格日勒图
- 作品数：9 被引量：15H指数：3
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- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
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- 牛胎儿三毛滴虫的PCR检测
- 毛滴虫病是由胎儿三毛滴虫(Trichomonas foetus)寄生于牛生殖道引起的疾病,呈世界性分布,引起牛,尤其是奶牛生殖器官炎症、死胎、流产和不育．该病主要通过自然交配和人工授精的精液以及器械传播。毛滴虫病被国际兽...
- 徐立新严若峰薄新文格日勒图李祥瑞
- 文献传递
- 2种鸡柔嫩艾美耳球虫DNA疫苗的构建及在鸡体内的表达
- 利用DNA重组技术,将柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenalla)第2代裂殖子抗原基因MZ5-7的完整阅读框(ORF,945bp)克隆到真核表达质粒pcDNA4.0中,构建DNA疫苗DcDNA4.0-MZ。用同样方法...
- 格日勒图徐立新严若峰李祥瑞
- 关键词：柔嫩艾美耳球虫IL-17DNA疫苗
- 文献传递
- 鸡柔嫩艾美尔球虫（E.tenella）MZ5-7基因免疫调节型DNA疫苗的构建及其免疫保护性试验
- 本文选择球虫的表面抗原以及特定的细胞因子基因，通过DNA重组技术将几种目的基因串联为一体，插入到相关真核表达载体当中，并检测它们对鸡抵抗球虫攻击的免疫保护作用。
用RT-PCR的方法，从感染柔嫩艾美尔球虫(Eime...
- 格日勒图
- 关键词：柔嫩艾美尔球虫免疫保护鸡球虫病
- 鸡白介素-17 cDNA基因的克隆、序列分析及表达
- IL-17最早是从活化的小鼠和大鼠细胞毒性T细胞杂交克隆细胞中产生的一种T淋巴细胞抗原。现已证实人和鼠的IL-17参与免疫反应和炎性反应。研究还发现,IL-17的功能与适当浓度的植物凝集素(PHA)相当,可广泛刺激细胞的...
- 格日勒图李祥瑞
- 文献传递
- 2种鸡柔嫩艾美耳球虫DNA疫苗的构建及在鸡体内的表达被引量：5
- 2005年
- 利用DNA重组技术,将柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenalla)第2代裂殖子抗原基因MZ5-7的完整 阅读框(ORF,945 bp)克隆到真核表达质粒pcDNA4．0中,构建了DNA疫苗pcDNA4．0-MZ。用同样方法,将鸡成 熟白细胞介素-17(IL-17)基因的完整阅读框(507 bp)与MZ5-7基因串连,使MZ5-7基因位于IL-17基因的上游, 将串连基因克隆到pcDNA4．0中,构建成免疫调节型DNA疫苗pcDNA4．0-MZ-IL-17。2种DNA疫苗纯化后,胸 部肌肉注射免疫1周龄雏鸡(50 μg／鸡),在免疫后3．5,7,15和20 d取注射和非注射部位肌肉组织,分别用RT- PCR和Western blot方法检测抗原基因转录和表达情况。结果表明,在2种疫苗免疫后5,7和15 d,用RT-PCR 方法在注射部位均可检测到MZ5-7基因的转录产物,大小约950 bp,但在免疫第3天和20天的肌肉组织中未检测 到表达产物。相同时间用Western blot方法进行检测,结果在免疫5和7 d的鸡肌肉组织中检测到表达产物,pcD- NA4．0-MZ表达产物大小约36 ku,与理论推测值一致,pcDNA4．0-MZ-IL-17表达产物大小约64 ku,较MZ5-7和 IL-17基因之和的理论推测值58 ku略大。但在非注射部位,两种方法均未检测到转录或表达产物。上述结果表明, 通过肌肉注射后,两种DNA疫苗均可在鸡肌肉组织中得到有效表达。
- 格日勒图徐立新严若峰李祥瑞
- 关键词：柔嫩艾美耳球虫IL-17DNA疫苗
- 鸡柔嫩艾美尔球虫第二代裂殖子表面抗原MZ5-7基因的克隆、表位分析及原核表达
- 用RT-PCR的方法,从感染柔嫩艾美尔球虫(Eimeria tenella)第5天的鸡盲肠分离的第二代裂殖子中克隆出MZ5-7基因,并进行抗原表位分析和原核表达,结果表明,MZ5-7基因ORF为945 bp,与GenBa...
- 格日勒图徐立新严若峰李祥瑞
- 关键词：柔嫩艾美尔球虫原核表达
- 文献传递
- 鸡白介素-17 cDNA基因的克隆、序列分析及表达被引量：3
- 2005年
- 用RT-PCR方法,分别以ConA体外刺激培养12、24、48 h的鸡脾脏淋巴细胞(SP)和经人工感染2次堆型艾美尔球虫(E im eria tenella)孢子化卵囊(约3.6×104个/鸡)的鸡盲肠扁桃体/肠上皮淋巴细胞(IELS)总RNA为模板,成功扩增出预计大小的鸡白介素-17 cDNA基因,并克隆入pM D 18-T载体,进行序列测定。测序结果显示其阅读框(ORF)为507 bp,与G enB ank上鸡IL-17基因已知序列(A J493595)BLA ST的比较表明:核苷酸和氨基酸的同源性分别为99.4%和82.4%。将cDNA基因克隆入pET-32a质粒,构建了pET 32a-IL-17原核表达载体,IPTG诱导后表达出的融合蛋白大小为36 000左右。
- 格日勒图李祥瑞严若峰徐立新
- 关键词：IL-17基因RT-PCR
- 鸡白介素-17 cDNA基因的克隆、序列分析及表达
- 本试验用RT-PCR方法,分别以ConA体外刺激培养12h、24h、48h的鸡脾脏淋巴细胞(SP)和经人工感染3次Eimeria tenella孢子化卵囊(约3.6×10<'4>个/鸡)的鸡盲肠扁桃体/肠上皮淋巴细胞(I...
- 格日勒图李祥瑞
- 关键词：基因克隆家禽免疫学
- 文献传递
- 鸡柔嫩艾美尔球虫第二代裂殖子表面抗原MZ5-7基因的克隆、表位分析及原核表达被引量：2
- 2005年
- 用RTPCR的方法,从感染柔嫩艾美尔球虫(Eimeriatenella)第5天的鸡盲肠分离的第二代裂殖子中克隆出MZ57基因,并进行抗原表位分析和原核表达,结果表明,MZ57基因ORF为945bp,与GenBank里已知序列(登录号为L08257)比较核甘酸和氨基酸同源性均为99.9%。应用DNAStar软件对该基因的抗原表位进行了分析,发现其B细胞表位广泛分布在80～300区域,其中80～130区域、190～220区域和300～320区域更为突出,而T细胞基序则集中在123～190区域和220～300区域。根据MZ57基因序列重新设计一对引物,PCR方法扩增出不含信号肽长度为885bp的基因序列,克隆到pET28b获得重组质粒pET28bMZ亚,转入宿主菌BL21中,用IPTG进行诱导表达,表达的融合蛋白约36.5kDa10poundnote,符合目的蛋白大小;同时应用Westernblot方法与抗第二代裂殖子和子孢子的2种高免血清反应,结果表明抗裂殖子和子孢子血清均能识别MZP(裂殖子蛋白,MZP,merozoiteprotein)。
- 格日勒图严若峰徐立新李祥瑞
- 关键词：柔嫩艾美尔球虫原核表达表位分析基因克隆
