郭金
- 作品数：18 被引量：35H指数：4
- 供职机构：首都儿科研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- DNA总体低甲基化、错配修复基因启动子甲基化异常与神经管畸形的相关性被引量：4
- 2012年
- 目的研究神经管畸形(NTDs)胚胎脑组织和皮肤组织DNA总体甲基化以及错配修复基因启动子区甲基化水平。方法在山西省吕梁地区以医院为基础进行病例-对照研究。从县级医院及妇幼保健院收集经B超诊断为NTDs的胎儿标本,同时收集非病理性引产、无畸形和发育迟缓的胎儿作为正常对照组。运用甲基化定量试剂盒测定脑组织和皮肤组织的DNA总体甲基化水平,甲基化特异性多连接依赖性探针扩增试剂盒检测7个错配修复基因(MLH1,MSH2,MSH6,MSH3,MLH3,PMS2和MGMT)启动子区甲基化水平。结果共有65例NTDs胚胎,48例对照胚胎进入研究。①NTDs组的脑组织DNA总体甲基化水平显著低于对照组(5.3%vs6.5%,P<0.001),DNA总体低甲基化显著增加了NTDs发生风险(OR=4.98,95%CI:1.42～17.53)。皮肤组织DNA总体甲基化水平在两组间差异无统计学意义(13.3%vs13.1%,P>0.05);②NTDs和对照组的MSH6启动子(MSH6-301:2.5%vs3.7%,P<0.05)和PMS2启动子(PMS2-328:5.7%vs6.7%;PMS2-142:2.0%vs2.7%,P<0.05)的甲基化水平存在显著差异。结论 DNA总体低甲基化、错配修复基因启动子区的异常甲基化修饰与NTDs发生有关。
- 陈晓丽郭金邹继珍卢晓琳包怡华吴丽华牛勃
- 关键词：神经管畸形错配修复基因病例对照研究
- 探索16p11.2微缺失对儿童精神发育迟缓的致病性
- 16p11.2微缺失指16p11.2区带长约500kb的基因组拷贝数缺失,属于再发性微缺失,是儿童一系列神经精神发育疾病(孤独症、智力低下、语言迟缓、注意力不足运动障碍综合症)的潜在致病因素,但具体致病原因不明.本研究利...
- 谢华王立文郭金王珺张裕张霆沈亦平陈晓丽
- 关键词：神经精神发育微缺失表达谱信号通路
- 佩利措伊斯-梅茨巴赫病的微阵列比较基因组杂交研究分析
- 目的本研究利用高分辨微阵列比较基因组杂交(Array-Competitive Genomic Hybridization,Array-CGH)技术,对不明原因智力低下/发育迟缓(Mental Retardation/De...
- 王君王立文陈晓丽郭金
- 文献传递
- GSK3β基因在肌醇缺乏状态下对小鼠胚胎神经发育的影响被引量：2
- 2020年
- 目的葡萄糖合酶激酶3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK3β)基因在胚胎发育过程中发挥重要作用,探讨GSK3β基因在肌醇缺乏状态下对小鼠胚胎神经发育的影响。方法利用碳酸锂(Li2CO3)诱导产生肌醇缺乏小鼠神经管畸形(neural tube defects,NTD)模型以及肌醇缺乏小鼠神经干细胞(neural stem cells)NE4C模型,应用苏木精-伊红染色法(HE)、免疫印迹(Western blotting)及流式细胞仪等技术研究GSK3β基因及磷脂酰肌醇-3-激酶/丝氨酸-苏氨酸激酶(phosphatidylinositol-3-kinase/serine-threonine kinase,PI3K/Akt)通路相关基因的表达水平。结果肌醇缺乏小鼠NTD胚胎神经组织中p-Akt(Ser473)/Akt和p-GSK3β/GSK3β水平升高(P<0.05)。与对照组相比,肌醇缺乏小鼠NTD胚胎神经组织中GSK3β和PIK3CA mRNA水平升高(P<0.01)。在肌醇缺乏NE4C细胞模型中,pGSK3β/GSK3β水平明显高于正常对照组(P<0.01)。细胞实验发现肌醇缺乏导致细胞过度增殖,使细胞增殖和凋亡处于失衡状态。结论在肌醇缺乏条件下,通过PI3K/Akt信号通路调控,使GSK3β磷酸化水平增高,引起神经细胞过度增殖,导致NTD的发生。该研究为出生缺陷的预防和控制提供了新的思路。
- 刘玉郭金岳慧轩李莘秦佳星钟儒刚王建华赵丽娇
- 关键词：肌醇神经管缺损PI3K/AKT信号通路
- PI3K/Akt信号通路在小鼠胚胎神经发育中的作用及机制
- 2023年
- 目的探究磷脂酰肌醇-3-激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(phosphatidylinositol-3-kinase/serine-threonine kinase,PI3K/Akt)信号通路对小鼠胚胎神经发育的影响及作用机制,进一步阐明PI3K/Akt信号通路相关胚胎神经发育异常的分子机制。方法实验动物为C57BL/6J小鼠,胚胎第7.5天(embryonic day,E7.5)孕鼠随机分为6组,实验组分别腹腔注射12.5、25、50、75、100 mg/kg的LY294002(PI3K/Akt信号通路抑制剂),对照组注射生理盐水。E13.5解剖,观察小鼠胚胎畸形情况。确定最佳造模剂量后,取该组小鼠胚胎神经及脊柱样本,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测细胞凋亡及音猬因子(sonic hedgehog,Shh)信号通路关键基因的mRNA表达水平,采用免疫印迹法检测蛋白质表达水平。实验细胞选用小鼠神经干细胞NE-4C细胞系,采用噻唑兰法(methylthiazolyldiphenyl tetrazolium bromide,MTT)检测不同浓度LY294002处理后细胞存活情况;采用原位末端标记(TdT-mediated dUTP nick-end labeling,TUNEL)实验检测细胞凋亡;采用流式细胞术检测细胞周期。统计学方法采用单因素方差分析和Dunnett’s t检验。结果动物实验结果显示,LY294002给药组出现神经管畸形(neural tube defect,NTD)表型;50 mg/kg组的NTD发生率80.7%(46/57),均为脊髓脊膜膨出和脊柱裂,选为最佳造模剂量。RT-qPCR结果显示,与对照组相比,给药无畸形组、脊髓脊膜膨出组及脊柱裂组的细胞凋亡标志物肿瘤抑制基因(tumor suppressor gene P53,P53)和半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶3(cysteinyl aspartate-specific proteinase 3,Caspase3)的相对mRNA表达均上升(P<0.01),磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸-3-激酶催化亚基α基因(phosphatidylinositol-4,5-bisphosphate-3-kinase catalytic subunit alpha,PIK3CA)及Shh信号通路关键基因[平滑蛋白(smoothened,Smo)、神经胶质瘤相关癌基因同源物(glioma-associated oncogene homolog,Gli)1及Gli2]的相�
- 李莘郭晓兰郭金王秀伟官臻梁颖超于佳璐朱智强杨爱云王建华
- 关键词：神经管畸形音猬因子信号通路
- 肌醇缺乏Crmp2基因表达降低影响胚胎初级纤毛形成
- 2018年
- 目的 Crmp2基因在初级纤毛形成过程中发挥重要作用,本研究拟探讨肌醇缺乏对Crmp2基因以及胚胎初级纤毛的影响。方法利用碳酸锂诱导产生肌醇耗竭小鼠模型,应用免疫组化、实时定量PCR及免疫印迹等技术研究Crmp2基因及纤毛关键基因的表达水平。结果肌醇耗竭小鼠胚胎神经组织中Crmp2基因的表达及磷酸化水平显著降低,纤毛形成重要基因Mkks、Ift80及Vangl2的转录水平显著降低(P<0.05)。结论肌醇缺乏Crmp2基因表达降低影响胚胎初级纤毛形成。
- 郭金李莘岳慧轩高婷婷秦佳星钟儒刚王建华
- 关键词：肌醇
- AXIN2罕见变异与人类神经管畸形的相关性研究
- 2023年
- 目的探索AXIN2基因变异与神经管畸形(neural tube defects,NTDs)发生的相关性。方法收集2004年6月-2013年12月山西省9家医院引产的100例NTDs胎儿肌肉组织样本,对其全基因组测序结果中的AXIN2基因的变异进行生物信息学分析,在相应的样本中利用Sanger测序证实变异结果。在NE-4C细胞系中转染AXIN2野生型及AXIN2变异型质粒,利用免疫荧光和蛋白免疫印迹实验进行基因功能验证,对携带AXIN2变异的人NTDs样本进行分析。结果在100例NTDs样本中发现AXIN2基因上有5种变异,对其中3种变异[c.959A>T(p.D320V)、c.1250C>T(p.A417V)和c.1634G>A(p.G545E)]进行功能验证。细胞蛋白免疫印迹实验表明,D320V(P<0.05)和G545E(P<0.001)变异下调AXIN2蛋白表达,但3种变异均不影响β-catenin蛋白表达水平;免疫荧光实验表明,3种变异不影响AXIN2蛋白的亚细胞定位。在携带D320V及G545E变异的NTDs胚胎肌肉组织中,AXIN2的蛋白表达水平显著低于对照[D320V(P<0.05),G545E(P<0.01)]。结论NTDs样本中鉴定到的AXIN2变异D320V及G545E下调AXIN2蛋白表达量,可能通过引起Wnt信号通路异常激活而导致神经管畸形的发生。
- 徐雪冰李建婷包怡华郭金王芳张霆杨淑艳
- 关键词：神经管畸形WNT信号通路
- 久坐行为对学龄前儿童肌肉力量的影响
- 2023年
- 目前的研究尚未明确久坐行为(sedentary behavior,SB)与肌肉力量(muscle strength,MS)之间的关系,尤其缺乏国内学龄前儿童的相关证据。为探讨SB对3~6岁学龄前期儿童MS的作用,采用横断面研究设计,以北京市3~6岁学龄前儿童为研究对象(n=275),利用握力测试和立定跳远测试分别对上、下肢肌肉力量进行评测,根据肌肉力量标准分公式,结合测评结果计算得出MS的T分;连续佩戴7 d ActiGraph GT9X Link加速度计以评估学龄前儿童的SB的总时间、持续SB时间。结果显示,在控制性别、年龄、家庭年收入,父、母亲学历因素之后,SB的总时间和持续SB时间与肌肉力量均呈显著负相关,SB的总时间每增加10 min/d,MS的T总分下降0.739(95%CI:-1.122,-0.355),持续SB时间每增加10 min/d,MS的T总分下降0.825(95%CI:-1.644,-0.007)。此外,上肢MS和下肢MS与SB的总时间均呈显著负相关,SB的总时间增加10 min/d,上肢MS的T分降低0.427(95%CI:-0.664,-0.189),下肢MS的T分下降0.312(95%CI:-0.533,-0.091)。结果表明SB的总时间和持续SB时间与MS总T分值均呈显著负相关,对于MS而言,SB可能是一个风险因素。为促进学龄前儿童的肌肉力量的发育,应该控制学龄前期儿童的SB的总时间和持续SB时间。
- 张豪文吴剑路朝旭郭金包怡华
- 关键词：学龄前期儿童
- INPP5E基因影响小鼠胚胎神经管闭合的分子机制研究被引量：2
- 2019年
- 目的探讨肌醇多聚磷酸5-磷酸酶(INPP5E)基因影响小鼠胚胎神经管闭合的分子机制。方法采用前期复制的神经管缺陷(NTD)小鼠模型,在体视显微镜下观察胚胎表型、苏木精-伊红染色情况,测量胚胎顶臀长、体重等指标;重亚硫酸盐测序法检测NTD组及对照组胚胎发育第11.5天小鼠胚胎神经组织中INPP5E基因启动子区DNA甲基化情况;实时荧光定量聚合酶链反应和Western blotting检测胚胎神经组织中INPP5E蛋白和mRNA相对表达量;超高效液相色谱串联质谱法检测胚胎神经组织中叶酸(FA)、5-甲基四氢叶酸(5-MeTHF)、5-甲酰四氢叶酸(5-FoTHF)及同型半胱氨酸(Hcy)水平。结果NTD组小鼠胚胎神经组织INPP5E基因启动子区甲基化水平、INPP5E蛋白和mRNA相对表达量在胚胎发育第11.5天时较对照组低(P<0.05)。NTD组胚胎神经组织的FA和Hcy水平较对照组升高(P<0.05),而5-MeTHF和5-FoTHF水平较对照组低(P<0.05)。结论INPP5E基因在调节小鼠胚胎神经管闭合中起重要作用。FA代谢紊乱引起的INPP5E基因启动子区甲基化水平降低,可能通过影响其表达水平参与NTD的发生。
- 高婷婷岳慧轩李莘秦佳星王秀伟官臻牛勃郭金王建华钟儒刚
- 关键词：神经管DNA甲基化
- 妊娠神经管畸形孕妇叶酸水解酶基因多态性的研究
- 郭金邹继珍王国亮牛博郑晓英张霆谢华王建华赵慧智王芳刘驰王理卢晓琳包怡华
- 文献传递
