邓光存
- 作品数:84 被引量:269H指数:9
- 供职机构:宁夏大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金宁夏回族自治区自然科学基金宁夏回族自治区教育厅资助项目更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生环境科学与工程更多>>
- 一种提高四合木结实性能的方法
- 本发明涉及一种提高四合木结实性能的方法,其特点是,包括如下步骤:每年四合木返青时,去除四合木植株上的灰尘,选择无风晴朗的天气,对四合木植株依照每平米喷施100ml的用量喷施2-6mg/L细胞分裂素的水溶液,或200-40...
- 吴晓玲邓光存胡天华陈彦云赵忠胜徐莹杨杰张斌王继飞梁军
- 文献传递
- 产气荚膜梭菌β_2-β_1毒素融合基因在大肠杆菌中高效表达条件的优化被引量:1
- 2008年
- 本研究在已获得产气荚膜梭菌β2-β1毒素融合基因表达载体,并在BL21(DE3)中成功表达的基础上,研究了以乳糖为诱导剂在不同条件下对β2-β1重组蛋白诱导表达的影响,并对其表达条件进行了优化。结果表明,重组菌株BL21(DE3)(pXETB2B1)在37℃、菌体诱导密度OD600为1.0、乳糖诱导浓度为0.1 g/L时诱导5 h,目的蛋白的表达效果最好,乳糖则以分批添加的方式为佳。
- 曾瑾王玉炯邓光存高蔚丰
- 关键词:产气荚膜梭菌融合蛋白表达条件优化
- 基因工程菌株BL21(DE3)(pECB-ST1)菌种的限定代次及保存条件试验被引量:2
- 2002年
- 本文对基因工程菌株BL2 1(DE3) (pECB -ST1)菌种的限定代次及保存条件进行了详细研究。实验结果证实 ,基因工程菌株BL2 1(DE3) (pECB -ST1)基础种子体外传至 10代 ,其效力、培养特性均不发生变化 ,表明基因工程菌株BL2 1(DE3) (pECB -ST1)是一株良好的疫苗生产菌株。基因工程菌株BL2 1(DE3) (pECB -ST1)甘油菌种和冻干菌种分别在 2 0℃保存 2年和 3年 ,菌种的数量未明显减少 。
- 邓光存吕玉玲王玉炯许崇波
- 关键词:DE3菌种
- 牛分枝杆菌Ag85B基因的克隆及表达
- 本研究采用PCR技术克隆了牛分支杆菌ag85b基因,对目的基因片段和载体pET-28a以核酸内切酶NdeⅠ和HindⅢ分别进行双酶切,将两种酶切产物以T4DNA Ligase连接,构建了重组表达载体pET-28a-ag8...
- 马玢邓光存刘晓明曾瑾王玉炯
- 关键词:人畜共患病牛分枝杆菌基因克隆抗体制备
- 文献传递
- 谷氨酰胺对BCG诱导小鼠传代巨噬细胞凋亡的调控作用被引量:2
- 2023年
- 旨在探讨谷氨酰胺在牛分枝杆菌卡介苗(Bacille Calmette-Guerin vaccine,BCG)感染巨噬细胞过程中对凋亡的调控作用。本文采用小鼠单核巨噬细胞RAW264.7,首先建立了BCG感染致细胞凋亡的细胞模型,采用Western blotting检测凋亡关键因子的表达变化,确定最佳感染条件;进而利用无谷氨酰胺培养基构建谷氨酰胺剥夺模型并结合BCG感染,采用ELISA、免疫印迹、免疫荧光和流式细胞术等技术检测了细胞内谷氨酰胺关键代谢指标的差异变化。通过上述研究,阐明谷氨酰胺对BCG诱导的巨噬细胞凋亡的调控作用,并初步探讨其机制。结果表明,BCG感染显著上调了小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞中Caspase 3和PARP的蛋白表达(P<0.001),最佳感染时间为12 h,最佳感染复数为10 MOI,同时BCG感染促进了RAW264.7细胞内谷氨酰胺的分解代谢。剥夺谷氨酰胺后能极显著降低BCG感染后巨噬细胞中谷氨酸(P<0.001)和谷胱甘肽(P<0.01)的含量,极显著增加了细胞内ROS的含量(P<0.001)。同时,抑制谷氨酰胺代谢促进了RAW264.7细胞内促凋亡蛋白Caspase 3、PARP、Cytc和Bax的表达(P<0.001),极显著下调抑凋亡蛋白Bcl-2的表达(P<0.001)。综上表明,在BCG感染RAW264.7细胞的过程中,抑制谷氨酰胺代谢可以降低细胞内谷胱甘肽的含量,造成ROS的累积,进而通过内源性途径促进细胞凋亡。
- 安琪于嘉霖吴晓玲吴晓玲
- 关键词:BCG谷氨酰胺细胞凋亡
- 环介导等温扩增技术及其在基因突变筛查中的应用研究被引量:1
- 2020年
- 基因突变筛查是疾病临床诊断和确定治疗方案的有效方法之一。环介导等温扩增(LAMP)是一种新颖的恒温核酸扩增技术,由于其在灵敏度,特异性和快速性等方面具有显著优势,现已被广泛应用于各种研究领域,如食品检测和疾病诊断等。但是,LAMP技术在基因突变筛查中的应用研究报道相对较少。因此,本文就LAMP技术及以LAMP为基础衍生的新方法在基因突变筛查的应用进行重点阐述,旨在为以此技术平台为基础的推广及应用提供新的思路。
- 王雯雯张小雨马臣杰马臣杰邓光存
- Wnt/β-catenin信号对BCG感染巨噬细胞后诱发凋亡及坏死的调控机制研究
- 利用Wnt3a过表达载体及wnt/β-catenin信号通路的阻断剂(JW74)处理巨噬细胞RAW264.7,并同时用BCG感染细胞,采用Real-time PCR、Western-blot等方法检测Wnt/β-cate...
- 吴晓玲邓光存刘晓明王玉炯
- A型产气荚膜梭菌α-毒素基因的克隆与核苷酸序列分析被引量:3
- 2003年
- 利用聚合酶链式反应 (PCR)技术 ,从A型产气荚膜梭菌染色体基因组中扩增了 1.2kb的α毒素基因。通过T4 DNA连接酶 ,将纯化的PCR产物与载体pGEM -T连接 ,转化至受体菌JM10 9中。经NcoI EcoRI和BamHI EcoRI双酶切分析 ,证明重组质粒pXCPA0 2中含有A型产气荚膜梭菌α毒素全基因。经核苷酸序列分析 ,明确了克隆的α毒素基因在重组质粒中的连接向位且核苷酸序列是正确的。
- 赵志军许崇波曾瑾邓光存王玉炯
- 关键词:A型产气荚膜梭菌基因克隆核苷酸序列分析
- 可并行检测奶牛乳房炎十种主要致病菌的基因芯片及检测方法
- 本发明公开一种可并行检测奶牛乳房炎十种主要致病菌的基因芯片及检测方法,所述基因芯片包括芯片载体,在芯片载体上固定有用于检测奇异变形杆菌、停乳链球菌、无乳链球菌、表皮葡萄球菌、乳房链球菌、肺炎克雷伯菌、绿脓杆菌、金黄色葡萄...
- 王玉炯杨银学邓光存马臣杰
- 文献传递
- 28株牛源分枝杆菌的耐药基因突变分析被引量:2
- 2022年
- 为明确分离自宁夏、甘肃和新疆地区的28株牛源分枝杆菌的耐药基因突变情况,通过采用16S rRNA、MPT64和多位点PCR方法进行基因分型鉴定,L-J比例法对其进行药敏试验,随后用DNA测序技术对10株耐药菌和4株敏感菌进行耐药基因检测及突变分析。分型鉴定结果表明,28株分离株均属于结核分枝杆菌复合群(MTBC),其中26株为牛分枝杆菌,2株为人型结核分枝杆菌。药敏试验结果表明,28株MTBC中18株对4种一线抗结核药物敏感,10株耐药。耐药菌株中,1株对利福平耐药;7株对异烟肼、利福平和链霉素三重耐药;2株对异烟肼、利福平、链霉素和乙胺丁醇四重耐药。耐药基因突变位点分析结果表明,rpoB 378位点的突变率为10.0%;katG 463位点的突变率为100.0%;rrs 311位点的突变率为11.1%;embB 378位点的突变率为100.0%;oxyR-ahpC和rpsL位点无突变。提示宁夏、甘肃和新疆地区奶牛场中MTBC主要以牛分枝杆菌为主,且存在耐多药情况,耐药突变位点以katG 463和embB 378为主。
- 严娜王晓平邓可新张旭张旭
- 关键词:结核分枝杆菌牛分枝杆菌药敏试验耐药基因