李金春 作品数:34 被引量:89 H指数:5 供职机构: 中国肉类食品综合研究中心 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 国家自然科学基金 北京市科技计划项目 更多>> 相关领域: 轻工技术与工程 农业科学 更多>>
一种基于双重ddPCR的肉制品中牛源性成分的定量分析方法 被引量:5 2022年 将低价肉类原料掺入高价肉制品是一种典型的肉类掺假方式,为准确鉴别牛肉及牛肉制品的真伪,建立一种基于双重微滴式数字聚合酶链式反应(droplet digital polymerase chain reaction,ddPCR)的牛源性成分定量分析方法。通过对14种动物的Beta-actin单拷贝基因序列进行分析,设计牛源性特异性引物、探针与动物源性成分通用引物、探针并建立双重ddPCR体系,推导出牛源性成分质量与其特异性扩增拷贝数之间的计算公式,对牛源性成分进行定量检测该方法得到牛源性成分质量M_(牛)(mg)与其特异性扩增拷贝数浓度C_(牛)(copies/μL)之间的计算公式为M_(牛)=0.033C_(牛)+2.37,对已知牛肉质量的混合肉样品与不同部位的牛肉样品进行检测,结果显示牛肉定量检测值与实际质量基本一致。同时拷贝数相对含量可辅助判断肉制品中是否存在非牛源性的其他动物源性成分掺假。对市售样品的检测发现,存在目标肉样含量不达标以及不同程度的动物源性成分等掺假现象,说明该检测方法可为牛肉制品掺假量化判定和混合源性产品分级鉴定提供技术支撑。 熊苏玥 李家鹏 李金春 韦忆萱 许随根 刘睿茜 陈曦 王守伟 曲超 乔晓玲一种快速成熟的无骨发酵火腿及其加工工艺 本发明涉及食品加工技术领域,具体涉及一种快速成熟的无骨发酵火腿及其加工工艺。本发明中的加工工艺,原料腿经过去骨、腌制、烟熏后,进行发酵后制得产品。本发明在保证了发酵火腿的风味、色泽、保质期的基础上,含盐量低,缩短了发酵时... 李金春 杨君娜 王守伟 李家鹏 许随根 陈文华 黄鑫 陈曦 曲超 乔晓玲 郭雅文献传递 多重PCR同时检测食品中4种细菌与常见霉菌 被引量:13 2019年 建立一种同时检测食品中金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特氏菌、沙门氏菌、大肠杆菌O157:H7以及霉菌的多重聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测方法。根据金黄色葡萄球菌的耐热核酸酶基因(nuc)、沙门氏菌的侵袭正调节蛋白基因(hilA)、大肠杆菌O157:H7鞭毛基因(flic)、单核细胞增生李斯特氏菌的毒力调控蛋白基因(prfA)及霉菌18S rRNA基因V5区分别设计5对特异性引物,并对PCR扩增反应体系和扩增条件进行优化,确定获得特异性良好的PCR扩增产物。而后在37℃对人工污染致病菌的香肠、面包和豆腐进行增菌培养,5种致病微生物在20 h内的检出限均可达到100 CFU/25 g。本实验建立的多重PCR检测方法适用于食品中4种细菌与常见霉菌的同时检测,相较于传统检测方法,具有快速、简便、特异性高的优点。 熊苏玥 米瑞芳 陈曦 戚彪 李金春 李家鹏 乔晓玲 王守伟关键词:食源性致病菌 霉菌 牲畜宰后劣质肉肉色测定装置及劣质肉检测方法 本发明涉及肉制品检测领域,尤其涉及一种牲畜宰后劣质肉肉色测定装置及劣质肉检测方法。该牲畜宰后劣质肉肉色测定装置中,将样品放置在暗箱中的样品台上后,通过CCD摄像机和镜头获取样品和比色板的图像,然后将图像信息传递至肉色判定... 田寒友 邹昊 刘文营 李金春 李家鹏 乔晓玲文献传递 应用多重PCR快速鉴定自然发酵肉制品中6种葡萄球菌 被引量:4 2018年 肉葡萄球菌(Staphylococcuscarnosus)、木糖葡萄球菌(S.xylosus)、腐生葡萄球菌(S. saprophyticus)、表皮葡萄球菌(S. epidermidis)、马胃葡萄球菌(S. equorum)和松鼠葡萄球菌(S. sciuri)是发酵肉制品中常见的葡萄球菌,为准确、快速地检测和鉴定这些菌种,建立6种葡萄球菌的多重聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)方法并进行验证。以上述菌种的gap、rpoB、SodA和SNc为靶基因,设计和筛选菌种特异性引物6对,优化PCR体系,建立6种葡萄球菌的多重PCR鉴定方法。实验结果显示多重PCR的基因组DNA检测灵敏度可达到4 pg,活菌检测灵敏度可达到2×10~2 CFU;采用建立的多重PCR方法对传统肉制品中分离的8株葡萄球菌进行鉴定,结果与16S rDNA序列分析、生理生化鉴定结果一致。建立的多重PCR方法具有较高的种间特异性,可快速、准确地用于发酵肉制品中肉葡萄球菌、木糖葡萄球菌、表皮葡萄球菌、马胃葡萄球菌、松鼠葡萄球菌和腐生葡萄球菌的检测和鉴定,具有较好的应用前景。 许随根 陈曦 李家鹏 李金春 杨君娜 熊苏玥 戚彪 米瑞芳 黄鑫 乔晓玲 王守伟关键词:多重PCR 葡萄球菌 发酵肉制品 一种基于多重实时荧光聚合酶链式反应熔解曲线分析的肉及肉制品掺假鉴别方法 被引量:10 2017年 为实现肉及肉制品掺假快速鉴别,分别以猪、牛线粒体DNA的COXⅠ,绵羊、山羊、狗、狐狸、貉线粒体DNA的16S rRNA及鸡、鸭线粒体DNA的12S rRNA基因为靶位点,设计扩增产物熔解温度(T_m值)具有显著性差异的特异性引物,建立一种用于快速鉴别肉或肉制品中猪、牛、绵羊、山羊、鸡、鸭、狗、狐、貉9种源性成分的5重实时荧光聚合酶链式反应熔解曲线分析方法,通过特异性、灵敏度及市售样品的检测,对该方法进行检验和评价。结果表明:方法具有良好的特异性及灵敏度,单物种DNA检出限为0.001~1 ng,多物种混合DNA检出限均为0.1 ng,通过市售样品检测表明该方法可用于实际样品(包括生鲜样品和熟制样品)掺假的快速鉴别。 周彤 李家鹏 李金春 乔晓玲 黄鑫 陈曦 杨君娜 郭雅关键词:熔解曲线分析 SYBR 动物源性成分 一种同步检测肉或肉制品中14种动物源性成分的引物组合及其应用 本发明涉及食品检测技术领域,公开了一种同步检测肉或肉制品中14种动物源性成分的引物组合、方法和试剂盒。本发明采用10对特异性引物,基于2次5重PCR反应和微芯片电泳技术鉴别肉或肉制品中是否含有猪、牛、绵羊、山羊、鸡、鸭、... 李金春 周彤 李家鹏 许随根 杨君娜 黄鑫 米瑞芳 熊苏玥 乔晓玲文献传递 牲畜宰后劣质肉肉色测定装置及劣质肉检测方法 本发明涉及肉制品检测领域,尤其涉及一种牲畜宰后劣质肉肉色测定装置及劣质肉检测方法。该牲畜宰后劣质肉肉色测定装置中,将样品放置在暗箱中的样品台上后,通过CCD摄像机和镜头获取样品和比色板的图像,然后将图像信息传递至肉色判定... 田寒友 邹昊 刘文营 李金春 李家鹏 乔晓玲文献传递 葡萄糖添加量对色拉米生产过程中主要栅栏因子的影响 2014年 为了提高发酵香肠生产的安全性,本实验针对不同的葡萄糖添加量对色拉米生产过程中pH值和水分活度两个重要栅栏因子以及乳酸菌数和大肠杆菌数的影响进行了研究。结果表明,随着葡萄糖添加量的增多,色拉米pH值下降越快,终点pH值越低;水分活度也随着葡萄糖添加量的增多下降越快;发酵期葡萄糖添加量越多,乳酸菌生长速度越快,进入干燥期后,葡萄糖添加量对色拉米中乳酸菌数的变化没有显著影响;葡萄糖添加量越高,未检出大肠杆菌时间越早。因此,在可接受的酸度和口感范围内,适当增加葡萄糖的添加量,可有效提高色拉米的食用安全性。 周彤 李家鹏 邹昊 潘晓倩 田寒友 李金春 陈文华关键词:葡萄糖 PH值 水分活度 乳酸菌 当雄高山牦牛源性成分的鉴别方法 本发明公开了当雄高山牦牛源性成分的鉴别方法。本发明基于11个线粒体SNP位点组合对当雄高山牦牛与其他品种牦牛进行鉴别与区分。本发明采用8对当雄高山牦牛的特异性引物,基于同时进行的2个三重与1个二重实时荧光定量PCR(RT... 王守伟 韦忆萱 李金春 李家鹏 刘睿茜 曲超 郭雅 刘博文