胡国明 作品数:11 被引量:27 H指数:3 供职机构: 甘肃农业大学动物医学院 更多>> 发文基金: 甘肃省自然科学基金 广西壮族自治区自然科学基金 甘肃省高等学校基本科研业务费项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 更多>>
天门冬多糖对人工感染鸡传染性支气管炎的治疗试验 被引量:2 2014年 旨在评价复方天门冬多糖注射液对鸡传染性支气管炎的临床治疗效果,为鸡传染性支气管炎临床治疗提供依据。以复方天门冬多糖注射液临床给药剂量筛选试验为基础,分别设置高剂量组、中剂量组、低剂量组、药物对照组、阳性对照组及空白对照组,运用t检验和方差分析法对攻毒前后试验动物的相对体质量及试验结束后免疫器官指数进行统计分析,通过比较各组数据的显著性差异来评价复方天门冬多糖注射液对鸡传染性支气管炎的治疗效果。结果显示,复方天门冬多糖注射液能提高发病鸡的相对增量率,并促进发病鸡的生长发育。说明,复方天门冬多糖注射液对患病鸡的临床治疗效果显著,在实际生产中可以推广应用。 胡国明 胡庭俊 邢小勇 温峰琴 胡永浩关键词:鸡传染性支气管炎 牛支原体武威株脂蛋白P48基因的克隆、原核表达及亚细胞定位 被引量:8 2016年 【目的】验证牛支原体P48蛋白在细胞中的位置,并为后续功能的研究奠定基础.【方法】运用Overlap PCR扩增获得点突变后的牛支原体武威分离株P48基因,并将其克隆至pGEM-T Easy,将测序正确的质粒克隆至表达载体pET-28a中,构建原核表达质粒pET-P48,表达质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),并在IPTG诱导下成功获得融合蛋白表达产物rMbP48,大小约为51ku.重组蛋白纯化后免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体.在分离牛支原体膜蛋白的基础上应用Western-blot及间接ELISA对P48蛋白在细胞中的分布进行分析.【结果】P48蛋白主要存在于牛支原体的膜分离相.全菌免疫荧光试验进一步证实脂蛋白P48位于牛支原体的膜表面.【结论】牛支原体P48蛋白是存在于牛支原体表面的一种具有免疫原性的脂蛋白.本研究为进一步研究P48蛋白的生物学特性及建立高效的牛支原体诊断方法奠定了基础. 胡国明 邢小勇 李娜 苏炜德 温峰琴 项海涛 胡永浩 包世俊关键词:牛支原体 基因克隆 原核表达 亚细胞定位 牛支原体脂蛋白P48单克隆抗体的制备及鉴定 被引量:1 2016年 为制备牛支原体表面脂蛋白P48的单克隆抗体,应用纯化的牛支原体武威株脂蛋白P48基因的原核表达产物免疫BALB/c小鼠,继而取免疫小鼠的脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0融合,经克隆和筛选,获得2株能分泌抗牛支原体脂蛋白P48抗体的杂交瘤细胞融合株,并分别命名为C7及E5。ELISA和W estern-blot检测结果表明,2株单克隆抗体均可与牛支原体特异性地结合,而与牛的其他常见病原菌无任何反应。亚类鉴定结果表明,2株单克隆抗体重链均为Ig G 1,轻链均为λ型。稳定性试验结果表明,2株杂交瘤细胞均可稳定分泌单克隆抗体。本研究结果为建立牛支原体有效的检测方法和深入研究脂蛋白P48的生物学功能奠定了基础。 包世俊 胡国明 邢小勇 郝宝成 薛惠文 伏小平 温峰琴 胡永浩 项海涛关键词:牛支原体 单克隆抗体 杂交瘤 用于牛支原体检测的特异性引物对、检测试剂盒及其使用方法和应用 本发明提供用于牛支原体检测的特异性引物对,所述引物对为:上游引物P48-F:CGAACCTAAAAAGGGTGAATTAGCATCTT;下游引物P48-R:ATTACTGAGTTAATAGCAGCAACTGCAACG。本... 包世俊 胡国明 邢小勇 胡永浩 薛慧文 伏小平 温峰琴文献传递 一株分泌牛支原体单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用 本发明提供一株分泌牛支原体单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用,该杂交瘤细胞株能够产生抗牛支原体的单克隆抗体,并用于检测牛支原体。该杂交瘤细胞株的保藏编号为:CCTCC C2015183,保藏日期为:2015年11月8日。本... 包世俊 邢小勇 胡国明 郝宝成 胡永浩 薛慧文 伏小平 温峰琴基于脂蛋白P48的牛支原体快速检测方法的建立 牛支原体(Mycoplasma bovis)是一种引起牛呼吸道疾病的病原体,通常可以引起肺炎、乳腺炎、关节炎、角膜结膜炎等,成为阻碍养牛业发展的一大重要隐患。随着养牛业的不断发展,牛支原体病的流行范围越来越广,发生频率也... 胡国明关键词:牛支原体 多克隆抗体 单克隆抗体 文献传递 一株分泌牛支原体单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用 本发明提供一株分泌牛支原体单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用,该杂交瘤细胞株能够产生抗牛支原体的单克隆抗体,并用于检测牛支原体。该杂交瘤细胞株的保藏编号为:CCTCC C2015183,保藏日期为:2015年11月8日。本... 包世俊 邢小勇 胡国明 郝宝成 胡永浩 薛慧文 伏小平 温峰琴文献传递 复方天门冬多糖注射液的靶动物(鸡)安全性试验 被引量:2 2014年 【目的】研究复方天门冬多糖注射液对靶动物(鸡)的安全性,为其临床用药提供参考依据。【方法】以鸡为靶动物进行肌肉注射给药,然后对试验鸡的临床症状、体重变化、饲料报酬及血液常规指标、血液生化指标等进行安全性评估,以确定受试药物的最大耐受剂量或耐受范围。【结果】鸡只注射复方天门冬多糖注射液后,能明显增加其日均增重和降低饲料报酬,促进鸡体生长发育,尤其以5倍剂量组(10.0 mL/kg)的效果最佳;在血液常规指标方面,除血小板数呈明显降低趋势外,白细胞数、红细胞数、红细胞压积、血红蛋白含量等指标的变化不明显,且不同处理组间的差异不显著(P>0.05);在血液生化指标方面,注射复方天门冬多糖注射液后1周内各项生化指标呈无规律的升高或降低变化趋势,至给药后第14 d(31日龄),则以5倍剂量组的各项指标较接近于正常水平。【结论】复方天门冬多糖注射液是一种有效的免疫增强剂,能促进鸡体生长发育,且在实际生产应用中具有较高的安全性,其在靶动物(鸡)上的最大耐受剂量为10.0 mL/kg。 胡国明 胡庭俊 邢小勇 温峰琴 胡永浩关键词:饲料报酬 血常规指标 小分子发酵抗菌肽对禽用灭活疫苗抗体水平的影响 2016年 研究小分子发酵抗菌肽对禽用灭活疫苗抗体水平的影响。将免疫增强剂小分子发酵抗菌肽分别添加于正常抗原含量及减量抗原含量的新城疫ND-禽流感(H9 F株)二联灭活苗、禽流感(H5N1亚型Re-6株、Re-7株)二价灭活苗中,分别免疫SPF鸡,同时用不加免疫增强剂的新城疫-禽流感二联灭活疫苗和禽流感二价灭活疫苗免疫SPF鸡作为对照组。通过监测鸡免疫后不同时间的血清抗体水平,发现在抗原用量不变的情况下,实验组比对照组抗体效价均有提高;在抗原用量减少50%的情况下,实验组比对照组抗体效价均有一定的提高。结果提示,小分子发酵抗菌肽对禽用灭活疫苗能起到一定的免疫增强效果。 袁野 李守湖 李浩鹏 包世俊 邢小勇 温峰琴 胡国明 胡永浩关键词:免疫增强剂 抗体滴度 牛支原体肺炎PCR诊断方法的建立及初步应用 被引量:9 2020年 参照GenBank中牛支原体脂蛋白P48基因序列,设计并合成特异性引物Mb-F/Mb-R,建立了牛支原体PCR检测方法,并在扩增条件优化的基础上,对该方法的特异性和灵敏度进行了分析,进而应用建立的方法完成了疑似牛支原体肺炎临床病料的检测。结果显示,建立的PCR方法对牛支原体的核酸样品能扩增出534 bp的特异性目的片段,而对无乳支原体、丝状支原体、大肠杆菌、绿脓杆菌、链球菌、多杀性巴氏杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门菌、肺炎克雷伯氏菌、黏质沙雷氏菌、变形杆菌等牛常见条件病原微生物核酸样品均未见明显的扩增条带,且其可检测出的牛支原体DNA最低浓度约为0.000 002 875μg/mL。对临床样品的检测结果显示,该方法的检出率与与病原分离的符合率为100%。上述结果表明,本研究成功建立了牛支原体PCR检测方法,可用于临床上牛支原体肺炎的快速诊断。 包世俊 胡国明 张阳阳 邢小勇 温峰琴 武小椿关键词:牛支原体 肺炎 PCR