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C57小鼠LATl真核表达载体的构建及其对Neuro-2a细胞的影响: 2014年; 目的构建C57小鼠L型氨基酸转运载体1(LAT1)的真核表达载体,转染Neuro-2a肿瘤细胞进行表达,探讨LAT1对Neuro-2a细胞增殖及凋亡的影响。方法采用RT-PCR扩增出LAT1全长目的基因,定向克隆pcDNA3.1表达载体,构建pcDNA3.1-LAT1重组表达质粒,通过脂质体法将阳性克隆转染Neuro-2a细胞,经G418筛选获得稳定表达株后,用RT-PCR和western blot蛋白印迹法检测LAT1的表达情况。通过MTT法检测各组Neuro-2a细胞的增殖情况,并借助流式细胞仪检测LAT1对Neuro-2a细胞增殖和凋亡的影响。结果成功构建小鼠pcDNA3.1-LAT1真核表达载体,酶切和测序证实其序列正确,并成功转染Neuro-2a细胞建立稳定转染细胞系。MTT法显示转染重组质粒pcDNA3.1-LAT1的Neuro-2a细胞增殖速度显著高于对照组(P<0.05),且流式细胞术检测转染组对Neuro-2a细胞具有促进增殖抑制凋亡的作用。结论转染pcDNA3.1-LAT1质粒的Neuro-2a细胞能成功表达LAT1蛋白,且LAT1对Neuro-2a细胞的增殖和凋亡均有显著影响,为进一步研究LAT1的生物学作用奠定了重要基础。; 卫兵艳刘田福樊林花刘茂林; 关键词：真核表达载体增殖凋亡

糖代谢异常大鼠肝组织中内质网应激相关分子CHOP和Caspase-12的表达变化被引量：2: 2015年; 目的观察高脂饮食诱导的糖代谢异常大鼠肝脏糖原沉积与内质网应激(ERS)相关分子CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶12(Caspase-12)在肝脏中的表达变化。方法 SD雄性大鼠60只,随机分为糖耐量受损组(IGT,n=20),IGT对照组(n=10),2型糖尿病组(T2DM,n=20)及T2DM对照组(n=10)。采用高脂饮食饲养12周诱导IGT大鼠,高脂饮食饲养4周后腹腔注射链脲佐菌素诱导T2DM大鼠。过碘酸雪夫氏(PAS)染色观察各组大鼠肝脏糖原改变;real-time PCR技术检测肝脏组织中CHOP mRNA的表达;Western blot技术检测肝脏组织中Caspase-12蛋白的表达。结果 IGT组和T2DM组大鼠肝脏糖原含量丰富。IGT组和T2DM组肝组织CHOP mRNA的表达水平与各自对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05),而Caspase-12蛋白表达水平明显升高(P<0.01);与IGT组相比,T2DM组Caspase-12蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。结论糖代谢异常大鼠肝组织糖原含量明显增多,ERS相关分子Caspase-12表达水平增高,肝组织中存在内质网应激,肝糖原沉积可能是内质网应激的诱因之一。; 樊林花李丹刘茂林卫兵艳王春芳刘田福刘建新; 关键词：内质网应激糖耐量受损

糖代谢异常对大鼠肝脏组织中巨噬细胞移动抑制因子及C-Jun氨基端激酶表达水平的影响被引量：2: 2015年; 目的观察巨噬细胞移动抑制因子(MIF)和C-Jun氨基端激酶(JNK)在糖代谢异常大鼠肝脏组织中表达水平的变化,探讨糖代谢异常合并非酒精性脂肪肝(NAFLD)的病理机制。方法将60只大鼠随机分为糖耐量受损(IGT)模型组(n=20)、2型糖尿病(T2DM)模型组(n=20)、IGT对照组(n=10)及T2DM对照组(n=10),高脂饲料喂养复制IGT大鼠模型,高脂饲料喂养加腹腔注射小剂量链脲佐菌素(STZ)制备T2DM大鼠模型,采用TUNEL法检测各组大鼠肝脏细胞凋亡;实时荧光PCR技术检测肝脏组织中MIF mRNA的表达;Western blot方法检测肝脏组织中MIF、caspase-3、JNK蛋白表达及磷酸化JNK(p-JNK)的表达。结果 IGT大鼠及T2DM大鼠肝组织凋亡细胞明显增多;IGT组和T2DM组肝组织MIF基因表达较各自对照组明升高(P<0.01),MIF、caspase-3、JNK蛋白表达及JNK磷酸化水平也明显升高(P<0.05或P<0.01);与IGT组相比,T2DM组caspase-3、MIF、JNK蛋白表达水平明显降低(P<0.01),而JNK磷酸化水平是明显升高(P<0.01)。结论糖代谢异常合并非酒精性脂肪肝的发生可能与MIF、caspase-3、JNK表达水平的升高及JNK磷酸化水平的增强有关。; 樊林花刘建新李丹卫兵艳刘茂林王春芳刘田福; 关键词：巨噬细胞移动抑制因子 C-JUN氨基端激酶 CASPASE-3 糖耐量受损

不同浓度氟对大鼠血清氧化应激效应的影响被引量：1: 2013年; 目的研究不同浓度氟对大鼠血清氧化应激效应的影响。方法采用饮水中加入不同剂量的氟化钠饲喂大鼠复制氟中毒大鼠模型,饲喂90 d和120 d后,各组随机处死5只大鼠,检查氟斑牙发生情况,采用比色法检测血清中总抗氧化能力(T-AOC)、黄嘌呤氧化酶法测定血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性,硫代巴比妥酸法测定血清中丙二醛(MDA)含量。结果 90 d和120 d时,各染氟组大鼠出现不同程度的氟斑牙,且随染氟剂量的增大和染氟时间的延长而加重。低氟组两时间点大鼠血清中T-AOC[(9.37±5.82)U/ml,(11.31±2.90)U/ml]均低于相应的对照组[(22.76±7.99)U/ml,(21.37±6.43)U/ml],差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。各组之间SOD活性差异均无统计学意义。90 d时,中氟组和高氟组MDA含量[(8.08±2.72)nmol/ml,(9.67±1.70)nmol/ml]均明显高于对照组[(4.26±0.53)nmol/ml],差异均有统计学意义(P<0.01);120 d时,各染氟组MDA含量[(7.49±0.47)nmol/ml,(10.48±1.97)nmol/ml,(12.50±2.59)nmol/ml]均明显高于对照组[(4.70±0.63)nmol/ml],差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论慢性氟中毒可导致大鼠血清氧化系统和抗氧化系统失衡,氧化应激在氟中毒中可能发挥重要作用。; 樊林花刘茂林卫兵艳宋国华; 关键词：氟中毒氧化应激

显微注射用周脂素脂肪组织特异表达基因的制备: 目的：为了建立周脂素（perilipin，Plin）转基因小鼠，进一步研究周脂素的生物学功能，阐明其在多种病理生理中的作用机制。本研究利用基因工程的方法对周脂素基因进行克隆，构建pMDTM18-T//ap2-...; 卫兵艳; 关键词：显微注射长PCR 转基因载体; 文献传递

术后早期炎性肠梗阻42例诊治观察被引量：6: 2013年; 目的探讨术后早期炎性肠梗阻的发病机制、临床特点、诊治方法及预防措施。方法对2008年10月至2012年7月山西省定襄县中医院收治的42例腹部手术后早期炎性肠梗阻患者的临床资料进行回顾分析,42例患者均表现为排气后肠蠕动一度恢复、进食后又出现以腹胀为主的肠梗阻症状,经查体和X线腹部平片确诊。结果 40例经保守治疗后治愈,于5～21d(中位时间9d)肠蠕动重新恢复,效果良好。2例保守治疗2周不见缓解,1例由于黏连导致血运障碍而行部分小肠切除术,另1例腹腔肠管广泛黏连、扩张,行黏连松解术并肠排列术,中位治愈时间为15d。结论术后早期炎性肠梗阻,多发于腹部手术后2周以内,治疗取决于引起梗阻的原因及临床病情进展情况,首选保守治疗。; 张宏卫兵艳; 关键词：术后早期炎性肠梗阻

氟对大鼠肝组织中caspase-3和caspase-9基因表达的影响被引量：1: 2014年; 目的观察氟对大鼠肝组织caspase-3和caspase-9基因表达的影响,探讨其对肝组织损伤的作用机制。方法将48只SD雄性大鼠随机分为:对照组、低氟组、中氟组和高氟组,每组12只,分别饮用含0,50,100,200 mg/L氟化钠去离子水,采用自由饮水方式进行连续染毒120 d。测定肝系数;采用荧光定量PCR检测肝组织中caspase-3、caspase-9基因表达水平。结果染氟组与对照组相比,体重差异无统计学意义。染氟组大鼠肝脏脏器系数与对照组相比差异无统计学意义。低、中、高染氟组caspase-3基因表达量分别是对照组的0.34±0.10、1.37±0.43和2.27±0.73倍;低、中、高染氟组caspase-9基因表达量分别是对照组的1.03±0.36、3.05±0.68和5.85±0.52倍。结论氟化物对肝细胞DNA损伤以及诱导细胞的凋亡,可能是通过激活caspase-3和caspase-9而促进了它们的发生。; 刘茂林樊林花卫兵艳; 关键词：氟基因表达 CASPASE-3 CASPASE-9

抑郁症大鼠脑组织、血清中PICK1的表达及意义: 2015年; 目的探讨抑郁症大鼠脑组织及血清中蛋白激酶Cα相互作用蛋白(protein interacting with Cαkinase 1,PICK1)的表达水平及意义。方法将30只Wistar大鼠随机分为抑郁症模型组和正常对照组,抑郁症模型组应用慢性温和不可预见性刺激构建模型,采用体重测量、畅箱实验、糖水消耗实验及Morris水迷宫实验进行行为学检测。蛋白印迹法及酶联免疫吸附试验检测两组脑组织、外周血中PICK1表达的变化。结果与正常对照组相比,抑郁模型组大鼠体重、糖水偏好、水平运动、垂直运动明显降低(P<0.05),逃避潜伏期明显延长(P<0.05)。抑郁症大鼠脑组织中PICK1表达水平较正常大鼠显著增高(P<0.05),血清中PICK1的表达与正常大鼠无显著差异(P>0.05)。结论抑郁模型大鼠脑组织中PICK1表达水平上调,可能参与了抑郁症发生发展的病理过程。; 王日德卫兵艳; 关键词：抑郁症蛋白印迹酶联免疫吸附试验

C57BL/6J小鼠脂肪组织总RNA提取及周脂素基因的克隆被引量：1: 2011年; 目的用改进后的方法提取高质量的RNA,以此为模板,应用T-A克隆法克隆C57BL/6J小鼠周脂素基因编码区,对其进行测序验证,并与GenBank比对。方法在试剂说明书基础上,改进提取脂肪组织RNA的方法,从C57BL/6J附睾脂肪组织提取高质量的总RNA,用RT-PCR扩增出周脂素编码区基因,并将目的基因编码区克隆入pMD18-T载体中,转化E.coli JM109后,筛选阳性克隆,通过限制性内切酶酶切鉴定后,对其进行测序验证,并与GenBank比对。结果用改进后的方法成功提取出了高质量的总RNA,并且成功提取构建的重组载体中含有周脂素基因的全长序列,与GenBank公布的序列一致。结论改进的后的脂肪组织RNA提取方法是可行的,并获得周脂素基因的cDNA,为进一步研究其生物学功能奠定了基础。; 卫兵艳刘田福郭永昌张引红; 关键词：RNA提取 RT-PCR 基因克隆

周脂素和ADRP在糖代谢异常大鼠肝脏组织中的表达被引量：4: 2015年; 目的:探讨脂滴相关蛋白周脂素(perilipin)和脂肪分化相关蛋白(ADRP)在糖尿病发生发展过程中的变化情况以及在糖代谢异常合并非酒精性脂肪肝中的作用。方法:分别用高脂饲料喂养和高脂饲料喂养加小剂量链脲佐菌素建立糖耐量受损(IGT)和2型糖尿病大鼠模型(T2DM),采用光镜观察各组大鼠肝组织的形态学改变;用ELISA法测定血清周脂素perilipin和ADRP含量;real-time PCR技术检测肝脏组织中perilipin和ADRP mRNA的表达;用Western blotting法检测肝脏组织中ADRP蛋白的表达。结果:HE结果显示,IGT组和T2DM组大鼠均有肝细胞脂肪变性,IGT组变性更严重;各模型组的生化指标与临床相关疾病的表现一致;血清perilipin水平各组之间无差异,但IGT组和T2DM组肝组织perilipin mRNA表达明显升高(P<0.01);与IGT组相比,T2DM组perilipin mRNA表达显著增加(P<0.05)。T2DM组血清ADRP含量较其对照组明显降低(P<0.01);模型组肝组织ADRP mRNA表达明显降低(P<0.01);ADRP蛋白表达较其对照组也明显降低(P<0.01);与IGT组相比,T2DM组ADRP mRNA表达明显降低(P<0.01)。结论:血清ADRP含量在T2DM的形成中起一定的作用,与胰岛素抵抗指数呈明显负相关;高脂喂养后能导致大鼠糖代谢异常,并伴有非酒精性脂肪肝的发生;糖代谢异常合并非酒精性脂肪肝的发生可能与肝组织perilipin表达升高和ADRP表达降低有关。; 樊林花刘茂林卫兵艳刘田福王春芳庞文彪郭永昌刘建新; 关键词：脂肪分化相关蛋白糖耐量受损 2型糖尿病

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卫兵艳

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