刘钊
- 作品数：36 被引量：64H指数：3
- 供职机构：贵州大学动物科学学院更多>>
- 发文基金：贵州省农业科技攻关项目贵州省农业攻关项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 猪圆环病毒1型反向遗传操作系统的初步构建被引量：3
- 2014年
- 为构建猪圆环病毒1型的反向遗传操作系统,试验参考GenBank中已发表的PCV1序列,设计1对特异性引物,应用PCR方法扩增PCV1全长基因组,将其定向克隆至pcDNA3.1(+)真核表达载体中,并对其进行PCR、双酶切鉴定及DNA序列测定;将构建好的重组质粒转染到PK-15细胞中,经3次连续传代后,用PCR方法检测转染后盲传细胞中PCV2核酸,经测序鉴定所拯救出的病毒与亲本病毒核苷酸同源性为100%。结果表明:构建的PCV1感染性克隆具有感染性。PCV1反向遗传操作系统的成功建立为进一步研究PCV基因组的功能及新型疫苗的研发奠定了基础。
- 王伟丞曾智勇汤德元刘钊
- 关键词：猪圆环病毒1型PCR双酶切感染性克隆
- 猪流行性腹泻病毒的分离及其M基因的生物信息学分析被引量：3
- 2016年
- 为了解贵州猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)的变异情况,对分离PEDV的M基因进行了克隆测序和生物信息学分析。结果表明:分离的PEDV株(用N-GZ表示)与贵州省动物疫病研究室曾报道的PEDV株(用GZ表示)位于同一进化分支,与疫苗株CV777处于不同进化分支。N-GZ株与GZ株M基因的核苷酸序列相似性为98.5%,表明其亲缘关系较近,与CV777疫苗株的亲缘关系稍远。多重比较发现,N-GZ株与CV777株M蛋白的抗原表位区存在3个氨基酸的差异,与GZ株相比存在2个氨基酸的突变。M基因是PEDV的保守基因,但N-GZ株M基因在抗原表位区存在一定程度突变。
- 代振江梁海英曾智勇汤德元王伟丞刘钊
- 关键词：PEDVM蛋白生物信息学分析
- 猪圆环病毒1型贵州分离株全基因组的克隆与序列分析被引量：2
- 2014年
- 为了解猪圆环病毒（PCV）在贵州的分子流行病学和遗传变异情况，同时为其深入研究提供参考，应用PCR方法对采自贵阳、都匀和遵义地区疑似断奶仔猪多系统衰竭综合征的病料进行 PCV1全基因组的扩增、克隆和测序分析。结果表明：扩增克隆的4株PCV1基因组全长均为1759 bp，4株PCV1间的核苷酸序列相似性在99．1％-99．7％，与国内外其他PCV1参考毒株的核苷酸序列相似性均在98．1％以上，与参考毒株PCV2的核苷酸序列相似性在77％左右；4株PCV1与国内其他PCV1毒株位于同一进化分支， PCV1国外毒株则位于另一进化分支。4株PCV1和参考毒株 PCV2的 ORF1、ORF2推导氨基酸序列相似性分别为86．2％-87．8％和64．0％-68．2％，4株PCV1与PCV2的ORF1在复制起始区和其他功能区高度保守，可为构建嵌合病毒PCV1-2提供骨架。
- 王伟丞梁海英曾智勇汤德元刘钊
- 关键词：猪圆环病毒1型基因组PCV1
- 一例猪流行性腹泻的诊治被引量：1
- 2015年
- 猪流行性腹泻（Porcineepidemicdiarrhea，PED）是由猪流行性病毒（PEDV）引起的接触性肠道传染病，其特征为初生仔猪呕吐、腹泻、脱水。近几年来，国内PED呈高发趋势，特别是哺乳仔猪病死率高达100％，给我国养猪业造成了重大经济损失。
- 代振江刘钊曾智勇汤德元梁海英王伟丞
- 关键词：猪流行性腹泻诊治肠道传染病初生仔猪哺乳仔猪PED
- 竹鼠链球菌和大肠杆菌混合感染的诊治被引量：1
- 2015年
- 2014年7月，贵州省安顺市某竹鼠养殖基地送检3只发病竹鼠，1只死亡，2只病危。病危竹鼠1只以后脚无力、拖尾、麻木、僵硬症状为特征，另1只以拉稀、被毛粗乱症状为特征。本试验对该竹鼠养殖基地送检的竹鼠病料进行临床症状观察、解剖病理诊断与细菌学检测，确诊为链球菌与大肠杆菌混合感染。现将诊断结果报道如下。
- 李达汤德元曾智勇王洪光王伟丞韦冠东代振江刘钊
- 关键词：大肠杆菌链球菌竹鼠诊治养殖基地病理诊断
- PCV-2 GZ-BJJS2015株感染性克隆质粒的构建被引量：1
- 2018年
- 为了解贵州地区猪圆环病毒2型（PCV-2）的遗传变异情况,丰富贵州省PCV-2的病毒库,试验应用PCR反向遗传操作技术构建感染性克隆质粒,从送检的病毒血症样品中拯救获得1株PCV-2毒株,将其命名为PCV-2 GZ-BJJS2015,并进行测序及比对分析。结果表明：该病毒基因组大小为1 767 bp,属于PCV-2b型;与参考株pmws（AF027217）相比,其ORF5在1 042位缺失1个碱基T,ORF9在第92位发生基因突变,致使ORF9不能编码蛋白;ORF5与病毒毒力有一定关系,其变异可能会影响毒株毒力,ORF9不编码蛋白的意义有待考究。根据强弱毒株特征性氨基酸位点的差异比较结果,可初步推测该毒株为PCV-2强毒株。
- 咸文梁海英曾智勇王彬刘钊徐国叶百川张爱琼何小莉
- 关键词：猪圆环病毒2型反向遗传操作技术病毒拯救
- 冬春两季应加强猪流行性腹泻的综合防控被引量：2
- 2015年
- 冬春两季常是"冬痢"的高发季节,近2年来该病呈现出仅以猪流行性腹泻病毒(PEDV)感染为主,而非之前的传染性胃肠炎病毒(TGEV)或TGEV和PEDV共感染为主,临床上主要表现为严重腹泻、脱水和急剧消瘦死亡为主要特征,现已给中国、美国、日本等国家的养猪业造成了巨大的损失,欧盟目前也已责令严防PEDV的传入。尽管该病在我国主要于2012前后呈现暴发流行,现多为散发,但入冬后仍需引起重视,采取积极措施予以综合防控。
- 刘钊曾智勇王伟丞代振江
- 关键词：猪流行性腹泻冬痢
- 应用PCR方法对一起疑似感染猪瘟病毒的检测
- 2014年
- 采用猪繁殖障碍性病毒性疫病六重PCR检测方法对贵州省某猪场送检的疑似感染猪瘟病毒(CFSV)病料进行了猪伪狂犬病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、CFSV和猪流行性乙型脑炎病毒(JEV)的快速检测,结果表明该猪场送检的仔猪同时感染PCV2和PRRSV两种病毒,CFSV检测呈阴性。
- 王伟丞曾智勇汤德元刘钊
- 关键词：PCV2PRRSV
- 猪圆环病毒2型GZ-RH1株基因组遗传特征分析被引量：4
- 2016年
- 为对猪圆环病毒i DNA新型疫苗、基因组遗传变异以及基因组结构与功能等研究提供科学依据,运用相关生物信息学软件对猪圆环病毒2型（PCV2）贵州仁怀分离株（GZ-RH1）的基因组遗传特征进行了分析。结果表明,PCV2GZ-RH1株基因组结构与pmws（AF027217）株相比存在较大差异,其ORF2基因的第696位因碱基T的缺失而导致移码突变,致使其缺失了ORF8和ORF11,ORF5和ORF10终止密码子提前,其他ORF相对较为保守。PCV2GZ-RH1各编码蛋白中除了ORF4和ORF9外,其余都属于亲水性蛋白,且ORF9含有1段信号肽序列。在ORF1和ORF2编码蛋白的磷酸化位点中,ORF1相对较为保守,而ORF2变异较大。ORF1-3所编码的蛋白除均具有各自的蛋白质家族域外,还预测到一些可能具有特殊功能的结构域,如ORF1编码蛋白的NACHT结构域和ORF2编码蛋白的精氨酸富集区。ORF2编码氨基酸位点熵值分析表明,ORF2蛋白氨基酸序列中包含2个高变区,即第53-91位和185-215位。通过构建进化树显示,GZ-RH1分离株系PCV2b亚型。对GZ-RH1株的密码子偏爱性分析表明,相对于大肠杆菌和酵母而言,昆虫细胞更适合于PCV2ORF2基因的体外表达。
- 代振江王伟丞曾智勇汤德元梁海英刘钊
- 关键词：猪圆环病毒2型基因组
- 猪圆环病毒基因组结构与功能研究进展被引量：22
- 2016年
- 猪圆环病毒(PCV)是单链环状DNA病毒,有PCV1和PCV2两种血清型,其中PCV2严重危害着世界养猪业。PCV2因其严重的危害性和精简而高效的基因组结构引起众多国内外专家学者的广泛研究,本文参考NCBI上公布的PCV2序列绘制了PCV2基因组结构图谱,就相关基因的结构和功能进行综述,并就与病毒复制、病毒免疫原性、病毒致病力等功能相关的基因进行了归纳和总结,以期能为PCV2分子生物学和新型疫苗的研究提供参考。
- 代振江王伟丞曾智勇汤德元梁海英刘钊徐国叶百川
- 关键词：猪圆环病毒基因组结构蛋白质功能
