王新桐
- 作品数：7 被引量：32H指数：3
- 供职机构：山东农业大学更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 转基因作物中新霉素磷酸转移酶(NPTⅡ)双抗体夹心ELISA定量检测方法
- 本发明涉及一种转基因作物中新霉素磷酸转移酶(NPT Ⅱ)双抗体夹心ELISA定量检测方法，该检测方法是以体外条件下制备NPT Ⅱ蛋白为免疫原，制备兔抗NPT Ⅱ多克隆抗体为包被抗体，鼠抗NPT Ⅱ单克隆抗体作为捕获抗体，...
- 柴同杰王新桐
- 文献传递
- 产气荚膜梭菌α毒素双抗体夹心ELISA检测方法的建立及初步应用被引量：11
- 2014年
- 为了对产气荚膜梭菌α毒素进行快速、有效的检测,本研究以单克隆抗体(monoclonal antibody,mAb)为基础,建立了双抗体夹心ELISA(double antibody sandwich ELISA,DAS-ELISA)方法。纯化原核表达的α毒素蛋白为免疫原,制备腹水型mAb并分离纯化作为检测抗体,免疫新西兰大白兔制备抗α毒素多克隆抗体纯化后作为捕获抗体,通过试验优化反应条件,建立标准曲线;并对建立的DAS-ELISA方法进行性能评价及初步应用。DAS-ELISA方法对α毒素的有效检测范围为5.86~375μg/L,最低检测线为4.57μg/L,比多抗-多抗双夹心ELISA具有更高的特异性和敏感性。初步应用结果显示,相同培养条件下,A^E型产气荚膜梭菌标准菌株的培养上清中,α毒素含量差异较大,A型菌(NCTC528)中α毒素含量显著高于其他菌型。本研究成功制备了高特异性的mAb,并建立了特异、灵敏、稳定的DAS-ELISA方法,为高效检测α毒素提供了有效工具。
- 孙佳芝王新桐刘雪慧苗增民刘志浩王海荣柴同杰
- 关键词：产气荚膜梭菌Α毒素多克隆抗体双抗体夹心ELISA
- 转基因棉花中新霉素磷酸转移酶(NPTⅡ)双抗体夹心ELISA定量检测方法的建立
- 随着转基因技术的大范围应用和转基因农作物的商业化种植，带来了显著的社会效益和经济效益，但同时，转基因生物及食品的安全和可能引起的环境风险等问题也成为人们的争论焦点。为了对转基因作物和转基因产品进行有效跟踪、检测、标识和风...
- 王新桐
- 关键词：转基因棉花磷酸转移酶单克隆抗体蛋白表达
- 文献传递
- 转基因作物中新霉素磷酸转移酶(NPTⅡ)双抗体夹心ELISA定量检测方法
- 本发明涉及一种转基因作物中新霉素磷酸转移酶(NPT II)双抗体夹心ELISA定量检测方法，该检测方法是以体外条件下制备NPT II蛋白为免疫原，制备兔抗NPT II多克隆抗体为包被抗体，鼠抗NPT II单克隆抗体作为捕...
- 柴同杰王新桐
- 文献传递
- 鹅的营养需要及饲养管理
- 鹅具有可采食大量青菜和嫩草的饲养特性，作为畜牧业的一个组成部分对农民致富具有广阔发展前景，鹅和其他禽类一样，为了维持生命、生长发育、产蛋、育肥、长羽，需要多种多样的营养物质。本文根据鹅的生长特性，对蛋白质与能量、氨基酸、...
- 王新桐
- 关键词：饲养管理营养物质
- 转基因玉米中膦丝菌素乙酰转移酶双抗体夹心ELISA检测方法的建立被引量：7
- 2013年
- 【目的】以单克隆抗体（monoclonal antibody,mAbs）为基础，建立检测膦丝菌素乙酰转移酶（the phosphinothricin acetyltransferase,PAT）的双抗体夹心ELISA方法,为转基因玉米PAT蛋白的检测提供参考。【方法】由P3301质粒扩增出膦丝菌素乙酰转移酶基因（blalaphos resistance gene）bar，并与表达载体pET28a构建重组质粒，诱导表达产生外源性PAT蛋白；以纯化后的PAT蛋白为免疫原，制备mAbs，建立双抗体夹心ELISA方法，并与PCR检测方法进行比较，确定该方法的准确性和可靠性。【结果】应用mAbs 4D5和3E8成功建立了检测PAT蛋白的双抗体夹心ELISA方法，其有效检测范围为3.125～50 ng/mL。采用该夹心ELISA方法对36份已知转基因背景的玉米样品进行了检测，根据阴阳性判定值OD450〉0.210，检测出含PAT蛋白的Bt176阳性样品4份，以bar基因为检测目标利用传统PCR方法也检测出相同的Bt176样品4份，2种检测方法的符合率为100%。【结论】利用建立的双抗体夹心ELISA免疫学检测方法，可以对转基因玉米中的PAT蛋白进行准确、特异、有效的检测。
- 刘志浩高丽丽王新桐孙佳芝杨正友柴同杰
- 关键词：双抗体夹心ELISA
