凌宗帅
- 作品数:67 被引量:143H指数:7
- 供职机构:济南出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金:国家质检总局科技计划项目山东出入境检验检疫局科研项目山东省优秀中青年科学家科研奖励基金更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 焦磷酸测序技术检测贾第鞭毛虫的方法
- 本发明公开了一种焦磷酸测序技术检测贾第鞭毛虫的方法,属于食源性寄生虫的检测技术领域,首先依据贾第鞭毛虫磷酸丙糖异构酶(triose phosphate isomerase,tim)设计特异性引物及焦磷酸测序引物;再提取待...
- 孙涛邓明俊肖西志王群郑小龙凌宗帅
- 文献传递
- 猪流行性腹泻焦磷酸测序检测方法的建立
- 2016年
- 本研究旨在建立一种基于RT-PCR的焦磷酸测序方法,以便对猪流行性腹泻(PED)进行高效准确地检测。利用PSQ Assay Design SW软件分析了猪流行性腹泻病毒(PEDV)N蛋白基因的保守区域,设计了一对扩增引物及一条测序引物,建立了PEDV N蛋白基因的焦磷酸测序检测方法。实验结果表明,该方法可以直接通过PSQ的序列结果直观地判定PEDV,大大提高了PEDV的检出率和准确性。该方法特异性强,不与其他猪源病毒发生交叉反应,最低核酸检测限为0.05 pg/μL。本研究所建立的焦磷酸测序方法灵敏度高、稳定性好,能从基因序列水平上精确鉴定PEDV,避免了假阳性结果的出现,对于PED的快速确诊具有重要意义。
- 曹丙蕾邱洪凯孙涛凌宗帅张群
- 关键词:猪流行性腹泻猪流行性腹泻病毒RT-PCR焦磷酸测序
- 焦磷酸测序技术在确证贾第鞭毛虫和隐孢子虫中的应用被引量:1
- 2013年
- 目的本研究旨在通过对贾第鞭毛虫和隐孢子虫(简称"两虫")进行序列信息分析的基础上,利用焦磷酸测序技术建立一种快速、简单地确证两虫的方法。方法通过序列信息比对,对贾第鞭毛虫的磷酸丙糖异构酶(triose phosphate isomerase,tim)基因和隐孢子虫18SrRNA基因的保守区段设计扩增引物及测序引物。用Sheather’s蔗糖密度离心法从粪便标本中分离纯化贾第鞭毛虫孢囊和隐孢子虫卵囊。酚-氯仿法抽提孢囊、卵囊总DNA,PCR扩增目的基因片段,采用焦磷酸测序技术(Pyrosequencing Technology,PSQ)针对两虫基因保守核苷酸区段进行测序分析。同时利用扩增引物与其他原虫进行特异性试验,利用测序引物进行重复性试验。结果通过序列信息比对寻找到了表征贾第鞭毛虫tim基因和隐孢子虫18S rRNA基因的核苷酸保守区段,经焦磷酸测序后能进一步确证虫株的序列信息,同时与Sanger法测序结果比对显示一致。特异性试验表明,不与其它原虫发生交叉反应;重复性试验表明,重现性为100%。结论基于序列分析的焦磷酸测序技术可以作为进一步确证两虫的方法使用。
- 孙涛邓明俊季新成肖西志徐彪凌宗帅岳志芹王群郑小龙
- 关键词:贾第鞭毛虫隐孢子虫焦磷酸测序
- 焦磷酸测序技术检测猪肉制品中猪甲型H1N1流感病毒的方法
- 本发明属于动物病原的检测技术领域的一种采用焦磷酸测序技术检测猪甲型H1N1流感病毒的方法,先设计猪甲型H1N1流感病毒特异性引物及焦磷酸测序引物;再提取待测样品的RNA,然后分别以猪甲型H1N1流感病毒H1、N1引物进行...
- 徐彪凌宗帅岳志芹张太翔孙涛辛学谦梁成珠
- 文献传递
- 复合检测禽流感和新城疫病毒的试剂盒及检验方法
- 本发明涉及复合检测禽流感和新城疫病毒的试剂盒及检验方法,其特征在于该试剂盒包括:裂解液、RT-PCR缓冲液、引物及探针混合液:其中含有检测各亚型禽流感病毒的引物及探针序列和检测新城疫中强毒的引物及探针序列、酶混合物、DE...
- 孙涛徐彪朱来华凌宗帅肖西至邓明俊张太翔文峰
- 外敷中药白芨膏对动物骨折愈合影响的研究
- 该研究主要包括两个实验,通过两种不同的动物骨折模型来探讨外敷中药制剂对骨折愈合的影响:试验一,对家兔前肢桡骨骨折缺损进行外敷中药白芨膏治疗,通过测定钙、磷和碱性磷酸酶(ALP)等血液生化指标,并观察骨折局部不同时期的X线...
- 凌宗帅
- 关键词:血液生化X光检查骨折
- 文献传递
- 伪狂犬病基因缺失疫苗的研究进展被引量:6
- 2009年
- 伪狂犬病是由疱疹病毒科伪狂犬病病毒引起的多种畜、禽及野生动物的一种急性传染病。动物感染后表现为从隐性临床症状到严重的呼吸道和神经症状综合症。该病给世界养猪业造成巨大的损失,目前预防该病主要是以疫苗接种为主。综述了当今广泛应用的伪狂犬病基因缺失疫苗的研究现状和进展。
- 凌宗帅郭文龙刘冠华马荣德阎振贵
- 关键词:伪狂犬病病毒基因缺失疫苗
- 出入境伴侣动物检疫现状及建议被引量:5
- 2003年
- 加入WTO后,我国对外交流日益增多,出入境旅客人数逐年增长,相应地出现旅客携带伴侣动物出入境的数量及种类也呈不断增加趋势,伴侣动物以犬和猫居多;另外,随着人们生活水平的提高。
- 凌宗帅刘友清潘学昌李强方绍庆姜迪来
- 关键词:进出口贸易动物检疫狂犬病疫苗注射
- 我国出口生猪常见疾病的鉴定与处理规范被引量:1
- 2015年
- 我国出口猪肉类市场的不断拓展,出口量不断增加,同时频频遭遇国外技术壁垒.主要进口国家和地区对我国出口猪肉类监管体系的关注从未放松,特别是宰前检疫和宰后检验工作,是每次官方体系考察重点检查的内容.宰前检疫有别于一般的兽医临床诊断,检疫人员对送宰畜禽应迅速做到病、健隔离和分别屠宰.通常采用“群体检查”和“个体检查”相结合的方法.宰后检验是为了检出对人体有害或致病的肉品,以利于剔除、妥善处理.通常采用观察胴体和内脏的病理变化,必要时结合实验室检查,经综合分析后确定肉品的质量.
- 王超吴伟王丹李建亮凌宗帅王晓文郭云孔聪聪焦宏强袁涛
- 关键词:常见疾病生猪兽医临床诊断肉类市场宰前检疫宰后检验
- 黄尾鰤腹水病毒的实时定量RT-PCR快速检测方法
- 本发明公开了一种黄尾鰤腹水病毒的实时定量RT-PCR快速检测方法,该方法利用正向引物、反向引物和荧光探针并以体外转录RNA标准品作为逆转录和扩增的双重对照,可以对黄尾鰤腹水病毒进行定性、定量检测。本发明具有快速,准确、特...
- 岳志芹徐彪刘荭李琼肖西志孙涛赵巍辛学谦邓明俊凌宗帅方绍庆张太翔
- 文献传递