董晓晖
- 作品数：11 被引量：77H指数：7
- 供职机构：广东省微生物研究所更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目广东省自然科学基金广州市科技计划项目更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程医药卫生农业科学更多>>
- 群体感应及其在动物病原菌致病中的作用被引量：7
- 2009年
- 群体感应是指微生物群体某些基因的表达受到与群体密度相关的信号分子调控的现象。微生物以酰基高丝氨酸内酯化合物、某些短肽分子、呋喃酮类化合物、以及一些小分子物质为信号分子,介导不同的群体感应系统。各群体感应系统之间以平行协同或层次串连的方式组织起来调控微生物各种基因表达。众多病原菌致病基因的表达与群体感应密切相关,主要表现在:群体感应帮助微生物对宿主的侵袭和定殖;调控毒力因子的产生和作用于宿主;以及介导病原菌对宿主的免疫能力和药物抗性。进行群体感应对微生物致病过程调控的研究,将有利于从群体感应入手进行病原菌防控新策略的探索。
- 吴清平吴葵叶应旺董晓晖张菊梅
- 关键词：自体诱导物病原菌毒力因子生物膜
- 食品污染克罗诺杆菌(阪崎肠杆菌)的分离及鉴定被引量：24
- 2013年
- 【目的】对300份奶粉样品和50份非奶粉类食品中克罗诺杆菌的污染情况做定量检测,并对分离得到的克罗诺杆菌进行鉴定。【方法】通过分子方法和9管法对奶粉和其他食品中克罗诺杆菌的污染情况做定量检测;通过吲哚产生、丙二酸盐利用、卫矛醇、肌醇、松三糖和松二糖发酵产酸等六种生化试验对分离株进行鉴定;同时对分离株的16S rRNA基因序列进行同源性分析,通过N-J(Neighbour-Joining)法构建系统发育树。【结果】定量检测结果表明,350份样品中有23份样品分离出克罗诺杆菌,共分离到24株克罗诺杆菌,检出率为6.6%;23份受污染样品中有4个样品的克罗诺杆菌大于100 MPN/100g;24株克罗诺杆菌被鉴定到种或亚种,其中19株为阪崎克罗诺杆菌(Cronobacter sakazakii);2株为丙二酸盐克罗诺杆菌(C.malonaticus);2株为都柏林克罗诺杆菌奶粉亚种(C.dublinensis subsp.lactaridi);1株为莫金斯克罗诺杆菌(C.muytjensii)。【结论】分子方法和9管法联用适合污染率低而定量检测要求高的克罗诺杆菌的奶粉调查;采用生化和分子生物学方法将24株分离株鉴定到种或亚种,其中阪崎克罗诺杆菌为优势种;奶粉中克罗诺杆菌的污染问题对婴幼儿安全存在隐患,应引起消费者和有关部门的重视。
- 董晓晖李程思吴清平张菊梅莫树平郭伟鹏杨小鹃徐晓可
- 关键词：RRNA基因系统发育树
- 利用转座子标签法构建阪崎肠杆菌随机突变体库
- 阪崎肠杆菌(Cronobacter(Enterobacter sakazakii))是人和动物肠道内寄生的一种有周生鞭毛,能运动,兼性厌氧的革兰阴性无芽孢杆菌。作为一种重要的条件性致病菌,阪崎肠杆菌感染的大多数病例都是婴...
- 董晓晖吴清平
- 关键词：阪崎肠杆菌转座子突变体库
- 种特异性PCR快速检测奶粉中阪崎肠杆菌研究被引量：8
- 2007年
- 阪崎肠杆菌是一种目前认为以奶粉为传播媒介的食源性条件致病菌,通过α-1,4-葡萄糖苷酶基因和ompA基因分别设计引物ESF-ESR和ESSF-ESSR,进行单重和双重PCR方法研究,结果显示所有阪崎肠杆菌菌株PCR扩增均为阳性,阴性对照均未扩增出目的片段;纯菌单重PCR灵敏度分别为102cfu/mL和101cfu/mL,双重PCR灵敏度为103cfu/mL;在有或无其他细菌存在时,人工污染阪崎肠杆菌模拟样品单重PCR检测灵敏度分别为103cfu/mL和102cfu/mL,双重PCR检测灵敏度为104cfu/mL;实际样品检测显示PCR方法与传统方法具有很好的一致性。结果表明:该PCR方法具有很好的种特异性和灵敏度,能够克服奶粉中杂菌对快速检测阪崎肠杆菌造成的干扰,减少以保守序列来设计引物导致假阳性结果的出现,可以较好地应用于奶粉中阪崎肠杆菌的检测与鉴定。
- 叶应旺吴清平郭伟鹏张菊梅董晓晖
- 关键词：阪崎肠杆菌奶粉
- 转基因食品检测技术研究进展被引量：9
- 2007年
- 吴清平董晓晖张菊梅徐红
- 关键词：转基因食品安全评价
- 阪崎克罗诺杆菌全菌蛋白质双向电泳技术和图谱的建立
- 2012年
- 建立阪崎克罗诺杆菌全菌蛋白双向电泳技术。采用2种不同的尿素-3-[3-(胆酰氨丙基)二甲氨基]-1-丙磺酸(CHAPS)-二硫苏糖醇(DTT)裂解法兼反复冻融提取阪崎克罗诺杆菌ATCC 29544全菌蛋白,在2种pH范围的固相pH梯度等电聚焦对全菌蛋白进行双向电泳,胶体考染后获得的双向电泳图谱进行Image Master 2DPlatinum软件分析。结果表明,获得全菌的蛋白浓度为5.32μg/μL;裂解液成分:尿素7 mol/L,硫脲2 mol/L,CHAPS 4%(m/V),DTT 1%(m/V),PMSF 45mg/L,pH 3～10IPG缓冲液2%(V/V)。该技术成功构建了阪崎克罗诺杆菌全菌蛋白质双向电泳图谱。
- 董晓晖吴清平莫树平张菊梅
- 关键词：蛋白质组学双向电泳蛋白质图谱
- 阪崎肠杆菌随机突变体库的构建
- 2012年
- 阪崎肠杆菌(Cronobacter(Enterobacter sakazakii))是一种以婴幼儿奶粉为主要致病源的食源性致病菌。至今人们对其功能基因所知不多,毒力因子和致病机制研究都未能找到突破口。本研究利用质粒pTnMod-okm和pBSL180构建阪崎肠杆菌随机突变体库,最终以工程菌Escherichia coli WM3064及其所含质粒pBSL180成功构建了阪崎肠杆菌随机突变体库,并通过阪崎肠杆菌显色培养技术和抗生素抗性标记(卡那霉素50μg/mL)对重组子进行筛选,建立了该菌功能基因组研究平台。在后继研究中不但可以实现对单个基因进行定位及功能研究还可找到有相似功能的一类基因,为抗性机制和致病机理研究奠定基础。
- 董晓晖吴清平莫树平杨小鹃
- 关键词：阪崎肠杆菌转座子突变体库
- 广东部分零售畜禽产品沙门菌生化型和血清型分析被引量：8
- 2013年
- 目的研究分析畜禽产品中沙门菌的生化型和血清型,了解沙门菌在畜禽产品中的污染状况,为确保食品安全提供依据。方法依据GB 4789.4—2010《食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验》,对样品进行检测,利用API 20E试剂条对菌株进行鉴定分析,采用玻片凝集法测定沙门菌的血清型。结果畜禽产品209份,检出沙门菌阳性样品42份,总检出率为20.10%,污染样品多来自于生鸭肉(检出率为69.23%),生鸡肉(37.14%)、生牛肉(20.00%)、生猪肉(16.67%)。API鉴定出46株沙门菌,分为7种不同生化谱的沙门菌API生化型,主要的2种为6704752和6704552。畜禽肉中沙门菌主要血清型为德尔卑沙门菌(21.74%)、鼠伤寒沙门菌(10.87%)、肠炎沙门菌(8.70%)、茨昂威沙门菌(8.70%)、印地安纳沙门菌(8.70%)、韦太夫雷登沙门菌(8.70%)。结论广东畜禽产品沙门菌污染情况较为严重,沙门菌菌株生化型和血清型表现为多样性的特征。
- 杨小鹃吴清平张菊梅张菊梅董晓晖
- 关键词：畜禽产品沙门菌血清型
- 克罗诺杆菌检测方法研究进展被引量：13
- 2013年
- 克罗诺杆菌(Cronobacter spp.)是一类重要的食源性致病菌,其引起的奶粉安全事件和新生儿致病问题受到了社会的高度重视。随着对该菌研究的深入和现代分类技术的不断发展,克罗诺杆菌的分类经历了从种到属的变化。但是截至目前,克罗诺杆菌的污染源和致病机制仍不清楚,为了防止易感人群的大规模疾病暴发,对于该菌的检测和预防尤为重要。本文对克罗诺杆菌的生化检测和分子检测的发展历程及存在问题进行综述,以期为该菌的研究提供参考。
- 董晓晖吴清平莫树平张菊梅杨小鹃
- 关键词：生化检测分子检测
- 基于rpoB基因部分序列对克洛诺菌属(原阪崎肠杆菌)分离株的分析
- 阪崎肠杆菌是影响婴幼儿配方奶粉安全的主要致病菌之一,FAO/WHO把阪崎肠杆菌列为婴儿配方奶粉中的A类致病菌。阪崎肠杆菌原称黄色阴沟肠杆菌,直到1980年才被认为是一个新的菌种,并以日本微生物学家——Riichi Sak...
- 徐晓可吴清平张淑红张菊梅杨小鹃董晓晖
