l疫苗稀释液的TC ID50分别是1-0 2.2、1-0 2.7、100、10-2.9、1-0 1.9、100,即每瓶实际分别含有3.17、10.04、0、15.9、1.3和0羽份。而当地市场使用效果较好的B疫苗和C疫苗每瓶疫苗分别平均含有485和453羽份。疫苗有效含量不足是该地区IBD免疫失败的主要原因。 李新生 杜向党 陈红英 崔沛 廖仲磊 崔保安关键词:传染性法氏囊病 免疫失败