李长珠
- 作品数：4 被引量：14H指数：3
- 供职机构：第三军医大学西南医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市杰出青年科学基金烧伤与复合伤国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 肝素酶特异性细胞毒T淋巴细胞表位多抗原肽负载的树突状细胞疫苗体外抗肿瘤免疫效应研究被引量：4
- 2011年
- 目的研究肝素酶(heparanase,Hpa)细胞毒T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)表位多抗原肽(multi-ple antigen peptides,MAP)疫苗能否诱导更强的Hpa特异性CTL反应。方法 HLA-A2.1限制性肝素酶CTL表位多抗原肽负载正常人外周血来源(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)树突状细胞(dendritic cell,DC),诱导CTL,采用4 h标准51Cr释放实验检测上述CTL对不同肿瘤细胞的免疫杀伤效应;采用ELISPOT实验检测效应细胞分泌IFN-γ的能力。结果肝素酶CTL表位MAP疫苗诱导的CTL对Hpa阳性且HLA-A2.1匹配的KATO-Ⅲ胃癌细胞、U2OS骨肉瘤细胞、SW480结肠癌细胞具有杀伤效应,且其杀伤效应强于相应的单肽,在最大效应细胞/靶细胞(effector/target,E/T)时高出率均大于16%;其对HLA-A2.1阴性的HepG2肝癌细胞和Hpa阴性的MCF-7乳腺癌细胞不具有杀伤效应,但是对MCF-7/Hpa乳腺癌细胞和HepG2/HLA-A2肝癌细胞具有杀伤效应,且其杀伤效应强于相应的单肽,在最大E/T时高出率均大于18%;其对自体淋巴细胞和DC不具有杀伤效应。另一方面人肝素酶CTL表位MAP疫苗诱导的IFN-γ分泌水平强于相应的单肽。结论肝素酶CTL表位MAP疫苗能激发较相应单肽更强的特异性和非特异性抗肿瘤效应。
- 王国珍汤旭东吴玉云李宁李长珠陈陵房殿春杨仕明
- 关键词：肝素酶CTL表位多抗原肽树突状细胞
- 骨髓来源细胞参与肝脏损伤的修复被引量：4
- 2011年
- 目的探讨小鼠骨髓来源干细胞（bone marrow stem cells,BMSCs）在体内分化为肝细胞的可行性及BMSCs是否参与肝功能受损的修复。方法 30只雌性C57BL/6小鼠全身一次性接受10 Gy60Co射线照射后,立即接受同品系雄性小鼠骨髓干细胞移植。移植后21 d后以CCl4致骨髓嵌合小鼠肝功能受损,并于CCl4致伤后第2、3、4、7、14、21、28天取骨髓嵌合小鼠肝脏,冰冻切片行Y染色体FISH和白蛋白（albumin,ALB）免疫荧光双标染色法,检测BMSC阳性细胞在受体小鼠肝内的分化情况,ELISA法检测肝脏基质细胞衍生因子-1（stromal cell-derived factor1,SDF-1）及其趋化因子受体（CXCR-4）、肝细胞生长因子（hepatocyte growth factor,HGF）、干细胞因子（stem cell factor,SCF）的表达。结果伤后2、3、4、7、14、21、28 d骨髓嵌合小鼠肝内皆可见FISH和ALB共表达的双阳性细胞,计数Y染色体FISH与ALB双阳性的细胞数量为3.763%~5.578%。ELISA法检测相关干细胞因子发现,在肝损伤后同一批次各时相点肝脏组织匀浆标本中SDF-1、CXCR-4、SCF、HGF 4种因子均呈现增高趋势,并在肝损伤第21天达到高峰表现,与其他时相点相比显著增加（P〈0.05）,同FISH与ALB荧光双标记共表达计数结果一致。结论 BMSCs可通过直接分化为肝细胞及分泌相关细胞因子间接促进受体肝脏干细胞增殖参与受损肝脏的修复。
- 李长珠梁光萍汤旭东吴玉云汪苏敏赵晶京房殿春杨仕明
- 关键词：肝细胞
- 端粒酶hTERT亚单位启动子靶向性慢病毒对肿瘤活体实时显像的实验研究被引量：3
- 2010年
- 目的构建一种含优化型人端粒酶催化亚单位(hTERT)启动子的慢病毒,结合小动物活体光学成像系统,研究该启动子对端粒酶阳性肿瘤的特异性活体成像作用。方法将文献报道的优化型hTERT启动子克隆到pGL-Basic质粒,对优化型hTERT启动子进行功能检测。确定其驱动活性之后,构建一种含该启动子和GFP的第3代慢病毒表达系统,以含CMV启动子的慢病毒作为对照。采用小动物荧光成像系统体内外研究优化型hTERT启动子在肿瘤实时诊断中的作用。结果启动子功能检测发现hTERT启动子具有严格的端粒酶阳性肿瘤细胞特异性,并且具有很高的报告基因报答水平。第3代慢病毒包装系统获得了高滴度的病毒颗粒并且能高效整合报告基因之宿主细胞。体外研究表明,含有优化型hTERT启动子的慢病毒体外感染细胞后,能够在端粒酶阳性肿瘤细胞内特异表达GFP,并且能维持长达40d的报告基因表达时间。体内实验发现,感染含优化型hTERT启动子的慢病毒之后24h,端粒酶阳性活体肿瘤能够被特异性的实时观察到,并且肿瘤内的GFP信号在存活裸鼠体内维持30d,随肿瘤增大而增强。结论优化后hTERT启动子对报告基因的调控具有严格的端粒酶特异性,第3代慢病毒系统可将该启动子和报告基因整合至细胞基因组,并实现在端粒酶阳性肿瘤细胞内的特异表达。结合小动物活体光学成像系统,荷瘤裸鼠内的端粒酶阳性肿瘤能够被无创的、实时的、特异性的成像,为肿瘤的特异性早期诊断提供新的实验理论基础。
- 余松涛杨应斌史春梦陈陵汤旭东黎川师红磊李长珠李宁王国珍吴玉云房殿春杨仕明
- 关键词：分子显像慢病毒
- 端粒酶活性调控研究进展被引量：4
- 2010年
- 陈陵梁光萍汤旭东余松涛黎川李宁李长珠王国珍房殿春杨仕明
- 关键词：端粒酶端粒端粒酶活性
