吕欣
- 作品数：94 被引量：184H指数：6
- 供职机构：第四军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划陕西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- 抗HBV与HCV免疫乳的实验免疫研究
- 目的放大发酵工艺,确定奶牛的最适免疫剂量和免疫次数及其间隔时间,观察牛奶中抗HBV与抗HCV的效价与消长规律。方法重组菌经IPTG诱导后,表达的目的蛋白以包涵体形式存在,将包涵体变性、复性后,测定蛋白含量,并用SDS-P...
- 尹文雷迎峰杨敬张为吕欣薛小平徐志凯韦三华李毅刘兵
- 关键词：乙型肝炎病毒丙型肝炎病毒
- 文献传递
- 调控型表达丙型肝炎病毒NS3／4A蛋白酶转基因小鼠的建立被引量：1
- 2011年
- 目的建立调控因素存在下表达丙型肝炎病毒(HCV)NS3/4A丝氨酸蛋白酶的转基因小鼠。方法采用分子克隆技术构建可受Tet-On调控系统和Cre-LoxP基因敲除系统双重调控表达HCV NS3/4A丝氨酸蛋白酶的真核表达质粒PBI-Ⅲ/LoxP-Luc-PolyA-LoxP-NS3/4A。该重组质粒线性化后,经显微注射制备转基因小鼠。首建鼠及经PCR检测阳性的子代鼠与C57BL/6小鼠交配传代。选择部分F2鼠与已经稳定建系的转基因小鼠Lap杂交,利用在体生物发光成像系统(BLI)检测肝脏稳定表达荧光素酶(Luc)报告基因的经盐酸强力霉素(Dox)诱导的双转基因子代鼠,并选择性针对稳定表达系传代扩群。结果酶切鉴定和测序分析显示重组载体构建成功。经PCR检测得到6只转基因首建鼠,其中3只可繁殖传代并持续检测到阳性子代鼠。BLI结果显示,由其中1只首建鼠传代而来的不同F2鼠与Lap鼠杂交得到的部分双转基因鼠肝脏部位发光信号强烈,表明这些小鼠肝细胞内报告基因Luc特异高效表达。结论建立了转基因小鼠NS3/4A,并筛选到调控因素存在时转入外源基因特异稳定表达的转基因小鼠,为进一步建立严格调控型表达NS3/4A蛋白酶的小鼠模型奠定基础。
- 孙梦宁兰海云马玉赵亚吕欣杨敬雷迎峰姚敏康健招明高汪爱勤尹文
- 关键词：肝炎病毒属动物小鼠转基因
- Tet-on和Cre／loxP双调控肝靶向表达Cre重组酶转基因小鼠的制备和功能评价被引量：2
- 2011年
- 目的制备Tet-on和Cre/loxP系统双重调控下肝靶向性表达Cre重组酶的转基因小鼠rtTALAP-1/LC-1并评价其功能,为最终建立可突破胚胎期免疫耐受的双调控型HCV转基因小鼠模型奠定基础。方法选取适龄rtTALAP-1转基因小鼠与LC-1转基因小鼠交配,PCR法检测子代rtTALAP-1/LC-1转基因小鼠基因组中是否插入了rtTA元件和Cre基因片段。双阳性rtTALAP-1/LC-1小鼠dox诱导1周后,以小动物活体成像系统检测小鼠肝脏的Luc萤光素酶信号,免疫组化检测Cre重组酶在小鼠肝脏等组织中的表达状况。结果 rtTALAP-1/LC-1转基因小鼠在dox诱导后,仅在其肝脏检测到清晰的Luc萤光素酶信号,而其他脏器均未检测到萤光信号;免疫组化法也仅在小鼠肝细胞核中检测到Cre重组酶的表达,心脏、肾脏和骨骼肌等其他组织均未检测到Cre重组酶的表达。结论成功制备了rtTALAP-1/LC-1转基因小鼠,其靶基因表达的诱导反应性和肝靶向性均良好,为最终制备双调控型丙型肝炎病毒(HCV)转基因小鼠模型奠定了良好的基础。
- 赵亚马玉黄豫晓兰海云孙梦宁吕欣杨敬雷迎峰张建敏康健招明高汪爱勤尹文
- 关键词：肝炎病毒属
- 医学微生物学课程教学中人文素养的渗透被引量：3
- 2016年
- 医学兼具人文社会属性,对于医学生培养而言,人文素养培育的重要性不言而喻,现今医患矛盾的加剧更突显了对医学生人文素养培育的迫切性。医学微生物学作为基础医学与临床医学的桥梁学科,其在理论教学与实验教学中可以渗透入大量与人文素养相关的内容,通过多样性的教学方式、教学内容上有意识的引导,对于医学生人文素养的培育能起到很好的作用。
- 吕欣姚敏柏银兰张芳琳
- 关键词：医学微生物学医学生人文素养
- 丙型肝炎病毒NS3-5B转基因小鼠模型的构建
- 2015年
- 目的:构建表达丙型肝炎病毒(HCV)NS3-5B蛋白的转基因小鼠模型。方法:显微注射线性化p IRES2-EGFP-NS3-5B载体到小鼠受精卵,制备并传代筛选HCV NS3-5B转基因小鼠;通过血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)检测和肝脏HE染色,对6周龄转基因小鼠进行肝功能评价。结果:PCR、RT-PCR和Western印迹结果表明HCV NS3-5B转基因小鼠构建成功;6周龄部分转基因小鼠血清ALT和AST值升高,但差别无统计学意义,肝组织形态无改变。结论:构建了HCV NS3-5B转基因小鼠模型,为进一步在体研究HCV复制复合体建立了平台。
- 赵海卫韩佩君姚敏吕欣雷迎峰杨敬乔卿华翁代慧党品香尹文
- 关键词：丙型肝炎病毒转基因小鼠模型
- 基因枪法和肌内注射法免疫HCV NS3/4A诱导小鼠免疫应答的比较
- 2012年
- 目的比较肌内注射法和基因枪法对免疫效果的影响。方法将携带HCV NS3/4A基因的质粒pcDNA3.1-NS3/4A,分别肌内注射和基因枪免疫BALB/c小鼠。基因枪免疫采用2μg/只和10μg/只两种剂量,肌内注射免疫的剂量为100μg/只,共免疫3次。分别于第3次免疫后10 d和20 d,收集小鼠血清、分离脾细胞;ELISA法检测小鼠血清中特异性抗体水平;ELIspot检测小鼠IFN-γI、L-2和IL-4;非放射性细胞毒性试验检测其对肿瘤细胞的杀伤作用,从而比较肌内注射和基因枪法激发小鼠产生体液免疫和细胞免疫应答的影响。结果免疫后第10 d检测结果表明,2μg/只和10μg/只基因枪法免疫产生的抗体效价分别为1∶500和1∶1 000,100μg/只肌内注射免疫产生的抗体效价为1∶1 000。第20 d再次检测,基因枪法产生的抗体效价仍为1∶500和1∶1 000,肌内注射降低为1∶500。2μg/只和10μg/只基因枪免疫产生的IFN-γ和IL-2均高于100μg/只肌内注射免疫。但这两种免疫方法均未激发IL-4的水平。在不同的效靶比情况下,10μg/只和2μg/只基因枪免疫激发的CTL细胞杀伤活性均高于100μg/只肌内注射免疫。结论基因枪法免疫小鼠诱导的体液免疫和细胞免疫应答均显著高于肌内注射免疫。
- 姚敏尹文雷迎峰杨敬黄小军康健吕欣
- 关键词：基因枪肌内注射丙型肝炎病毒免疫应答
- 丙型肝炎病毒受体的研究进展被引量：2
- 2003年
- 丙型肝炎病毒 (HCV)受体一直是 HCV研究的热点之一 ,但至今仍无定论 ,已经提出的可能受体有 :CD81、低密度脂蛋白受体、粘多糖、清道夫受体及 C型 (钙离子依赖型 )凝集素 DC/ L- SIGN等 。
- 吕欣薛小平徐志凯
- 关键词：丙型肝炎病毒受体病原体低密度脂蛋白受体粘多糖清道夫受体
- HCV NS3-5B转基因小鼠模型的构建
- 目的 构建表达HCV NS3-5B蛋白的转基因小鼠模型。方法 显微注射线性化pIRES2-EGFP-NS3-5B载体到小鼠受精卵，制备并传代筛选HCV NS3-5B转基因小鼠；通过血清ALT、AST检测和肝脏HE染色对6...
- 赵海卫吕欣雷迎峰姚敏乔卿华韩佩君张芳琳徐志凯尹文
- 关键词：丙型肝炎病毒动物模型
- 噬菌体在细菌性感染治疗中的应用及展望被引量：27
- 2001年
- 随着耐药菌株的出现 ,抗生素治疗的无效性已越来越明显 ,人类开始探索并尝试其它治疗手段。利用噬菌体治疗细菌感染日益受到重视 ,针对噬菌体治疗中存在的缺点与不足 ,开始采用分子生物学技术对噬菌体进行改造 ,并做动物试验治疗的研究 。
- 吕欣
- 关键词：噬菌体细菌性感染
- 抗HBV与HCV免疫乳的实验免疫研究被引量：3
- 2005年
- 确定重组HBV表面抗原和HCV核心抗原对奶牛的最适免疫剂量、免疫次数及间隔时间,观察牛奶中抗HBV与抗HCV的效价与消长规律。表达HBV表面抗原和HCV核心抗原的重组菌经IPTG诱导后,目的蛋白以包涵体形式存在。放大发酵工艺,菌体发酵密度达40g/L,目的蛋白表达量为26%～30%。将包涵体变性、复性后,测定蛋白含量,并用SDS-PAGE鉴定。采用不同的剂量和不同的抗原处理方法免疫奶山羊和奶牛,检测HBV抗体、HCV抗体、干扰素与白介素等细胞因子。免疫奶山羊羊奶中的HBV抗体效价最高为1∶80,HCV抗体效价最高为1∶20;6个月后,HBV抗体效价无明显下降,HCV抗体效价下降明显。对奶牛5个批次的免疫结果显示,免疫次数应多于3次,免疫剂量以每头牛300μg为宜,间隔时间以1个月为宜。免疫牛奶中HBV抗体的阳性率约为66.0%,抗体效价最高为1∶160;HCV抗体阳性率约为17.0%,维持时间较短;孕牛比旺奶牛产生抗体的效价高。免疫牛奶中检测到了干扰素和白介素等细胞免疫活性因子。
- 尹文雷迎峰杨敬张为吕欣薛小平徐志凯韦三华李毅刘兵
- 关键词：乙型肝炎病毒丙型肝炎病毒
