张立民
- 作品数：5 被引量：17H指数：3
- 供职机构：泰安市中心医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 细粒棘球绦虫疫苗候选分子EgA31的GST融合蛋白原核表达及纯化被引量：12
- 2003年
- 目的 :构建细粒棘球绦虫疫苗候选分子EgA31重组质粒 ,表达及纯化EgA31 GST融合蛋白 ,为疫苗的研究奠定基础。方法 :PCR扩增EgA31cDNA ,将得到的cDNA经限制性内切酶酶切 ,然后亚克隆入pGEX 5X 3质粒 ,转化BL2 1宿主菌 ,IPTG诱导重组质粒的表达 ,亲和层析纯化表达产物 ,Bradford法测定重组蛋白含量 ,用SDS PAGE和Westernblot进行分析鉴定。结果 :SDS PAGE显示分离纯化的EgA31 GST融合蛋白为 4 5kDa ,测序检验重组质粒中EgA31cDNA序列正确。EgA31 GST融合蛋白免疫豚鼠得到的抗血清可与细粒棘球绦虫原头蚴总蛋白在 6 6kDa处特异性反应。结论 :EgA31 GST融合蛋白获得高效表达 ,并成功纯化 ,初步实验证明具有良好的免疫原性 。
- 张立民傅玉才由弘王进成
- 关键词：细粒棘球绦虫融合蛋白原核表达包虫病
- 细粒棘球绦虫基因工程疫苗候选分子EgA31的原核表达及免疫学鉴定
- 背景与目的：包虫病是由细粒棘球绦虫的幼虫引起的一种人畜共患病,在我国牧区广泛流行,严重影响了牧区人民的健康并造成畜牧业的经济损失(1,2)。目前对该病的控制主要以犬的驱虫和对牧民的预防教育为主,但在发展中国家效果较差(3...
- 张立民
- 关键词：疫苗预防原核表达免疫学鉴定
- 文献传递
- 用核酸原位杂交技术观察细粒棘球绦虫66kDa抗原mRNA在虫体上的细胞定位被引量：6
- 2003年
- 目的 :用核酸原位杂交技术观察细粒棘球绦虫 6 6kDa抗原mRNA在虫体上的细胞定位以及在虫体发育的不同时期mRNA含量的变化。方法 :以 6 6kDa抗原的cDNA克隆EgA31为模板制备RNA探针 ,与细粒棘球绦虫原头蚴、育囊和成虫虫体进行原位杂交实验。结果 :原位杂交实验显示EgA31mRNA主要位于原头蚴和成虫的皮层下某种细胞中 ,并在棘球蚴育囊的生发层中也存在这种细胞。在原头蚴向成虫的发育过程中虫体吸盘处细胞内EgA31mRNA含量显著增加。结论 :含EgA31mRNA的细胞很可能是皮层细胞 ;EgA31蛋白可能参与吸盘上肌纤维的收缩作用并与虫体的免疫逃避功能有关。
- 傅玉才王进成张立民张壮志田虹G Bosquet
- 关键词：细粒棘球绦虫MRNA细胞定位原位杂交
- 努力提高对包虫病的预防控制
- 2005年
- 高得勇王珂张立民
- 关键词：包虫病疾病预防疾病控制减毒活疫苗基因免疫
- 细粒棘球绦虫EgA31重组抗原与其它寄生蠕虫的免疫交叉反应被引量：10
- 2004年
- 为了研究细粒棘球绦虫EgA31重组蛋白的抗原性 ,作者将细粒棘球绦虫 6 6kDa抗原的cDNA克隆EgA31 3′端 5 0 0bp碱基片断亚克隆入pGEX 5X表达质粒 ,构建EgA31 GST重组蛋白原核表达系统 ,所制备的重组蛋白免疫豚鼠获得抗血清 ;免疫试验表明该抗血清可识别EgA31 GST重组蛋白及细粒棘球绦虫 6 6kDa抗原 ,也可与多房棘球蚴、犬复孔绦虫、犬钩虫、日本血吸虫的成虫虫体总蛋白 6 6kDa抗原分子发生交叉反应 。
- 由弘傅玉才张立民张壮志王进成
- 关键词：细粒棘球绦虫EGA31重组抗原寄生蠕虫包虫病
