段生涛
- 作品数：8 被引量：57H指数：3
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- 荧光RT-PCR快速检测技术检测鸭场环境中禽流感病毒被引量：1
- 2005年
- 本研究应用荧光RT-PCR方法和鸡胚病毒分离方法,对两个禽流感发病后康复鸭场和一个健康鸭场采集的环境样品、部分健康和死鸭的拭子脏器进行检测,结果显示荧光RT-PCR方法同病毒分离方法的符合情况较好,阴性符合率为100%,病毒分离检出阳性样品经荧光RT-PCR检测全部为阳性。表明该方法在检测禽流感病毒的环境释放方面有重要应用价值,能够检出环境样品中的禽流感病毒。但其中的8份样品荧光RT-PCR显示为弱阳性或可疑,鸡胚分离的结果为阴性。推测这些样品中的病毒虽被灭活,但核酸并没有完全降解。
- 张鹤晓高志强张利峰乔卫虹吴丹谷强段生涛张向东
- 关键词：禽流感病毒PCR快速检测环境样品荧光鸭场PCR方法
- 荧光RT-PCR检测活禽和禽组织中禽流感病毒的研究被引量：41
- 2004年
- 本研究根据A型流感病毒的核酸保守区共有序列 ,开发、设计多条引物和探针序列 ,从中筛选敏感、特异的引物、探针 ,在循环参数、病毒核酸提取方法及逆转录条件优化的基础上 ,建立了快速的通用型“一步法”检测活禽或禽产品中所有A型禽流感病毒的荧光RT -PCR检测技术。该方法敏感性高、特异性强 ,与国际标准方法———世界动物卫生组织 (OIE)确定的鸡胚病毒分离相比 ,敏感性基本一致 ,可直接用来检测咽喉 /泄殖腔拭子和禽肉中的禽流感病毒 ,将检测时间从原来最短所需要的 2 1d缩短为 4h。
- 张鹤晓赖平安刘环刘继红郭晋优谷强张利峰汪琳段生涛张向东朱文斯杨伟黄茜华赖少梅李宁
- 关键词：荧光RT-PCR禽流感病毒血凝素神经氨酸酶
- 荧光RT-PCR快速检测高致病力禽流感病毒H5亚型
- 魏传忠赖平安张鹤晓朱文斯刘环刘继红郭晋优谷强张利锋黄茜华杨伟宋维平刘月焕段生涛张向东
- 该课题组根据高致病力禽流感病毒H5亚型血凝素（HA）特有的基因序列，合成特异性强的引物和探针，利用荧光RT-PCR检测技术，检测方法易于标准化等优点，经引物、探针筛选及其最佳配比比例优化，离子浓度、循环参数、检样体积及核...
- 关键词：
- 关键词：荧光RT-PCR禽流感病毒
- 新城疫病毒通用型实时RT-PCR检测方法的建立与应用被引量：9
- 2005年
- 采用Taq Man方法,经引物和探针的设计、筛选及反应条件优化,研究了检测活禽和禽产品中新城疫病毒的通用型实时RT-PCR(RRT-PCR)方法.结果显示,对12株分别为速发型、中发型、缓发型和疫苗株新城疫病毒的尿囊液倍比稀释液的检测极限在10-5～10-7之间;建立的方法与常见禽类病毒无交叉反应,特异性良好;在检测人工感染肉鸡的脏器组织、咽喉、泄殖腔拭子中病毒的灵敏度同鸡胚分离试验基本一致;弱毒疫苗免疫鸡群在免疫后14 d,应用本方法不能从咽喉、泄殖腔拭子中检测到病毒;临床样品检测表明,该方法不仅可以检出中强毒力新城疫毒株,也可检出缓发型野毒株和疫苗毒株.
- 张鹤晓高志强赖平安张利峰谷强杨伟刘继红郭晋优段生涛张向东
- 关键词：新城疫病毒
- 狂犬病病毒荧光RT-PCR检测方法研究与应用
- 采用TaqMan方法,根据古典狂犬病病毒非编码区及N基因编码区序列,设计合成多对引物和多条探针,通过对引物、探针的筛选,反应条件的选择和优化,建立了古典狂犬病病毒荧光RT-PCR检测技术。与病毒分离鉴定、常规RT -PC...
- 高志强张鹤晓柏亚铎赖平安凌凤俊张向东段生涛
- 关键词：狂犬病病毒荧光RT-PCR
- 文献传递
- 荧光RT-PCR快速检测活禽和禽产品中新城疫病毒中强毒株的研究
- 魏传忠张鹤晓赖平安朱文斯孙颖杰刘环杨伟刘继红郭晋优谷强张利锋赖少梅刘艳华汪琳李宁段生涛张向东黄茜华
- 我国是一个养禽大国，禽产品主要出口日本、韩国、欧盟等国家，2001年韩国宣称从中国出口的鸭肉中分离出禽流感病毒H5亚型，并停止从我国进口禽肉，日本根据韩国的决定，加强了对我禽产品的检疫，仅去年就从中国出口的禽肉中11次分...
- 关键词：
- 关键词：新城疫病毒荧光聚合酶链反应
- 狂犬病病毒快速荧光RT-PCR检测方法研究与应用被引量：3
- 2010年
- 采用TaqMan方法,根据古典狂犬病病毒非编码区及N基因编码区序列,设计合成多对引物和多条探针,通过对引物、探针的筛选,反应条件的选择和优化,建立了古典狂犬病病毒荧光RT-PCR检测技术。与病毒分离鉴定、常规RT-PCR试验比较表明,建立的荧光PCR检测技术快速、敏感,检测时限3 h以内。特异性试验表明本方法与犬瘟热病毒,犬细小病毒,犬Ⅰ型腺病毒不发生交叉反应。初步动物感染试验及定量检测研究及表明,本方法可用于感染动物不同组织样品中病毒的相对定量。对132份临床样品和4种商品化疫苗进行检测研究表明,本方法适用于样品中狂犬病病毒的直接检测以及疫苗中活病毒或灭活病毒的检测。
- 高志强张鹤晓柏亚铎赖平安谷强凌凤俊张伟张向东段生涛
- 关键词：狂犬病病毒
- 荧光RT-PCR检测NDV人工感染肉鸡组织脏器的应用研究被引量：5
- 2003年
- 用 6株新城疫病毒分离株人工感染 2 8日龄肉鸡 ,感染后 3天采集咽喉拭子和泄殖腔拭子 ,对死亡鸡进行病理剖检 ,取心、肝、脾、肺、肾、小肠、腿肌、胸肌等 ,制备组织脏器悬液 ,作倍比稀释 ,用建立的荧光RT -PCR方法检测并同鸡胚分离比较。试验表明 ,荧光RT -PCR检测组织脏器和拭子的敏感性同鸡胚分离的敏感性基本一致 ,荧光RT -PCR检测脏器的最低检测量为 5X10 -5,肌肉的最低检测量为5X10 -3,拭子的最低检测量为 10 -3。用不同的样品处理方法处理样品做荧光RT -PCR表明 ,裂解液处理样品方法优越 。
- 张鹤晓赖平安张利峰段生涛张向东杨伟
- 关键词：荧光RT-PCR检测NDV新城疫病毒传染病
