庞耀珊
- 作品数:493 被引量:1,452H指数:22
- 供职机构:广西兽医研究所更多>>
- 发文基金:广西壮族自治区科技攻关计划国家百千万人才工程广西特聘专家专项经费资助项目更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生自动化与计算机技术更多>>
- 禽呼肠孤病毒σ3基因的真核表达及其免疫效果研究
- 采用RT-PCR技术扩增禽呼肠孤病毒ARV S1133毒株的σ3基因,将σ3基因克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)载体上,获得重组质粒经PCR酶切以及序列分析鉴定,表明插入的片段为σ3目的基因,插入的位置、大小和阅...
- 谢芝勋谢丽基刘加波唐小飞邓显文庞耀珊谢志勤
- 关键词:禽呼肠孤病毒PCDNA3.1(+)免疫保护
- 牛病毒性腹泻病毒三种核酸检测方法的比较被引量:4
- 2012年
- 利用针对牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的常规RT-PCR、实时荧光定量RT-PCR(real-time RT-PCR)和RT-环介导等温扩增技术(RT-LAMP)3种核酸检测方法对不同质粒浓度的样品和417份临床疑似样品进行了检测,以比较3种核酸检测方法的优越性。结果显示,3种核酸检测方法中,real-time RT-PCR和RT-LAMP一样敏感,均能检测到10拷贝/μL,常规RT-PCR只能检测到1×104拷贝/μL,但临床样品检测表明,常规RT-PCR方法敏感度低,会造成一部分漏检,RT-LAMP灵敏度高又会造成错检。综合比较3种方法后,推荐用RT-LAMP结合real-time RT-PCR,不仅节约成本,且结果更为准确可靠,可提高牛病毒性腹泻的检出率。
- 范晴谢芝勋刘加波庞耀珊邓显文谢志勤谢丽基
- 关键词:牛病毒性腹泻病毒反转录-聚合酶链反应
- 猪圆环病毒2型广西株的分离和全基因组序列分析被引量:3
- 2007年
- 从广西表现为断奶仔猪多系统衰竭综合征的猪群中分离到1株猪圆环病毒2型(PCV-2),命名为GXB株。对GXB株的全基因组进行PCR扩增,扩增产物克隆至PMD18-T载体。测序结果表明,全基因组为1767bp,与GenBank上已知的8株PCV-2参考株序列的同源性在95.0%~99.6%之间。序列分析表明,GXB株基因组包含11个读码框(ORF),其中ORF1和ORF2是最主要的读码框,分别编码314个和233个氨基酸,与其他PCV-2毒株的ORFl、ORF2氨基酸的同源性分别为97.8%~100%、91.5%~98.7%。对GXB株ORF2编码的Cap蛋白基因进行功能分析,表明含有1个潜在的糖基化位点,3个明显的亲水区,有较强的抗原性和亲水性,为作为主要的免疫原性蛋白基因提供了依据。
- 唐小飞谢芝勋刘加波邓显文庞耀珊谢志勤谢丽基
- 关键词:猪圆环病毒2型全基因克隆
- 应用多重聚合酶链反应检测四种霉形体的研究被引量:11
- 2003年
- 根据鸡毒霉形体 (MG)、滑液囊霉形体 (MS)、衣阿华霉形体 (MI)和火鸡霉形体 (MM )的基因文库 ,设计了 4对分别与MG、MS、MI和MM某段基因序列互补的引物 ,用这 4对引物对同一样品中的MG、MS、MI和MM的DNA模板进行多重PCR扩增。结果 ,均同时得到了 4条特异性的大小与试验设计相符的 732bp(MG)、2 0 7bp(MS)、2 99bp(MI)、85 0bp(MM )多重PCR扩增带 ,而对其他 6种禽病病原体的PCR扩增结果均为阴性。敏感性测定结果表明 ,此多重PCR能同时检出 1pg的MG、MS。
- 邓显文谢芝勋谢志勤廖敏庞耀珊刘加波唐小飞何竞铭
- 关键词:鸡毒霉形体滑液囊霉形体多重PCR
- Ⅰ群禽腺病毒双价油乳剂灭活苗的研究被引量:18
- 2011年
- 【目的】提高国内I群禽腺病毒疫苗的防控能力,防止I群禽腺病毒蔓延。【方法】优化I群禽腺病毒的增殖条件,以I群禽腺病毒血清4型(FAV-4)及血清8型(FAV-8)的抗原液制备油乳剂单价及双价灭活苗,比较甲醛及β-丙内酯(BPL)的灭活效果,并检验疫苗性状、监测免疫抗体水平及进行免疫攻毒试验和田间试验。【结果】疫苗灭活以1.00mL/L终浓度的甲醛或0.500mL/L终浓度的BPL为宜;3种疫苗均为白色状乳液,4°C下保存期均可达12个月,单价疫苗的最小免疫剂量为100μL/羽,双价疫苗的最小免疫剂量为250μL/羽;免疫抗体水平监测结果表明,免疫后第4周抗体水平达到峰值,且在免疫后第8周仍维持较高水平;免疫攻毒试验结果显示,3种疫苗的保护率均为100%,能完全抵抗病毒攻击;田间试验结果表明,在免疫初期3种疫苗抗体均达到预期免疫效果,免疫保护期在6个月以上,在生产中使用双价疫苗可以减少注射次数。【结论】FAV-4、FAV-8双价油乳剂灭活苗免疫效果好、保存期长、安全性好,为净化I群禽腺病毒提供了技术支撑。
- 韦悠谢芝勋范晴刘加波谢丽基庞耀珊邓显文谢志勤
- 一种电化学免疫传感器及其制备方法和其应用
- 谢芝勋黄娇玲谢丽基谢志勤邓显文范晴罗思思曾婷婷张艳芳王盛张民秀刘加波庞耀珊
- 现有的新城疫病毒分子生物学检测方法(如RT-PCR、荧光定量PCR和LAMP等检测方法),虽然检测的敏感性较高,但操作较为繁琐(需要抽提病毒RNA、RT-PCR扩增、电泳检测等步骤);现有的新城疫病毒血清学检测方法,可以...
- 关键词:
- 关键词:电化学免疫传感器
- 同时鉴别9种鸡呼吸道病病原体的GeXP快速检测试剂盒
- 本发明公开了一种同时鉴别9种鸡呼吸道病病原体的GeXP快速检测试剂盒。该试剂盒是基于GeXP系统使用的,包含10种PCR引物对,用于同时鉴别检测禽流感病毒、H5、H7和H9亚型禽流感病毒、新城疫病毒、传染性支气管炎病毒、...
- 谢芝勋罗思思谢丽基邓显文谢志勤庞耀珊刘加波范晴
- 广西高致病性H5亚型禽流感血凝素基因序列分析
- 利用RT-PCR技术,对4个H5亚型AIV分离株的HA基因进行扩增,通过对RT-PCR产物直接测序,获得了4个全长均为1640 bp的HA基因序列。利用计算机分析软件,对这些分离株的HA核苷酸序列及推导的氨基酸序列进行分...
- 庞耀珊谢芝勋刘加波邓显文唐小飞
- 关键词:禽流感病毒H5亚型血凝素基因测序
- 广西奶水牛结核病三种检测方法的比较被引量:4
- 2011年
- 应用牛结核变态反应、PCR和分离培养3种方法,对奶水牛进行牛结核病检测,比较3种检测方法的符合率。结果表明,1850头奶水牛中有78头奶水牛的皮内变态反应结果为阳性,而对变态反应阳性的牛样品进行PCR检测和分离鉴定,分别鉴定出4份和2份牛分枝杆菌。阳性检出率以变态反应为最高(4.22%),PCR和分离鉴定的较低,分别为0.21%和0.11%。变态反应与PCR检测、分离鉴定的符合率较差,而PCR检测与分离鉴定的符合率相对较接近。因此建议,在对奶水牛群进行结核病检测时,应先以变态反应检疫牛群,再结合PCR检测进行综合诊断,更有利于奶水牛结核病的检测与净化。
- 谢志勤谢芝勋刘加波庞耀珊邓显文谢丽基温娟张振荣黄海强
- 关键词:奶水牛牛结核病变态反应PCR检测
- 结核分枝杆菌和牛分枝杆菌二重实时荧光PCR检测方法的建立被引量:4
- 2010年
- 根据结核分枝杆菌23SrRNA基因序列和牛分枝杆菌特殊基因序列,设计了2对针对结核分枝杆菌和牛分枝杆菌的特异性引物和2条用不同荧光基团标记的TaqMan探针,建立了结核分枝杆菌和牛分枝杆菌的二重实时荧光定量PCR检测方法,并对建立的方法进行敏感性、特异性测定和临床样品检验。结果显示,该方法特异性好,能区分不同模板浓度组合的结核分枝杆菌和牛分枝杆菌;可检测到10copies模板的结核分枝杆菌和牛分枝杆菌;对保存的50份PPD检测阳性牛的鼻黏液、牛乳和淋巴结进行检测,结果6份结核分枝杆菌阳性,1份牛分枝杆菌阳性,其余均为阴性,与PCR的检测结果一致。由此可见,建立的二重实时荧光定量PCR方法具有特异、敏感、快速、可定量检测等优点,适合用于结核分枝杆菌和牛分枝杆菌的鉴别检测。
- 谢志勤谢芝勋刘加波庞耀珊邓显文谢丽基蓝如束张振荣黄海强
- 关键词:结核分枝杆菌牛分枝杆菌