杨扬
- 作品数：18 被引量：21H指数：3
- 供职机构：第二军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金“重大新药创制”科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 肝癌细胞通过Fas/FasL途径触发T淋巴细胞的凋亡被引量：7
- 2001年
- 目的 :研究肝癌细胞表面 Fas/ Fas L系统的变化及对其逃避机体免疫监控的影响。 方法 :采用流式细胞术和RT- PCR检测肝癌细胞株 Hep G2、Hep3B和 PL C/ PRF/ 5 Fas和 Fas L的表达 ;观察化疗药物争光霉素诱导肝癌细胞 Fas L表达及 Fas L表达上调后的肝癌细胞触发淋巴细胞株 Jurkat细胞凋亡的作用。结果 :Hep G2、Hep3B和 PL C/ PRF/ 5肝癌细胞株Fas表达均阴性 ;Hep G2 Fas L m RNA的表达为阴性 ,而 Hep3B和 PL C/ PRF/ 5 Fas L m RNA的表达均阳性。经争光霉素(0 .6 mg/ m l)诱导后 ,上述肝癌细胞 Fas的表达无明显变化 ,而其 Fas L的表达却增加 ,与 Jurkat细胞混合孵育则触发后者发生显著性凋亡。结论 :肝癌细胞可能一方面降低或不表达 Fas而对 Fas介导的凋亡耐受 ,另一方面又增强自身 Fas L的表达以诱发与之接触的 T淋巴细胞凋亡 ,在完成免疫逃避的同时 ,可对周围的
- 梁云陆斌李晓冬王华菁崔贞福李博华胡慧红杨扬郭亚军刘彦君
- 关键词：肝肿瘤T淋巴细胞FAS/FASL系统
- 靶向VEGF双特异性抗体及其用途
- 本发明在Bevacizumab及全人源单克隆抗体B<Sub>5</Sub>E<Sub>3</Sub>基础上构建一个针对VEGF两个表位的双特异性抗体Bev‑B<Sub>5</Sub>E<Sub>3</Sub>BsAb，实...
- 李博华汪超孟艳春王华菁杨扬
- 文献传递
- 抗CD3人源化抗体恒定区突变体的制备及其生物学活性被引量：1
- 2004年
- 为了降低抗CD3人源化抗体hu12F6对T细胞的激活作用以克服首剂效应 ,构建了恒定区特定位点突变的hu12F6重链表达载体 ,将其与hu12F6的轻链表达载体共转染CHO细胞 .ELISA和RT PCR证实 ,恒定区特定位点突变的人源化抗体hu12F6m在CHO细胞中获得了表达 .竞争抑制实验证实hu12F6m具有与原鼠源抗体及hu12F6相似的特异性和亲和力 .增殖实验表明hu12F6m对T细胞的刺激作用明显弱于hu12F6 .实验结果为深入探讨hu12F6m的生物学特性奠定了基础 .
- 李博华王皓杨扬陆斌王华菁张大鹏钱卫珠季军捷李晓东郭亚军
- 关键词：CD3人源化抗体定点突变首剂效应
- 人IgE分子Fc段受体结合区的表达、纯化及功能鉴定
- 2011年
- 利用哺乳动物细胞表达、纯化具有生物学功能的人IgE Fc段与受体结合的功能区(Fcε2-4)。以CRL8033细胞株为模板,PCR扩增人IgE Fcε2-4的cDNA并构建到真核表达载体pcDNA3.1(+)中,脂质体转染CHO-K1细胞并以G418加压筛选。利用有限稀释法、Dot-blot及FACS筛选出高表达目的蛋白的稳定细胞株并进行扩增。CHO-K1培养上清经偶联抗IgE抗体(Omalizumab)的亲和层析柱分离纯化后,聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定纯度,并采用表面等离子共振(SPR)法对该蛋白与其抗体的亲和力进行检测。结果表明,SDS-PAGE显示最终获得了纯度高于95%的人IgE Fcε2-4蛋白,呈二聚体状态,分子量约78kD,SPR检测结果显示,该蛋白与Omalizumab抗体特异性高亲和力结合(kD值约3.8nmol/L)。提示,本实验获得了结构及糖基化修饰正确的人IgE Fcε2-4结构域,为进一步研究其功能及探索新的抗体药物奠定了基础。
- 李晶郭怀祖杨扬钱卫珠张大鹏薛静亚朱磊王皓
- 关键词：IGE克隆表达CHO
- 针对乙肝表面蛋白的双特异性抗体及其用途
- 本发明提供了一种针对乙肝表面抗原蛋白的双特异性抗体A<Sub>3</Sub>B<Sub>5</Sub>‑BsAb，该双特异性抗体由抗体A<Sub>3</Sub>D<Sub>5</Sub>以及抗体B<Sub>5</Sub>...
- 李博华孟艳春王华菁杨扬于晓杰
- 文献传递
- 靶向VEGF双特异性抗体及其用途
- 本发明在Bevacizumab及全人源单克隆抗体B<Sub>5</Sub>E<Sub>3</Sub>基础上构建一个针对VEGF两个表位的双特异性抗体Bev-B<Sub>5</Sub>E<Sub>3</Sub>BsAb，实...
- 李博华汪超孟艳春王华菁杨扬
- 抗CTLA-4嵌合抗体的制备及生物学活性鉴定被引量：1
- 2012年
- 制备新型抗CTLA-4人鼠嵌合抗体并进行活性鉴定。通过杂交瘤技术获得高亲和力小鼠抗人CTLA-4单克隆抗体22G11和16C11;利用分子克隆技术将鼠源抗体可变区基因与人源抗体恒定区拼接后,最终通过CHO-K1工程株细胞表达高亲和力抗CTLA-4嵌合抗体。经SDS-PAGE电泳显示最终获得了纯度高于90%的CTLA-4嵌合抗体c22G11和c16C11,抗原结合活性结果表明两株嵌合抗体都能很好地与Jurkat细胞结合,竞争抑制实验表明它们都能与各自对应的鼠源抗体竞争。据此,本实验获得了两株抗人CTLA-4胞外区的高亲和力和特异性嵌合抗体。
- 许静李晶杨扬郭怀祖钱卫珠张大鹏王皓
- 关键词：CTLA-4单克隆抗体免疫原性嵌合抗体
- 双功能VEGF受体融合蛋白突变体的生物学活性研究被引量：1
- 2010年
- 为了研制出能同时阻断肿瘤血管与淋巴管生成的抗肿瘤制剂,我们设计构建了同时包含VEGFR1和VEGFR3功能域的基因工程双功能融合受体(VEGFRIg)。为了改善VEGFRIg的血浆半衰期以增强其抗肿瘤疗效,我们选择VEGFRIg的3个碱性氨基酸进行突变诱导获得了双功能受体的突变体VEGFRIgm。研究结果表明,VEGFRIgm具有与VEGFRIg相似的与VEGF-A和VEGF-C结合的能力,能有效地抑制VEGF-A诱导的人脐静脉内皮细胞增殖及VEGF-C诱导的人皮肤淋巴内皮细胞增殖。进一步研究表明,VEGFRIgm在小鼠体内的半衰期比VEGFRIg显著延长,提示其可能发展成为一个新型的高效抗肿瘤药物。
- 王韬张大鹏杨扬许静石金平钱卫珠李博华魏于全王皓
- 关键词：血管内皮生长因子受体血管内皮细胞淋巴管内皮细胞半衰期抗肿瘤活性
- 针对乙肝表面蛋白的双特异性抗体及其用途
- 本发明提供了一种针对乙肝表面抗原蛋白的双特异性抗体A<Sub>3</Sub>B<Sub>5</Sub>-BsAb，该双特异性抗体由抗体A<Sub>3</Sub>D<Sub>5</Sub>以及抗体B<Sub>5</Sub>...
- 李博华孟艳春王华菁杨扬于晓杰
- 一种适用于评价CD20抗体体内外抗肿瘤效应模型的建立
- 2010年
- 研究通过基因转染的方法建立了稳定表达不同水平人CD20分子的小鼠骨髓瘤细胞克隆:CD20高表达(NS1-CD20H)、中表达(NS1-CD20M)和低表达(NS1-CD20L)的NS-1细胞株。利用建立的CD20分子高、中、低表达的NS-1细胞系,我们初步研究了CD20分子表达水平与CD20抗体杀伤活性的关系。实验结果表明,随着CD20分子表达水平的提高,CD20抗体(Rituximab和2F2)的CDC和ADCC作用均相应增强。2F2抗体具有与Rituximab相似的ADCC作用。对于CD20高表达细胞,2F2抗体显示出和Rituximab相似的CDC活性。但对于CD20低表达的NS-1细胞,2F2的CDC活性远强于Rituximab。体内实验结果表明对于荷有NS1-CD20L的小鼠,Rituximab不能显示出抗肿瘤活性,而2F2则具有显著的抗肿瘤作用。由于这两个抗体有相似的ADCC活性,实验结果提示CDC可能是CD20抗体的重要作用机制之一。我们建立的不同程度表达CD20的NS-1细胞克隆可以成为一种新型的CD20抗体活性评价模型,并有助于进一步阐明CD20抗体的作用机制。
- 刘广洛钱卫珠李博华杨扬许静王皓
- 关键词：CD20RITUXIMAB单克隆抗体B细胞非霍奇金淋巴瘤
