薛惠文
- 作品数：26 被引量：29H指数：3
- 供职机构：甘肃农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金甘肃省中青年科技研究基金国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：农业科学文化科学轻工技术与工程自然科学总论更多>>
- 甘肃省及周边地区畜禽屠宰及市售环节沙门菌的分离鉴定及生物学特性分析
- 2024年
- [目的]为合理防控沙门菌感染,本试验针对甘肃省及周边地区畜禽屠宰及市售环节沙门菌的感染情况开展研究。[方法]通过细菌分离培养、生化试验及分子生物学方法进行细菌分离鉴定,采用玻片凝集法和多位点序列分型(MLST)确定沙门菌血清型。采用结晶紫染色定量法评价分离株生物被膜形成能力,通过药敏试验检测分离菌对常用抗菌药的敏感性,评估4种市售消毒剂对沙门菌的灭菌效果,并确定其最小抑菌浓度(MIC)。[结果]细菌分离培养结果显示,疑似沙门菌分离株在BS平板上菌落呈黑色有金属光泽、棕褐色或灰色;在XLD平板上菌落有光泽且中心呈黑色,或呈现全部黑色的菌落;镜检显示为革兰阴性短杆菌。生化鉴定结果显示,分离菌硫化氢、葡萄糖、鸟氨酸、赖氨酸脱羧酶反应结果呈阳性;尿素酶、氰化钾、乳糖、蛋白胨水反应结果呈阴性。PCR扩增沙门菌特异性基因invA获得大小约为284 bp的目的条带,共分离到95株沙门菌,均属于肠道沙门菌的3种血清型——鼠伤寒沙门菌、德尔卑沙门菌、里森沙门菌。多位点序列分型共鉴定出3种,分别为ST34、ST469、ST40型。所有分离株均可形成生物被膜。药敏试验结果显示,所有菌株对米诺环素、万古霉素完全耐药,对阿米卡星、头孢曲松、卡那霉素、头孢唑啉、头孢氨苄、庆大霉素等敏感性较强,75.78%的菌株具有多重耐药性。4种消毒剂对分离株MIC存在差异,0.2%甲醛溶液的MIC为0.125~0.25 mg/mL,0.2%苯扎溴铵的MIC为0.0625~0.125 mg/mL,0.5%碘溶液的MIC为0.3125~0.625 mg/mL,2%氢氧化钠的MIC为1.25~2.5 mg/mL。[结论]德尔卑沙门菌、鼠伤寒沙门菌和里森沙门菌是当前屠宰场中沙门菌的主要血清型,具有生物被膜形成能力和多重耐药性,给公共卫生带来很大威胁。本研究为加强甘肃省及周边地区屠宰场及市售环节卫生管理提供科学依据。
- 马永辉曹青范子秋赵学慧芝吉马金锐何曾文张浩浩邓静崇倩张坤中宋维丽苟惠天薛惠文
- 关键词：沙门菌屠宰场生物被膜
- 一种基于聚合酶螺旋反应检测猫细小病毒的引物组、试剂及其方法
- 本发明公开了一种基于聚合酶螺旋反应检测猫细小病毒的引物组、试剂及其方法，所述引物组包括特异性引物PSR‑FPVF和PSR‑FPVR，加速引物PSR‑FPVF FJ和PSR‑FPVF RJ，特异性引物PSR‑FPVF的核苷...
- 魏衍全刘金波张勇薛惠文马永华杨孝朴武小椿
- 文献传递
- 牛支原体NOX2的原核表达及黏附特性被引量：7
- 2020年
- 旨在探究牛支原体(Mycoplasma bovis,Mb)NADH氧化酶NOX2的生物学功能,本研究参照GenBank中Mb湖北分离株(Mb Hubei-1 strain)nox2基因序列设计引物,应用PCR扩增获得Mb临洮分离株的nox2基因,在测序及序列优化的基础上,构建原核表达载体pET-nox2,并在大肠杆菌Rosetta(DE3)中诱导表达,进而对表达产物rMbNOX2的酶促活性、免疫原性,NOX2在Mb内的分布,rMbNOX2抗血清的补体介导体外杀菌活性和对Mb黏附宿主细胞的抑制活性进行了分析。结果表明,Mb临洮株nox2基因全长1350 bp,与GenBank中已知序列的Mb nox2基因序列比较,除Mb JF4278株相似性为97.93%外,其余均为99.93%。SDS-PAGE结果显示,优化的nox2基因在大肠杆菌中成功表达,重组蛋白rMbNOX2相对分子质量约为67 ku,且具有良好的酶促活性;ELISA与Western blot结果显示,rMbNOX2具有良好的免疫原性,且Mb NOX2在细胞浆中的分布多于细胞膜;补体介导的体外杀菌试验及黏附抑制试验证实,rMbNOX2抗血清具有明显的补体介导杀支原体活性,并可有效抑制Mb对宿主细胞的黏附。本研究为深入探讨Mb NOX2生物学功能奠定了基础。
- 包世俊朱彩宏邢小勇丁小琴温峰琴武小椿薛惠文
- 关键词：牛支原体原核表达功能分析
- 噬菌体内溶素在食品中的应用进展
- 2024年
- 耐药性细菌毒株的出现给食品安全领域带来严重的威胁及挑战。噬菌体内溶素是双链DNA噬菌体在复制后期产生的一种水解酶,可以裂解细菌细胞壁的肽聚糖成分。在控制食源性致病菌时噬菌体内溶素的应用不仅安全、无残留,而且不易产生抗性。系统介绍了噬菌体内溶素的相关结构特点及裂解过程,综述了噬菌体内溶素在控制食源性致病菌污染方面最新的研究进展及应用情况,并对未来在食品安全方面的应用进行了展望。
- 赵学慧曹青宋维丽苟惠天薛惠文
- 关键词：噬菌体食源性致病菌食品安全抗生素
- 产单核细胞李氏杆菌噬菌体的应用研究进展
- 2024年
- 产单核细胞李氏杆菌是一种常见的食源性致病菌,其致死率高达30%。该菌能够在高盐度、高酸度和冷藏温度等极端条件下存活和增殖,对人畜健康构成了重大威胁。然而抗生素的滥用导致药物残留和多重耐药性等问题的出现,从而使得李氏杆菌病的防治异常困难。噬菌体相关生物制剂的发展为解决以上问题提供了可行方案。本文综述了李氏杆菌噬菌体在食品保鲜、生物检测、基因工程等方面的应用,同时还探讨了噬菌体与宿主之间的互作机制,旨在为李氏杆菌噬菌体在食品污染防控中提供一定的理论依据。
- 崇倩赵学慧曹青薛惠文苟惠天
- 关键词：李氏杆菌噬菌体食品污染生物检测
- 用于兽药残留检测过程中肉品前处理的快速萃取装置
- 本实用新型公开了用于兽药残留检测过程中肉品前处理的快速萃取装置，涉及到萃取领域，包括底箱，所述底箱的顶侧转动安装有转动箱，所述转动箱内固定套接有固定板，所述转动箱的周侧外壁固定安装有多个离心管。本实用新型中，通过添加漏斗...
- 魏衍全包世俊张勇韦文娟薛惠文祁国军
- 文献传递
- 甘肃河西地区肉羊肌肉和肝肾组织中抗菌药物残留的检测
- 2023年
- 为筛选和调查甘肃省河西地区羊肉产品中抗微生物药物残留类别,测定与分析其残留现状,以河西地区4个市肉羊可食组织(肌肉、肝、肾)为研究对象,利用兽药残留检测试纸条初步筛查7大类28种抗微生物药物残留类别和种类,再以液相色谱串联质谱法(LC-MS/MS)测定初筛阳性样品中药物残留量,并进行统计学分析。初筛结果显示,129份样品中7类抗微生物药物阳性检出率44.19%;肌肉、肝、肾检出率分别为6/39(15.38%)、47/51(92.16%)、4/39(10.26%);结合当地常用兽药确定了喹诺酮类(恩诺沙星、环丙沙星、氧氟沙星)、氨基糖苷类(庆大霉素)、大环内酯类(泰乐菌素、替米考星)3类6种抗微生物药物。LC-MS/MS测定结果显示,检出药物类别与初筛结果一致;肌肉和肝中替米考星检出率最高,平均残留量分别为1.5633μg/kg、14.5187μg/kg,肾中庆大霉素残留量最高,达到133.2138μg/kg;6种抗微生物药物检出率差异不显著(P>0.05);肌肉、肝、肾中3类组织中药物检出率差异显著(P<0.05);酒泉、张掖、金昌3地肉羊产品以庆大霉素检出率最高(27.27%、33.33%、16.67%),武威肉羊产品以泰乐菌素和替米考星检出最为突出(33.33%),但4市之间差异不显著(P>0.05);恩诺沙星、环丙沙星、替米考星及泰乐菌素残留量符合GB 31650,合格率为100%;2份肌肉样品庆大霉素残留量超标,合格率为98.45%;20份样品检出的氧氟沙星,为食品动物禁用药物,合格率为84.50%。研究结果可为羊肉食品中兽药残留监测、筛选和精准识别提供科学依据,为确保羊肉质量安全提供数据支持。
- 宋晨格代魏衍全苟惠天李天昊委慧玲齐玉梅田常青史文静祁国军薛惠文张勇
- 关键词：肉羊肌肉药物残留
- 用于重金属检测过程中肉品前处理的湿法消解装置
- 本实用新型涉及检测技术领域，具体涉及用于重金属检测过程中肉品前处理的湿法消解装置，包括圆壳和圆板，所述圆壳的顶面不封闭设置，所述圆壳的内腔活动连接有圆板。本实用新型通过设置有加注机构和圆壳，使用时将氧化性强酸通过阀门加注...
- 魏衍全包世俊张勇韦文娟薛惠文祁国军
- 产单核细胞李氏杆菌内化素G单克隆抗体的制备及双抗体夹心ELISA方法的建立
- 2024年
- 本研究旨在建立一种快速检测产单核细胞李氏杆菌的方法。通过PCR扩增产单核细胞李氏杆菌(LM)内化素G(InlG)基因,构建pET-32a-InlG重组表达载体,通过诱导表达获得InlG重组蛋白,将其纯化后免疫小鼠(100μg·只^(-1)),经细胞融合、克隆和筛选共获得了3株阳性杂交瘤细胞株,分别命名为1D2、1D2-1和2H10。经鉴定,其分泌抗体亚型均为IgG 1。利用制备的1D2-1作为捕获抗体,产单核细胞李氏杆菌兔多抗作为检测抗体,初步建立检测产单核细胞李氏杆菌的双抗体夹心ELISA方法。Western blot结果显示3株单克隆抗体(mAb)与InlG均可发生特异性反应。双抗体夹心ELISA方法的特异性试验结果显示,与沙门菌、大肠杆菌、枯草杆菌、白色葡萄球菌和柠檬色葡萄球菌均不发生反应。灵敏度试验结果显示,该方法检测LM纯培养物的检测限为1.0×10^(6)CFU·mL^(-1)。重复性试验结果显示,各组变异系数在5%~10%之间(<10%)。综上,本研究利用抗内化素G蛋白的mAb和兔多抗建立了双抗体夹心ELISA方法,该方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,可用于产单核细胞李氏杆菌感染的快速诊断检测。
- 马金锐史文静田常青董志杰赵学慧芝吉曹青魏衍全宋维丽薛惠文苟惠天
- 关键词：单克隆抗体酶联免疫吸附试验
- 羊肉组织中6种抗微生物药物残留检测的HPLC-MS/MS方法建立
- 2023年
- 【目的】为了对羊肉及其副产品中抗微生物药物残留进行快速痕量检测,优化检测技术,建立羊可食组织中恩诺沙星、环丙沙星、氧氟沙星、庆大霉素、替米考星、泰乐菌素6种药物残留检测的高效液相色谱串联质谱法(HPLC-MS/MS)。【方法】对0.1%甲酸乙腈和0.1%甲酸甲醇2种不同药物提取液进行了对比;以动物性食品中氟喹诺酮类、氨基糖苷类和大环内酯类药物检测国家标准为参考,比较HLB和C_(18)2种固相萃取柱对6种目标药物的净化效果;同时,分别用0.1%甲酸水、乙腈、0.1%甲酸乙腈、甲醇、0.1%甲酸甲醇作为洗脱液对提取净化后的样品进行洗脱,对比交叉组合的提取和洗脱效果。将建立方法应用于实际样品检测,并与国家标准检测方法进行对比和统计分析。【结果】确定了以0.1%甲酸乙腈提取30 min,HLB固相萃取柱净化,0.1%甲酸甲醇洗脱时,恩诺沙星、环丙沙星、氧氟沙星、庆大霉素、替米考星、泰乐菌素6种药物质谱信息捕捉准确,色谱分离效果良好,在限定浓度范围内标准曲线回归系数R2均大于0.99,在5、20、50μg/kg 3个加标浓度下回收率为73.3%~114.0%,相对标准偏差(n=6)1.01%~13.01%。6种药物在羊3种可食组织中检出限(LOD)0.05~1.2μg/kg,定量限(LOQ)0.16~3.8μg/kg,均低于现行国家标准中规定的该类药物残留检出限。单因素方差分析结果显示,方法与国家标准检测方法在检测结果上差异不显著(P>0.05)。【结论】建立了羊可食组织中恩诺沙星、环丙沙星、氧氟沙星、庆大霉素、替米考星、泰乐菌素药物残留检测的高效液相色谱串联质谱法,该方法灵敏、准确、高效,可为羊肉及其副产品中抗微生物药物残留监测、筛选和精准识别提供技术支撑。
- 宋晨张勇张浩浩芝吉李天昊委慧玲田常青薛惠文苟惠天
- 关键词：高效液相色谱串联质谱法
