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不可分型流感嗜血杆菌外膜蛋白P6基因真核质粒的构建及表达被引量：3: 2011年; 目的:构建不可分型流感嗜血杆菌(nontypeableHaemophilus influenzae,NTHi)外膜蛋白P6(outermembrane protein P6,P6)真核表达的重组质粒,并在HeLa细胞中表达,为核酸疫苗的开发奠定基础。方法:以NTHi基因组为模板,扩增编码P6蛋白的基因片段,酶切、纯化P6基因与真核载体pcDNA3.1/HisA后进行连接,之后转化并筛选含有目的基因的重组质粒pcDNA3.1/HisA-P6;将重组子转染至HeLa细胞,荧光蛋白法检测其表达产物。结果:经质粒PCR、酶切、测序证实插入的基因片段为NTHi-P6蛋白编码基因;荧光显微镜下显示,该重组质粒能够在HeLa细胞中表达目的蛋白。结论:成功地构建了真核重组质粒pcD-NA3.1/HisA-P6,并在HeLa细胞中表达。; 何多姣刘雪晴李双霞贾天军张玉妥; 关键词：不可分型流感嗜血杆菌核酸疫苗真核表达质粒

流感嗜血杆菌外膜蛋白P6分子生物学及免疫学研究进展被引量：2: 2011年; 流感嗜血杆菌（Haemophilus influenzae，Hi）根据有无荚膜分为荚膜型和无荚膜型（nontypeable Haemophilus influenzae，NTHi）两类，荚膜型又可分为a～f六个血清型。以往认为只有荚膜型菌株可以致病，以b型（Hib）侵袭力最强，但近来研究显示，随着Hib荚膜多糖疫苗的应用．目前在Hi引起的感染中最多见的是NTHi．占70％以上，尤其是在呼吸道的感染中NTHi已成为主要致病菌，由其引起的呼吸道继发感染加重了感染症状，; 何多姣李双霞贾天军张玉妥; 关键词：流感嗜血杆菌分子生物学外膜蛋白免疫学 NTHI 感染症状

猪蛔虫感染对小鼠肺部免疫病理反应的动态观察: 2011年; 目的:动态观察感染猪蛔虫后,小鼠肺组织的病理变化及肺泡灌洗液中相关细胞因子的变化,从而了解蛔虫感染对肺脏的侵害过程。方法:温箱孵育猪蛔虫受精卵至含蚴卵,用灌胃法感染小鼠,分别在感染后第0、7、14、45天处死小鼠,观察肺组织的病理改变,并通过ELISA方法检测肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中IL-4、IFN-γ、IL-10和TGF-β_1含量的动态变化。结果:感染14天组,肺组织的病理改变最为严重:大量炎症细胞浸润,嗜酸性粒细胞增多,严重者支气管狭窄,肺泡塌陷;感染45天组,小鼠肺组织病理变化比前者显著减轻。BALF中IL-4含量在感染7天、14天后分别为(169.20±34.61pg/ml),(381.33±57.39pg/ml),均明显高于未感染组(38.03±6.09 pg/ml);在感染45天后降低(98.49±25.33 pg/ml),但仍高于未感染组。IL-10水平在感染后降低;但感染45天组,IL-10水平却有所增高(179.78±21.33 pg/ml),并高于感染前。IFN-γ、TGF-β_1含量在感染后也有明显降低。结论:猪蛔虫感染初期,小鼠肺部损伤严重,小鼠BALF中促炎症细胞因子占主导地位;但在感染后期,BALF中促炎症细胞因子含量降低,炎症抑制因子IL-10有所增高,炎症缓和。; 李双霞刘雪晴何多姣唐宏炜贾天军张进顺; 关键词：猪蛔虫病理 BALF 细胞因子

不可分型流感嗜血杆菌外膜蛋白P6基因真核质粒的保护性研究被引量：2: 2011年; 目的:探讨不可分型流感嗜血杆菌(nontypeable Haemophilus influenzae,NTHi)外膜蛋白P6(outer membrane proteinP6,P6)真核质粒的免疫保护性及其可能的保护机制。方法:构建pcDNA3.1/HisA-P6核酸疫苗,转染HeLa细胞;将P6质粒免疫BALB/c小鼠后,ELISA法检测小鼠脾淋巴细胞IFN-γ和IL-4产生水平;CCK-8法分析脾淋巴细胞增殖情况,并建立小鼠NTHi感染模型,检测小鼠鼻咽部灌洗液NTHi数目变化;HE染色法分析鼻黏膜病理变化。结果:pcDNA3.1/HisA-P6在HeLa细胞中有目的蛋白的表达,免疫后pcDNA3.1/HisA-P6组小鼠脾淋巴细胞产生的IFN-γ及刺激指数均高于pcDNA3.1/HisA、PBS对照组(P<0.05),而IL-4的表达无差异;P6组鼻咽部NTHi清除率也显著高于对照组(P<0.01);病理显示P6组小鼠鼻黏膜组织结构基本正常,而对照组鼻黏膜紊乱、脱落。讨论:P6核酸疫苗可诱导小鼠产生明显的抗NTHi保护效应,其可能的保护机制包括细胞免疫、体液免疫及黏膜免疫。; 何多姣张彦霞刘雪晴李双霞贾天军张玉妥; 关键词：不可分型流感嗜血杆菌核酸疫苗保护性免疫

蠕虫及其衍生物对过敏性疾病的抑制作用: 2011年; 蠕虫感染极为普遍,全球大约有1/4人口感染,世界各地均有分布,尤其是热带农村地区的流行率最高。蠕虫病主要表现为:嗜酸性粒细胞增多,血清抗体水平增高,速发型皮肤过敏反应等。但随着蠕虫与宿主长期协同演化,二者之间不再是一味的损伤,近些年来大量流行病学调查和动物实验研究显示:部分蠕虫及其衍生物能够抑制过敏性疾病的发生发展。本文就其免疫机制及几种蠕虫在过敏性疾病中作用的研究进行综述。; 李双霞何多姣张进顺; 关键词：卫生假说蠕虫过敏性疾病免疫机制

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李双霞