魏战勇
- 作品数：323 被引量：782H指数：14
- 供职机构：河南农业大学更多>>
- 发文基金：河南省科技攻关计划国家自然科学基金河南省杰出人才创新基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生文化科学更多>>
- 猪细小病毒NS1基因的原核表达及重组蛋白的复性被引量：8
- 2007年
- 利用PCR技术扩增出PPVNS1基因抗原区。将目的基因与原核表达载体pGEX-4T-1进行连接并转化,重组质粒经鉴定并测序。测序结果表明,目的基因插入的位置、大小和读码框均正确,通过试验摸索并确定了表达NS1基因的最佳诱导条件:IPTG终浓度为1.0mmol/L,诱导时间为10h,温度为37℃,其表达量占全菌蛋白的29.8%。表达产物经SDS-PAGE分析,得到分子量约为52kDa的重组蛋白且以包涵体形式存在。重组蛋白经Westernblot检测,结果证明重组蛋白可被PPV阳性血清识别。用8mol/L尿素变性溶解包涵体,再用稀释方法和还原型、氧化型谷胱甘肽系统相结合的方法对重组蛋白进行复性。ELISA检测表明,复性后的重组蛋白有良好的生物活性。
- 金喜新崔保安魏战勇刘占通王学斌田永军
- 关键词：猪细小病毒NS1基因原核表达复性
- PCV-2感染对PK-15细胞抗病毒相关因子转录时相的影响被引量：2
- 2011年
- 【目的】了解猪圆环病毒2型(PCV-2)感染对PK-15细胞抗病毒相关因子转录时相的影响,探讨宿主-病毒之间的作用关系。【方法】运用荧光定量PCR技术,测定和分析PCV-2感染PK-15细胞后0(未接种病毒),1,6,12,24,48,72 h时病毒DNA含量及细胞因子IFN-βI、FN-γI、FNAR-1I、FNAR-2、MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ、MX1、NOS、RNaseL和IRF-3 mRNA转录水平的变化。【结果】PCV-2感染PK-15后1 h就可以检测到病毒DNA,在感染后24 h病毒开始大量迅速增殖,于感染72 h时达到最高峰。与0 h相比,PCV-2感染后IFN-βI、RF-3的表达量在感染12 h时显著增加,其他时间表达量下降;IFN-γ、MHC-Ⅱ的表达量在感染12 h时增加不明显,其他时间表达量下降;感染PCV-2后IFNAR-2、MHC-Ⅰ、MX1的表达量下降;RNaseL的表达量在感染12 h时显著减少,其他时间表达量增加,48 h时表达量增加显著;IFNAR-1的表达量在感染72 h时显著增加,其他时间表达量下降;未检测出NOS的表达。【结论】随着PCV-2病毒含量的增加,以上几种主要抗病毒因子的表达量不明显或有所下降,表明PCV-2感染PK-15细胞后可逃避机体的抗病毒作用机制。
- 韩志涛李金磊陈红英王淑娟耿静微翟阿官魏战勇崔保安
- 关键词：细胞因子PK-15细胞猪圆环病毒2型转录时相
- 兔源大肠杆菌与沙门菌混合感染的诊断被引量：2
- 2012年
- 为了对济源某兔场严重腹泻兔群进行病原确诊并提供防治依据,无菌采取某兔场送检的病死兔的心血、肝、肾进行病原菌的分离鉴定、生化试验和药敏试验。结果,引起该兔场兔群发病的病原除大肠杆菌外,还有沙门菌。药敏试验显示,大肠杆菌对利福平、左氟沙星、庆大霉素、新霉素、头孢氨噻肟、卡那霉素、呋喃妥因敏感;而沙门菌对氟哌酸、庆大霉素、新霉素敏感。
- 赵金凤郭东辉段天奎李桂甫薛邦群李明魏战勇
- 关键词：大肠杆菌沙门菌
- 非洲猪瘟病毒TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立被引量：13
- 2020年
- 建立一种TaqMan荧光定量PCR检测方法,用于非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)保守结构蛋白P72基因的检测。参照GenBank登录的ASFV P72相关基因序列,设计合成1对特异性引物与1个TaqMan探针,通过对反应条件和反应体系进行优化,建立了快速检测ASFV的TaqMan实时荧光定量PCR方法,对该方法的灵敏性、特异性与重复性进行了验证。结果显示,该方法能有效扩增1.0×10^0~1.0×10^9拷贝/μL ASFV-P72标准质粒,建立的标准曲线呈现良好的线性关系;检测灵敏度为1.0×10^0拷贝;对猪流行性腹泻病毒、猪δ冠状病毒、高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪伪狂犬病毒等病原不发生交叉反应;重复性试验结果显示变异系数(CV)小于1%。结果表明,本试验建立的TaqMan荧光定量PCR检测方法具有良好的灵敏性、特异性和重复性,可用于临床样本中ASFV的检测,从而更好地对ASF疫情进行监测和诊断。
- 吴亚楠朱潇静周博伦张博刘晴晴郑兰兰魏战勇
- 关键词：非洲猪瘟病毒
- 猪链球菌病的诊断与防治
- 猪链球菌病是一种重要的人兽共患病,它不仅能引起猪的脑膜炎、心内膜炎、关节炎、肺炎和败血症等,也能导致人的脑膜炎和败血症。猪链球菌血清型众多,其中猪链球菌2型对养殖生产的危害最大。本文从猪链球菌的病原、流行病学、致病机理、...
- 刘中原寇亚楠魏战勇
- 关键词：猪链球菌致病机理临床症状
- 文献传递
- 一株猪δ冠状病毒传代致弱毒株及其应用
- 本发明公开了一株猪δ冠状病毒传代致弱毒株及其应用，属于生物医药技术领域。该弱毒株的保藏编号为CCTCC NO:V202363。该弱毒株是在猪肾上皮细胞上传代后经克隆纯化而得的传代致弱毒株。该毒株随着体外传代次数的增加，其...
- 胡慧魏战勇张云飞张越靳晓慧祖少坡夏璐袁晋
- 绿脓杆菌SYBR Green Ⅰ实时定量PCR检测方法的建立及初步应用被引量：7
- 2014年
- 为了建立绿脓杆菌的SYBR Green I实时定量PCR检测方法,以便更加快捷、方便的检测绿脓杆菌,根据16S rDNA高度保守的特性,在绿脓杆菌16S rDNA保守区设计1对引物,利用普通PCR技术扩增出绿脓杆菌16S rDNA保守区277 bp的片段,并克隆到pMD-18 T载体上,纯化的质粒作为模板进行SYBR GreenⅠ荧光定量PCR扩增并制作标准曲线,建立了绿脓杆菌的荧光定量PCR检测方法。并对方法的灵敏性、特异性、重复性进行评价,又进一步在临床实践中进行检验。结果显示,所建立的方法对标准样品的最小检出浓度为28拷贝/μL。并且特异性检验结果显示与常见的菌群没有交叉反应,重复性良好。在临床中检测疑似绿脓杆菌感染病料55份,用所建立的荧光定量方法检测出阳性病料40份,而普通的PCR方法检测出阳性病料32份。表明建立的实时荧光定量PCR具有特异、敏感、快速、定量、重复性好等优点,可以在临床中用于绿脓杆菌的检测。
- 宋月程琨梁秀丽王亚宾付彤韩立强魏战勇
- 关键词：绿脓杆菌RDNA荧光定量PCR
- 动物源大肠杆菌O157：H7多重PCR检测方法的初步研究
- 目的: 建立快速、特异的分离鉴定大肠杆菌O157：H7的多重PCR方法。方法: 根据GenBank上已发表的大肠杆菌O157：H7菌体抗原和鞭毛抗原的基因序列(rfbE和fliC基因)设计两对特异引物，分别建立了针对rf...
- 陈雅君段志刚魏战勇王亚宾崔保安张龙现陈丽颖胡慧
- 关键词：多重PCR
- 文献传递
- 水溶性酵母葡聚糖对猪细小病毒灭活疫苗免疫效果的影响被引量：2
- 2016年
- 为研究水溶性酵母葡聚糖作为免疫佐剂对猪细小病毒(PPV)灭活疫苗免疫效果的影响,将水溶性酵母葡聚糖与PPV灭活疫苗联合免疫小鼠,采用ELISA方法检测免疫后不同时间小鼠血清中的抗体水平及IL-4、IL-6、IFN-γ的分泌水平,应用流式细胞仪检测免疫小鼠CD3^+、CD3^+CD4^+、CD3^+CD8^+T淋巴细胞百分比值的动态变化。结果显示,与疫苗单独免疫组相比,酵母葡聚糖对抗体水平无明显影响,CD3^+、CD3^+CD4^+、CD3^+CD8^+细胞数量增加,且均能不同程度诱导IL-4、IL-6、IFN-γ分泌。表明,水溶性酵母葡聚糖联合PPV灭活疫苗能够有效增强机体的免疫功能,水溶性酵母葡聚糖可以作为PPV的免疫佐剂。
- 靳晓慧王瑞宁徐卫松耿静微何潇湘郑兰兰张建魏战勇
- 关键词：猪细小病毒灭活疫苗体液免疫
- 一种猪传染性胃肠炎病毒突变体病毒及其制备方法和应用
- 本发明涉及生物技术领域，特别是涉及一种猪传染性胃肠炎病毒突变体病毒及其制备方法和应用。该病毒的保藏编号为CCTCC NO：V2023113。该病毒与猪传染性胃肠炎病毒野生毒株S蛋白相比，第535位突变为脯氨酸，第593位...
- 魏战勇祖少坡史晨曦胡慧梁纪元张越袁晋靳晓慧
