公共文化服务平台

郭乐: 作品数：70 被引量：85H指数：5; 供职机构：宁夏医科大学检验学院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金宁夏回族自治区自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”更多>>; 相关领域：医药卫生生物学农业科学轻工技术与工程更多>>

合作作者

治疗性单克隆抗体类药物分析技术及其应用被引量：5: 2021年; 治疗性单克隆抗体(单抗)类药物是高度均一的生物大分子,抗原表位、理化性质和生物活性等方面的均一性程度高,能够通过特异性地与靶标分子结合发挥治疗作用。单抗类药物治疗过程中不良反应发生率低、患者耐受性高。单抗类药物是生物药物领域的热点和焦点,已成为现代生物制药行业中占比最大、增长最快的细分领域。根据生产技术和工艺的不同,单抗类药物发展已经经历了4代。我国最近批准上市的信迪利单抗注射液、特瑞普利单抗注射液、注射用卡瑞利珠单抗和替雷利珠单抗注射液等均属于第3代人源化单克隆抗体药物。单抗类药物分子结构复杂,容易发生二聚体、多聚体、末端氨基酸突变等不均一性变化,严重影响临床用药的安全性和有效性。对单抗类药物的原液和成品进行有效的质量控制是确保该类产品安全性和有效性的重要措施。目前,单抗类产品质量控制与分析的主要方法包括高效液相色谱(HPLC)法、酶联免疫吸附测定(ELISA)法、毛细管区带电泳(CZE)法、毛细管等电聚焦电泳(cIEF)法、成像毛细管等电聚焦电泳(iCIEF)法和十二烷基硫酸钠-毛细管电泳(CE-SDS)法等。本文就单抗类药物质量控制分析方法及应用进行综述,为相关研究及产品质量控制提供参考。; 张国林景荣先郭乐邢以文薛满; 关键词：酶联免疫吸附测定法毛细管区带电泳法

幽门螺杆菌多价表位疫苗CWAE的表达及其免疫学性质的研究被引量：1: 2019年; 目的:利用生物信息学软件评价幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)多价表位疫苗CWAE的抗原结构,经原核表达获得高纯度CWAE蛋白,进而鉴定多价表位疫苗CWAE的免疫学性质。方法:通过生物信息学软件分析H. pylori多价表位疫苗CWAE的抗原结构;用人工合成的H. pylori多价表位肽融合基因WAE替换重组质粒pET28a-CUE中的UE基因,构建重组质粒pET28aCWAE。然后,将pET28a-CWAE转入大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达,并通过Ni-NTP镍离子亲和层析纯化抗原蛋白CWAE;利用GM1-ELISA鉴定CWAE中CTB组分的黏膜免疫佐剂活性。最后,通过ELISA和小鼠脾脏淋巴细胞增殖实验检测CWAE激发BALB/c小鼠产生抗H.pylori抗体体液免疫和淋巴细胞免疫应答的能力。结果:通过生物信息学软件证实H. pylori多价表位疫苗CWAE具有科学合理的结构;重组表达质粒pET28a-CWAE经PCR、双酶切和基因测序鉴定,融合基因CWAE与设计序列完全一致;重组基因工程菌株pET28a-CWAE/BL21(DE3)经IPTG诱导表达,抗原蛋白CWAE主要以包涵体形式存在,经Ni-NTP镍离子亲和层析纯化,纯度约达93. 2%;GM1-ELISA实验证实,CWAE中CTB组分依旧保持有较好的黏膜佐剂活性;ELISA结果证实CWAE能够激发BALB/c小鼠产生H. pylori特异性抗体,而小鼠脾脏淋巴细胞增殖实验进一步证实CWAE能够激发针对H. pylori多种致病因子的淋巴细胞免疫反应。结论:H. pylori多价表位疫苗CWAE具有科学合理的抗原结构,经原核表达可获得高纯度抗原蛋白,能够激发BALB/c小鼠产生H. pylori特异性抗体体液免疫和淋巴细胞免疫应答。为研发防治H. pylori感染的多价表位疫苗奠定实验基础。; 郭乐郭乐何萌张帆刘宏鹏刘宏鹏; 关键词：幽门螺杆菌特异性抗体

杀螟硫磷检测用修饰电极、其制备方法及杀螟硫磷检测方法: 本发明提供了一种杀螟硫磷检测用修饰电极，包括玻碳电极和修饰在所述玻碳电极上的修饰涂层，所述修饰涂层由功能化离子液体和氮掺杂介孔碳组成，所述功能化离子液体为1‑羟乙基‑3‑甲基咪唑四氟硼酸盐。以上述杀螟硫磷检测用修饰电极作...; 李永红刘新胜杨惠芳郭乐李雨彤

地西他滨逆转人乳腺癌细胞中miR-5047基因甲基化状态的研究: 2021年; 目的探讨地西他滨对人乳腺癌细胞中miR-5047表达及其启动子甲基化状态的影响。方法用甲基化特异性PCR(MSP)法和qRT-PCR法分别检测人乳腺正常MCF-10A细胞和人乳腺癌MDA-MB-231、MCF-7细胞中miR-5047的表达水平及miR-5047启动子区的甲基化状态。用5μmol/L和10μmol/L浓度的地西他滨分别处理MDA-MB-231细胞,MSP法检测miR-5047启动子区的甲基化状态,qRT-PCR法检测miR-5047的表达。结果与人乳腺正常上皮细胞MCF-10A相比,乳腺癌MDA-MB-231和MCF-7细胞中miR-5047呈低表达,而其启动子区均呈高甲基化状态;地西他滨处理后,MDA-MB-231细胞中miR-5047启动子区的甲基化水平明显降低,miR-5047表达水平则显著升高。结论地西他滨可通过降低乳腺癌细胞中miR-5047基因启动子区甲基化水平从而促进miR-5047的表达。; 楚元奎路玉祥方丹丹杨丽李元郭乐杨华; 关键词：乳腺癌地西他滨去甲基化甲基化特异性PCR

靶向M细胞的GEM颗粒表面展示系统、颗粒疫苗及制备方法与应用: 本申请提供了靶向黏膜M细胞的GEM颗粒表面展示系统、颗粒疫苗及制备方法与应用，属于生物医学及生物工程领域。本申请提供的靶向黏膜M细胞的GEM颗粒表面展示系统，可表达多种来源不同的疫苗抗原，用于制备GEM颗粒疫苗，提高口服...; 郭乐刘昆梅王淑娥何萌李欣楚元奎; 文献传递

M细胞靶向性重组乳酸菌疫苗及制备方法与应用: 本申请提供了M细胞靶向性重组乳酸菌疫苗及制备方法与应用，属于生物医学及生物工程领域。本申请提供的M细胞靶向性重组乳酸菌疫苗，主要将幽门螺旋杆菌多表位肽WAE连接进靶向M细胞的重组乳酸菌表面展示系统，转化进乳酸菌，制备出可...; 刘昆梅郭乐姜中佳王淑娥张帆李元

产肠毒素大肠杆菌亚单位疫苗3STa^M(G)-K99和3STa^M(S)-K99的纯化及其免疫学性质的研究(英文)被引量：2: 2013年; 产肠毒素大肠杆菌(ETEC)是一种导致新生犊牛和仔猪腹泻的主要病原体之一。ETEC的毒力因子主要有黏附素(CFs)、不耐热性肠毒素(LT)和耐热性肠毒素(ST)三种。在前期研究中,利用PCR和酶切连接技术成功构建了两种ETEC亚单位疫苗3STaM(G)-K99和3STaM(S)-K99,且在大肠杆菌中获得高效表达。本研究利用阴离子交换层析纯化融合蛋白3STaM(G)-K99 and3STaM(S)-K99,辅以弗氏佐剂免疫新西兰大白兔,通过Elisa分析其免疫学性质,并利用肠毒素中和实验在昆明系乳鼠中评价其激发抗STa中和抗体的能力。实验结果表明:亚单位疫苗3STaM(G)-K99 and 3STaM(S)-K99能够激发相对较高水平、可针对天然STa、ETEC和融合蛋白STa-K99的特异性抗体。其次,亚单位疫苗中STa突变体(STaM)组分的肠毒素活性显著降低,且其所激发的特异性抗体属于中和抗体,能有效抑制天然STa的肠毒素活性。亚单位疫苗3STaM(G)-K99 and3STaM(S)-K99为研制预防ETEC感染性腹泻的多价基因工程疫苗提供了基本素材和理论指导。; 郭乐刘昆梅李敏赵辉徐广贤段相国韩学波杨华王玉炯; 关键词：产肠毒素大肠杆菌黏附素

幽门螺旋杆菌ATCC 43504感染BALB/c小鼠动物胃炎模型的建立及分析被引量：4: 2015年; 利用幽门螺旋杆菌标准菌株建立稳定可靠的幽门螺旋杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染小鼠胃炎模型对Hp疫苗研制、Hp致病机制的研究及抗Hp药物的筛选具有重要意义。通过灌胃国际标准菌株幽门螺旋杆菌Hp ATCC 43504,构建了BALB/c小鼠动物胃炎模型。利用小鼠胃部Hp尿素酶活性检测、Hp的定量培养、PCR检测、组织病理学等多种方法鉴定BALB/c小鼠动物胃炎模型。通过Hp诊断试剂盒检测,造模组小鼠的胃组织能使Hp尿素酶试剂变色,呈现玫瑰红色,而健康小鼠的胃组织不能使Hp尿素酶试剂变色,依旧呈现黄色;通过小鼠胃组织匀浆液培养Hp,造模组小鼠的胃组织匀浆液均可在BHI血平板长出Hp菌落,而对照组小鼠的胃组织匀浆液不能培养出Hp菌落;利用PCR对造模组和对照组BALB/c小鼠的胃组织进行Hp检测,造模组小鼠胃组织可扩增出150 bp的DNA产物,而对照组小鼠胃组织无扩增产物;通过HE染色法观察小鼠胃部病理变化和炎症情况,与健康BALB/c小鼠比较,造模组小鼠胃粘膜和粘膜下层有大量白细胞浸润,胃部炎症明显。利用国际标准菌株Hp ATCC 43504菌株成功构建了BALB/c小鼠胃炎模型,为评价防治Hp感染药物的效果奠定了实验基础。; 刘昆梅刘宏鹏郭乐; 关键词：幽门螺旋杆菌胃炎模型小鼠

脊柱结核患者椎间盘病灶组织中环状RNA表达的初步筛选和功能分析被引量：3: 2021年; 目的利用基因芯片技术筛选脊柱结核患者椎间盘病灶组织中差异表达的环状RNA(circRNA)并分析其在脊柱结核发生发展中可能的分子作用机制。方法选取2019年1月至2020年12月就诊于宁夏医科大学总医院脊柱骨科手术治疗的脊柱结核患者3例作为实验组,腰椎间盘退变手术治疗的患者3例作为对照组,收集术中切除的间盘组织,利用Arraystar Human circRNA Array V2芯片检测并采用独立样本t检验进行数据分析筛选出两组差异表达的circRNA;用生物信息学软件预测差异circRNA可能靶向作用的微小RNA(miRNA);对差异表达的circRNA分子的亲本基因进行基因本体(GO)生物学过程富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。结果脊柱结核患者的间盘病灶组织中差异表达的circRNA(差异倍数>2,P<0.05)共有1 396条,其中有757种表达上调,639种表达下调;hsacirc0031968、hsacirc0001806、hsacirc0077607、hsacirc0071312、hsacirc0062683表达显著上调;hsacirc0004183、hsacirc0000367、hsacirc0000691、hsacirc0006220、hsacirc0043278表达显著下调;对所有差异表达的circRNA的亲本基因进行GO分析发现其主要参与细胞蛋白分解代谢、三磷酸鸟苷(GTP)酶结合、组蛋白修饰、转录因子结合、蛋白激酶激活等过程;经KEGG通路分析发现其主要富集在内质网中的蛋白质加工、细胞凋亡、蛋白水解、环鸟苷酸-蛋白激酶G、腺苷酸活化蛋白激酶、EB病毒感染等信号通路。结论脊柱结核患者椎间盘病灶组织中差异表达的circRNA可能与脊柱结核的发生和发展密切相关。; 王立楠郭乐张旭张旭屈昱良师志云杨宗强杨宗强; 关键词：脊柱结核功能注释

一种幽门螺旋杆菌表位疫苗及其设计、制备方法和应用: 本发明提供一种幽门螺旋杆菌表位疫苗。本发明的幽门螺旋杆菌表位疫苗，其活性成分是一条多肽，主要是由霍乱毒素B亚基和一个来自于尿素酶A亚基的B细胞抗原表位构成。该表位疫苗是通过PCR技术合成上述尿素酶A亚基的B细胞抗原表位的...; 奚涛郭乐邢莹莹何赟绵王学全; 文献传递

郭乐

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户反馈

郭乐

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户登录

用户反馈